关键词： 二氟甲基   不对称合成   异恶唑酮   药物分子  

摘要： 异恶唑-5-酮是很多临床常用的药物分子以及天然产物的母体骨架结构,对异恶唑酮结构进行化学修饰一直以来都是化学家们研究的重点方向之一。近年来,越来越多的研究发现异恶唑-5-酮核心结构的构建,尤其通过不对称催化在异噁唑-5-酮的C-4位构建季碳手性中心对新药研究具有重要的意义。此外,随着药物化学以及有机化学的发展,氟元素因其独特的理化性质受到合成药物学家的亲睐,因为使用氟原子替代苗头化合物的氢,不仅可以改善药物的代谢稳定性和构象稳定性,而且可以使药物具备更好的的生物利用度和生物选择性。在各种含氟取代基团中,二氟甲基(-CFH)最为特殊,因为F的强吸电子特性,使得其C-H键的氢原子具有一定的酸性,这样在改善相应分子物理化学性质的基础上,还可以进一步增强药物分子与靶点的相互作用,因此含二氟甲基化合物的合成受到了众多药物化学家的高度重视。目前催化不对成构建C-CFH化学键的方法十分有限,经常需要对底物进行预先设计,步骤繁琐,原子经济性差,因此发展一种操作简单,适用性广的将二氟甲基不对称引入异恶唑酮骨架的方法对药学研究具有重要的意义。本文中,我们描述了一种双三氟甲基取代的辛可尼丁方酰胺为催化剂,硫代靛红二氟亚胺与异恶唑-5-酮进行的不对称[3+2]环加成反应。该反应可以以很好的立体选择性以及产率得到连续含有四个手性中心的螺[吡咯烷-异恶唑酮]化合物。此外,MTT抗肿瘤实验发现这一类化合物具有潜在的抗肿瘤应用价值。

关键词： 金催化   邻硝基炔   膦氢化合物   氧化还原环化   亲核加成   还原   2-膦酰基吲哚-3-酮   不对称合成  

摘要： 吲哚酮是广泛存在于天然生物碱和生物活性分子中的一种独特的分子骨架。2-膦酰基吲哚-3-酮同时含有吲哚酮骨架和有机磷基团,在医药和有机化学领域引起了研究者的极大关注。所以开发一种步骤经济的合成方法构建2-膦酰基吲哚-3-酮是非常有必要的。磷是地壳中含量最丰富的元素之一,对生命体的生长发挥着不可或缺的作用,在自然界中分布较广。有机磷化合物由于其独特的生物活性广泛存在于农业、医药和荧光材料科学等领域中。手性BINOL磷酸和手性P(Ⅲ)配体可作为手性催化剂催化有机合成反应。鉴于有机磷化合物应用广泛,近年来有机磷化合物受到许多科研工作者的青睐,已经开发出了许多有机磷化合物的构建方法。但是,通过过渡金属催化的邻硝基炔与膦氢化合物氧化还原环化反应构建2-膦酰基吲哚-3-酮尚未被报道过。本论文的研究工作分为两个部分:一是金催化邻硝基炔与膦氢化合物氧化还原环异构化、亲核加成和还原反应构建2-膦酰基吲哚-3-酮;二是利用不对称催化的方法合成2-膦酰基吲哚-3-酮。在论文研究的第一部分,我们建立了金(I)催化的邻硝基炔与不同膦氢化合物的氧化还原环异构化、亲核加成和还原反应。在没有外部还原剂的情况下,通过邻硝基炔的分子内氧化还原环异构化以及随后分子间的亲核加成、还原反应,以中等至良好的产率(27-75%yield)获得了多种具有高官能团相容性的芳基膦酰基和烷基膦酰基吲哚-3-酮。机理研究表明,磷亲核试剂作为还原剂参与了N-O键的断裂。在论文研究的第二部分,对2-膦酰基吲哚-3-酮的不对称催化合成方法进行了初步的探索,通过筛选不同的金属催化剂与手性有机小分子催化剂或手性配体、溶剂和温度,初步确定了一种不对称合成2-膦酰基吲哚-3-酮衍生物的方法。在氯化亚金和手性联萘酚磷酸共催化下,三氯甲烷作为反应溶剂,20℃下反应24小时,对映选择性最高可达36%ee。

