关键词:
支气管哮喘
艾灸
肺俞
天枢
气道重塑
免疫细胞分化
短链脂肪酸
炎症因子
肺肠同治
摘要:
目的 探讨艾灸肺俞、天枢防治支气管哮喘的可能作用机制。方法 48只SD大鼠随机分为正常组12只、造模组36只。造模组大鼠采用卵清白蛋白(OVA)腹腔及皮下注射致敏联合雾化激发的方法构建支气管哮喘大鼠模型。将造模成功的32只大鼠随机分为模型组、肺俞组、天枢组和肺俞-天枢组,每组8只。正常组和模型组大鼠捆绑固定不做干预,肺俞组大鼠艾灸双侧“肺俞”30 min,天枢组大鼠艾灸双侧“天枢”30 min,肺俞-天枢组大鼠艾灸双侧“肺俞”和“天枢”各15 min。艾灸干预结束1 h后,除正常组外其余各组大鼠均给予1%OVA溶液雾化激发20 min,正常组用同体积0.9%氯化钠溶液雾化20 min。以上干预措施均每天1次,连续14天。造模后和干预期间进行行为学观察,末次干预24 h后取材,采用HE染色、Masson染色分别观察各组大鼠肺组织病理学形态变化,计算胶原纤维沉积面积百分比;ELISA法检测血清中白细胞分化抗原11b (CD11b)、白细胞分化抗原40 (CD40)、白细胞分化抗原86 (CD86)、程序性死亡配体2 (PD-L2)含量,以及肺组织中白细胞介素8 (IL-8)、白细胞介素11 (IL-11)、白细胞介素27 (IL-27)含量;Western blot法检测肺组织中基质金属蛋白酶9 (MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂1 (TIMP-1)、转化生长因子β(TGF-β)蛋白表达水平;采用气相色谱-质谱联用检测器检测大鼠粪便中6种(乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、戊酸、正己酸)短链脂肪酸(SCFAs)含量。结果 与正常组比较,模型组大鼠逐渐出现精神萎靡或烦躁不安,毛发枯槁暗淡,活动迟缓,进食量减少,大便不成形,伴有呼吸急促、喘息症状;病理学形态结果显示肺组织结构重度异常,支气管周围可见大量炎症细胞浸润,气道平滑肌层增厚以及大量胶原纤维沉积,胶原纤维沉积面积百分比增加;大鼠血清中CD11b、CD40、CD86、PD-L2含量均升高,肺组织中IL-8、IL-11、IL-27含量和MMP-9、TGF-β、TIMP-1蛋白表达均升高,粪便中乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、戊酸、正己酸含量均降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,肺俞组、天枢组和肺俞-天枢组大鼠精神状态、毛发色泽、活动度、饮水进食以及呼吸急促、喘息症状均有所改善,大便基本成形,肺组织病理学形态均得到改善,大鼠血清中CD11b、CD40、CD86、PD-L2含量,肺组织中IL-8、IL-27含量和TGF-β蛋白表达,以及胶原纤维沉积面积百分比均降低;肺俞组和肺俞-天枢组肺组织中IL-11含量及MMP-9、TIMP-1蛋白表达均降低;肺俞-天枢组粪便中6种SCFAs含量均升高(P<0.05或P<0.01)。与肺俞组比较,肺俞-天枢组肺组织中胶原纤维沉积面积百分比、TIMP-1蛋白表达降低,粪便中乙酸、丁酸含量升高(P<0.05或P<0.01)。与天枢组比较,肺俞-天枢组血清中CD40含量降低,肺组织中胶原纤维沉积面积百分比、IL-11含量及MMP-9、TGF-β、TIMP-1蛋白表达降低,粪便中乙酸、丙酸、丁酸含量升高(P<0.05或P<0.01)。结论 艾灸肺俞、天枢对支气管哮喘大鼠的气道重塑有较好的治疗作用,且肺俞与天枢两穴联用具有协同作用,其作用机制可能与调节肠道SCFAs含量、影响免疫细胞分化、减轻气道炎症有关。