关键词:
超高效液相色谱法(UHPLC)
狼牙蜜
指纹图谱
化学模式识别
掺伪鉴别
摘要:
采用超高效液相色谱法(UHPLC)建立28批不同产地狼牙蜜样品的指纹图谱,结合化学模式识别对狼牙蜜进行质量研究,为狼牙蜜的掺伪鉴别和产地来源判断提供依据。称取狼牙蜜样品20 g,加入15 mL水,涡旋溶解,然后加入15 mL乙酸乙酯,涡旋提取,离心后,取上清液,残渣中加入10 mL乙酸乙酯重复提取一次,合并上清液,于30℃氮吹至近干,用1 mL甲醇复溶,过0.22μm有机滤膜。滤液注入超高效液相色谱仪,以ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱为固定相,以0.1%(体积分数,下同)甲酸溶液-含0.1%甲酸的甲醇溶液为流动相体系进行梯度洗脱,用二极管阵列检测器在检测波长280 nm下进行测定。利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012.130723版),得到28批狼牙蜜样品的指纹图谱和对照指纹图谱,生成22个共有峰。通过与混合对照品溶液色谱图进行比对,初步指认出其中9个共有峰,对应的化合物分别为对羟基苯甲酸、咖啡酸、对香豆酸、阿魏酸、芥子酸、丁香酸甲酯、槲皮素、山奈酚、白杨素。28批狼牙蜜样品的指纹图谱与对照指纹图谱的相似度为0.909~0.993。对掺入不同质量分数(5%~50%)油菜蜜和洋槐蜜的狼牙蜜样品进行模拟掺伪检测分析,得到的掺伪狼牙蜜样品的指纹图谱与对照指纹图谱的相似度为0.251~0.853。采用分层聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘-判别分析对28批狼牙蜜样品进行研究,结果表明,3种方法均将28批狼牙蜜样品分为3类,徽县产区的样品被分为一类,两当县产区的样品被分为两类。对指认出的9种化合物进行定量分析,9种化合物标准曲线的线性范围均为0.5~200.0 mg·L^(-1),检出限(3S/N)均为0.01 mg·kg^(-1),28批狼牙蜜样品中对羟基苯甲酸、芥子酸、槲皮素、山奈酚含量较高,但各批次样品中每种成分含量差异较大。