关键词： 螺烯   杂螺烯   杂螺烯类似物   不对称合成  

摘要： 螺烯是一类由至少四个芳(杂)环邻位稠合而成的具有螺旋结构的芳香化合物,其在有机小分子不对称催化、材料学、生物医药等领域的应用被广泛关注。目前,能够用于合成螺烯的方法主要包括光催化环化、Diels-Alder反应、Friedel-Crafts反应以及过渡金属参与的成环反应等。常见的螺烯化合物可以分为分子内只含有碳原子的全碳螺烯及分子内含有杂原子的杂螺烯,杂原子的引入可以增加螺烯化合物的潜在应用价值,作为一种特殊类型的螺烯分子,杂螺烯的合成研究报道相对较少。本文通过设计、合成高反应活性、多反应位点的新型底物,经过分子内环化反应,实现了两种类型杂螺烯类似物的合成。首先,我们设计合成了一类双炔基取代的萘酚衍生物,以甲苯为溶剂,在亲电试剂N-碘代丁二酰亚胺(NIS)的存在下形成联烯醌中间体,进而发生分子内氧杂[4+2]环加成反应,合成了单杂螺烯类似物。我们以该策略为核心,以72%-95%的产率得到了一系列单杂螺烯类似物消旋体,在此基础上,我们引入手性催化剂,期望化合物经手性联烯醌中间体生成手性产物。对反应催化剂、溶剂、浓度等条件筛选的结果表明:手性催化剂的加入对反应的立体选择性具有一定的控制作用。为了合成具有高对映选择性的杂螺烯类似物,我们对反应底物进行了进一步结构修饰,合成了四炔基取代的萘酚衍生物作为反应底物。以N-溴代邻苯二甲酰亚胺(NBP)为亲电试剂,在金鸡纳碱衍生的方酰胺催化剂作用下生成联烯醌中间体,再经过分子内环加成反应以优异的对映选择性(87%-96%)及良好的产率(32%-54%)实现了三对手性四-杂螺烯类似物的不对称合成。该策略的建立为杂螺烯分子的不对称合成提供了一种高效的制备方法,同时为手性杂螺烯化合物的应用开发奠定了一定的基础。

关键词： 不对称加成   过渡金属催化   手性1,3-二胺   水相有机反应  

摘要： 不对称催化是现代有机化学发展的主流方向之一,也是催化领域中的难点和重要挑战。从原料到市售化学品,再到药物的合成都离不开不对称合成的应用,其中手性配体至关重要。随着环境和资源问题不断凸显,对绿色高效的化学转化提出了更高的要求。因此,设计合成新型、绿色、高效、具有高对映选择性的催化剂显得日益重要。 在水相中实现高效的不对称反应是一个巨大的挑战。而手性胺是一种稳定且结合能力很强的配体,是在水相中进行不对称转化的理想选择。本论文介绍了手性1,3-二胺配体的设计、合成及在水中与过渡金属的不对称催化效果的评估等方面的内容。 本论文第一章综述了典型的手性二胺参与的不对称催化反应。以1,2-二胺和1,3-二胺为代表,讨论了这些手性化合物与镍、铜、钌、铑、钯等过渡金属配合使用时对反应的收率和选择性的影响。涵盖了不对称还原,氧化,偶联和重排等反应类型。 基于绿色化学的理念,第二章中结合计算机辅助设计,以市售的天然产物（–）-cytisine为起始原料,通过两步反应,以百克级的规模获得一种手性1,3-二胺配体并进一步对该配体的四个位点进行结构改造,共获得了12个新配体,通过1H-NMR,13C-NMR,Q-TOF和X-RAY等对其结构进行了表征。 第三章中,将设计合成的配体与Pd（TFA）2对芳基硼酸与N-磺酰亚胺在水中的不对称加成进行评估。分别讨论了具有不同空间位阻的五元环和六元环的N-磺酰亚胺及不同电子云密度的芳基硼酸对反应收率及选择性的影响。以75%-99%的收率和76%-99%ee获得了60种N-磺酰胺。与其他类型的配体相比,我们设计的配体在该反应中表现出很强的适用性。 第四章中,为进一步提高芳基硼酸与共轭烯酮的不对称加成的产率和选择性,在已经合成的配体的基础上,进一步优化。同样以水为溶剂,在过渡金属Pd和手性二胺配体催化下,在经过配体、添加物和相转移催化剂等一系列反应条件筛选、优化后确定最佳反应条件。对应的产品产率由原来42%提高到85%,对映选择性也由56%提高到96%。 通过一系列研究证明这些设计合成的手性1,3-二胺分子在水介质中催化不对称反应具有很大的应用潜力。可以预见这类手性1,3-二胺配体在绿色不对称催化领域具有较大的优势和发展前景,这项研究也为未来开发新的反应类型,探索新的应用提供了思路。

关键词： 卡托普利   不对称合成   中间体   路易斯酸   2-噁唑啉   杂环化反应  

摘要： 一、卡托普利是一种主要用于治疗高血压和充血性心衰的药物,它可以降低人体的心脏充血压力,控制心衰导致的心室动力不足,保护高血压患者的生命特征稳定,在临床治疗上发挥着重要的作用。在工业生产中,卡托普利大多由其重要中间体(S)-3-(乙酰硫基)-2-甲基丙酸与L-脯氨酸结合,然后水解酸化后得到。其中间体(S)-3-(乙酰硫基)-2-甲基丙酸的直接不对称合成难度较大,目前常用的办法是采用外消旋体手性拆分来获得(S)-3-(乙酰硫基)-2-甲基丙酸,但该方法需要使用大量的拆分剂,并且拆分剂回收利用工序比较复杂,回收过程中拆分剂损耗较大,生产成本较高。本文以α-甲基丙烯酸和硫代乙酸为原料采用不对称催化的方式来合成S构型为主的3-(乙酰硫基)-2-甲基丙酸,并建立了一套可行的不对称催化体系。该体系以金属催化的方式实现了对硫代乙酸和α-甲基丙烯酸的不对称加成-质子化反应的手性控制,从而使产物具有较好的对映选择性。在确定基本的工艺路线后,分别对其反应溶剂、反应温度、添加剂、配体、金属等方面进行了大量优化,筛选出了最优的反应体系。该体系以钛酸四异丙酯作为金属,以L-酒石酸二甲酯作为配体,在添加剂三氯乙酸钠的共同作用下,以良好的收率分离得到S构型为主的产物3-(乙酰硫基)-2-甲基丙酸,对映选择性最高达到了67%,为卡托普利中间体的合成提供了新的方法。二、噁唑啉是分子中含有一个双键的五元杂环化合物,根据其双键位置的不同分为2-噁唑啉、3-噁唑啉和4-噁唑啉。2-噁唑啉化合物因其拥有活泼的化学性质而得到广泛的应用。在有机合成、不对称催化、天然产物、材料科学和生物医学等领域中发挥着极其重要的作用。现有合成噁唑啉及其衍生物的合成路线大多反应条件苛刻,部分合成路线需用到金属来催化反应。本文希望通过路易斯酸促进不饱和酰胺N-(2-苯基烯丙基)苯甲酰胺的分子内亲核加成杂环化反应合成2-噁唑啉化合物。在确定基本思路后,对反应的温度、溶剂和路易斯酸进行了优化,筛选出了最优的反应体系。在25℃条件下,二氯乙烷做溶剂,以三氟甲磺酸三甲基硅酯来促进不饱和酰胺的分子内亲核环化反应。该反应体系拥有良好的底物适用范围,本文共分离出31个2-噁唑啉产物,以较高的产率(80-94%yield)分离得到分子内亲核加成环化反应产物。该反应一步生成2-噁唑啉化合物,并且具有反应条件温和、无金属、高效等优点,为2-噁唑啉及其衍生物的合成提供了一个新的合成方法。

关键词： 水稻化感物质   Momilactone A   不对称合成   Robinson环化   9β-H海松烷骨架  

摘要： 水稻(Oryza sativa L.)作为全球范围内主要的粮食作物,来源于稻壳的二萜类天然产物momilactones A和B(稻壳酮A和B)是水稻的重要化感物质,具有抗稻田杂草、抗菌以及诱导抗病等生物活性,生态学功能和生物合成调控广受关注。Momilactones类天然产物的9β-H海松烷核心骨架及其显著的生物活性,吸引了国内外众多合成研究者的关注。自该家族天然产物发现至今的近50年里已有来自世界范围内5个小组探索其化学合成,发展了针对核心9β-H海松烷骨架的合成策略6个,且仅有一例完成了消旋体momilactone A的全合成。这些合成策略的发展,为进一步探索该家族天然产物分子的不对称全合成提供了思路和启发。本论文以momilactones家族天然产物中的momilactone A为目标分子,聚焦于该分子骨架中极具挑战的稠三环内酯骨架及其C环的构建。分别通过ABD-C和ABC-D的骨架合成策略,探索其不对称全合成:(1)采用有机小分子催化的不对称Robinson环化策略性地构建了含有目标分子所需AB环结构的手性Wieland-Miescher酮,利用Birch还原串联Michael加成一步完成了双键的立体选择性还原和酯基的构建,为内酯D环的构建提供了实验依据。(2)经不对称催化的Robinson环化制备手性Wieland-Miescher酮甲基类似物,进一步通过烯丙基氧化立体选择地构建了B环中手性二级醇,对A环中α,β-不饱和双键进行立体选择性还原,实现了另外2个手性中心的构建。至此,构建了目标分子所需的6个手性中心中重要的4个连续手性中心。通过B环羰基α位甲酰基的引入活化反应位点,再与甲基乙烯基酮(MVK)发生基于底物的Robinson环化反应,构建出了C环。后续将推进C环的官能团化及内酯D环的构建,对甲基的引入和9β-H的构建以及内酯D环的构建进行了探索,推进了目标分子momilactone A的不对称全合成。

关键词： C2-季碳吲哚-3-酮   氧化去芳构化   不对称曼尼希反应   一锅法   固载有机催化  

摘要： 目的:C2-季碳吲哚-3-酮骨架代表一类重要的结构单元,存在于各种天然产物和生物活性分子中。此外,这些骨架还可以作为许多天然产物全合成的关键中间体。由于在结构、生物活性和合成应用方面的重要性,人们致力于合成这些有价值的C2-季吲哚啉-3-酮骨架。鉴于此,本论文为了深入拓展该骨架的构建方法,拟通过氧化去芳构化-不对称曼尼希串联反应一锅法、固载有机催化不对称曼尼希反应来构建C2-季碳吲哚-3-酮骨架。并且初步探讨了C2-季碳吲哚-3-酮类化合物的潜在应用价值。方法:(1)通过氧化去芳构化-不对称曼尼希串联反应一锅法合成C2-季碳吲哚-3-酮:在Cu I为金属催化剂,L-脯氨酸为有机催化剂,氧气作为绿色氧化剂条件下,通过2-取代吲哚与各种醛或酮的氧化去芳构化-不对称曼尼希串联反应一锅法合成含有手性季碳中心的C2季碳吲哚-3-酮骨架。(2)为了研究C2-季碳吲哚-3-酮的工业化应用,在前面的工作基础上,进一步发展了固载有机催化不对称曼尼希反应构建C2-季碳吲哚-3-酮:在固定化4-羟基脯氨酸的2-氯三苯甲基氯树脂作为有机催化剂,DMF为反应溶剂,0℃反应条件下,通过2-芳基-3H-吲哚-3-酮与各种醛或酮的不对称曼尼希反应来构建C2-季碳吲哚-3-酮骨架。(3)采用96孔板二倍稀释法筛选所合成的C2-季碳吲哚-3-酮化合物对*** ATCC25923和临床分离的多重耐药菌***(20151027077)的抗菌活性。结果:(1)通过氧化去芳构化-不对称曼尼希串联反应一锅法合成C2-季碳吲哚-3-酮:以35～86%的产率、2:1～>20:1 dr和48～99%ee合成了27个含有手性立体中心的C2-季碳吲哚-3-酮类化合物,并通过H-NMR、C-NMR、HRMS和X-Ray单晶衍射表征确认。(2)固载有机催化不对称曼尼希反应构建C2-季碳吲哚-3-酮:以良好的产率(38～83%)、优良的非对映选择性(2:1～>20:1 dr)和对映选择性(51～99%ee)合成了18个C2季碳吲哚-3-酮类化合物,并通过H-NMR、C-NMR、HRMS和X-Ray单晶衍射表征确认。(3)合成的C2-季碳吲哚-3-酮类化合物对*** ATCC25923和多重耐药菌***(20151027077)具有一定的抗菌活性,其中化合物4s对*** ATCC25923和多重耐药菌***(20151027077)的MIC值分别高达8μg/m L和16μg/m L。结论:本论文一共开发了两种方法用来构建C2-季碳吲哚-3-酮骨架:(1)氧化去芳构化-不对称曼尼希串联反应一锅法;(2)固载有机催化不对称曼尼希反应。成功实现了含有手性季碳中心的C2-季碳吲哚-3-酮骨架的构建。通过抗菌活性的初步筛选发现化合物4s对*** ATCC25923和多重耐药菌***(20151027077)具有抗菌活性。该研究为结构多样的C2-季碳吲哚-3-酮骨架合成方法作了重要补充。

关键词： 可见光催化   1,2-氨基醇   不对称合成  

摘要： 1,2-氨基醇结构广泛存在于药物活性分子、天然产物和一些重要的配体和催化剂中。目前常见的制备手性1,2-氨基醇的方式有氨基酸还原法、环氧化合物开环氨化、曼尼希型反应、烯烃双官能团化等,利用光催化自由基偶联的方式也有报道。由于自由基反应活性高,而氢键相互作用的能量又较低,因此自由基反应的手性控制一直是化学合成的一个难点。目前利用光敏剂与手性催化剂协同催化成为该类反应立体控制的通用策略。光催化具有绿色、无污染可持续,并且官能团的耐受性强等特点,在有机合成中已经成为一种强有力的合成工具。我们采用课题组自主研发的DPZ作为光催化剂,手性磷酸（CPA）作为氢键催化剂,使用易于获得的氮杂芳基酮和N-芳基甘氨酸不对称自由基偶联合成一系列1,2-氨基醇类化合物。此反应中,碱性的羰基产生中性的羰游基自由基,该自由基与手性磷酸催化剂通过氢键相互作用,从而实现反应的立体控制。该方法证明了氢键催化策略的切实可行性。

关键词： 转氨酶   不对称合成   (S)-苯氧基丙胺  

摘要： 手性胺可以用来制备各种药理学性质的多种生物活性化合物。(S)-苯氧基丙胺是一种重要的手性中间体,可被用来合成治疗抑郁症的药物。转氨酶酶法不对称催化合成的方法相比于化学合成法,其立体选择性强,反应条件温和,操作简便,成本较低,污染少,且能完成一些在化学反应中难以进行的反应。因此该方法越来越受研究者们的关注。本课题通过挖掘新型转氨酶基因并将其应用于合成(S)-苯氧基丙胺,最终建立高效可行的转氨酶法制备工艺。主要研究内容如下:1.S-型转氨酶的挖掘与筛选。本课题通过genome mining技术从Conexibacter woesei DSM 14684、Herpetosiphon aurantiacus DSM 785 和 ***27/96菌株中挖掘到10种转氨酶基因并成功对其克隆和表达。利用底物苯氧基丙酮对十种转氨酶进行筛选,有两株转氨酶显示出了催化活力,其中RSA表现出了最高的催化活力和立体选择性,产物ee值达到99.9%(S-构型)。因此,选择RSA作为进一步研究对象。***酶学性质的研究。经镍柱亲和层析后得到纯酶。RSA的最适温度为40℃,在30℃ 24 h后残余酶活最高。最适pH为pH 8.0的磷酸钠缓冲液。金属离子对转氨酶影响结果:Ni+对酶的激活作用最强,相对酶活为128%。RSA具有广泛的底物谱,对芳香酮类和脂肪酮类均具有活性,其中,对苯氧基丙酮的催化活性最高。动力学常数分析结果是对苯氧基丙酮具有较高的亲和性和催化活性,Km值大小为0.73 mM,Vmax值为28.7 U/mg。***表达优化与酶活对比。由于pET-28a/RSA大部分形成包涵体,因此选取九种表达载体进行RSA的表达优化。结果显示:表达质粒pMBP-C/RSA为可溶性表达。通过纯酶液反应和全细胞催化反应比较目的蛋白的催化活性,分析发现,优化后的酶活性为先前的65%。但表达质粒pET-28a/RSA的全细胞催化明显优于表达质粒pMBP-C/RSA全细胞催化,表达质粒pET-28a/RSA可以在9 h内转化底物100 mM,表达质粒pMBP-C/RSA在9h仅转化底物60mM。因此,以表达质粒pET-28a/RSA为下一步研究对象。4.不对称催化合成工艺的建立。不同氨基供体研究结果显示L-丙氨酸为最适的氨基供体。三种级联途径中,RSA与丙酮酸脱羧酶级联反应效果最优,在各30 g/L冻干菌体投量下,辅酶投量为1 mM时,反应9小时能转化100 mM底物。最大底物浓度研究结果显示,表达质粒pET-28a/RSA的全细胞催化最大反应底物浓度为100 mM。最适工艺条件研究结果显示:在RSA和丙酮酸脱羧酶(PDC)投菌量均为30 g/L,磷酸吡哆醛(PLP)和硫胺素焦磷酸(TPP)投量均为为0.5 mM和L-丙氨酸(L-Ala)的投量为250 mM时,100 mM底物在12h内可以完全转化。产物纯化结果显示,通过乙酸乙酯萃取旋蒸得到油状液体的(S)-苯氧基丙胺粗品,收率达到95%,产物含量为99.5%。本反应成功实现了转氨酶法制备100 mM的(S)-苯氧基丙胺,为进一步实现其工业化应用奠定了良好的基础。

关键词： 老黄酶   不对称合成   一步纯化固定化   多酶级联   手性化合物  

摘要： 老黄酶是一类可催化ɑ,β位不饱和醛、酮、酯、腈和硝基化合物及其衍生物发生不对称氢化反应的NAD（P）H依赖性氧化还原酶,由于其催化C=C键的还原反应可产生两个手性中心,被广泛用于精细化学品和药物的生产中。这类酶的大规模应用往往受限于昂贵的辅酶NAD（P）H,通过与葡萄糖脱氢酶偶联可实现辅酶的再生。本文基于老黄酶构建了辅酶再生体系及多酶级联催化体系,分别催化烯酮不对称还原合成（3S）-3-甲基环己酮和反式（1S,3S）-3-甲基环己醇。同时,为解决游离酶稳定性差、难以重复使用等问题,将固定化酶技术应用于酶的生物体外转化,结合IMAC技术对制备的二氧化硅纳米花（SiO）进行Ni-NTA修饰,通过His-tag与Ni之间的亲和作用实现对带有His-tag酶的一步分离纯化及固定化。主要研究内容如下:（1）从基因库中获得来源于Saccharomyces pastorianus的老黄酶（Old yellow enzyme 1,OYE1）的基因序列,以p ET-28b（+）为表达载体,*** BL21（DE3）为表达宿主构建了基因重组菌株,并分别验证了重组质粒的成功构建和目的蛋白的可溶性表达。对发酵条件进行了优化,按1%的接种量将重组菌株接种于含卡那霉素（终浓度为50μg/m L）的LB液体培养基中,37℃下培养,菌液浓度OD达到0.6时,加入终浓度为0.4 m M的诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）,诱导18 h,此时OYE1的酶活达到最高462.68 U/g。进一步对含OYE1的发酵液进行分离纯化,探究了OYE1的酶学性质,其最适温度为35℃,最适p H为9.5。（2）制备了形貌及粒径均一的SiO纳米花,并对其进行Ni-NTA功能化,获得功能化固定化酶载体Ni-NTA@SiO。SDS-PAGE实验表明Ni-NTA@SiO对带有His-tag的目的蛋白OYE1和GDH具有良好的选择性。随后,将固定化酶（OYE1&GDH@Ni-NTA@SiO）用于催化3-甲基-2-环己烯-1-酮的不对称氢化反应,在p H为7.5的磷酸盐缓冲液中,加入终浓度分别为0.2 m M的NADP,20 m M的葡萄糖及初始浓度为10 m M的底物,30℃下反应24 h,3-甲基-2-环己烯-1-酮的转化率及选择性均>99%。此外,OYE1&GDH@Ni-NTA@SiO较游离酶展现出更好的热稳定性、p H稳定性、储存稳定性及重复使用性。OYE1&GDH@Ni-NTA@SiO重复使用7次后,3-甲基-2-环己烯-1-酮的转化率仍能保持在46.02%。（3）开发了多酶一锅级联催化体系,利用老黄酶和醇脱氢酶（ADH-A）级联催化3-甲基-2-环己烯-1-酮转化为高附加值的手性醇类化合物,并偶联GDH实现辅酶（NADPH和NADH）的原位再生。在“一锅”反应中,生物催化剂OYE1&ADH-A&GDH@Ni-NTA@SiO催化3-甲基-2-环己烯-1-酮不对称还原为反式（1S,3S）-3-甲基环己醇,优化固定化条件及反应条件后,反式（1S,3S）-3-甲基环己醇的产率可高达92.37%（ee>99%）。较游离酶而言,OYE1&ADH-A&GDH@Ni-NTA@SiO提升了酶的热稳定性、p H稳定性、储存稳定性及重复使用性。在连续5次循环使用后,反式（1S,3S）-3-甲基环己醇的产率仍保持在45.27%,且展现出高的立体选择性（ee>99%）。此外,进一步证实了生物催化剂OYE1&ADH-A&GDH@Ni-NTA@SiO对环状、链状及芳香族烯酮类化合物均具有良好的催化性能。