关键词： 胱抑素C   背景荧光猝灭-免疫分析法   纳米材料   荧光内过滤效应   盐酸克伦特罗  

摘要： 目的:作为一种不易受外界因素干扰的理想型标志物,胱抑素C（cystatin C,Cys C）主要用于评估肾小球滤过率（Glomerular Filtration Rate,GFR）,反映肾功能方面的疾病。近年来,Cys C在评估心脑血管、颈动脉粥样硬化或肝脏疾病等其他疾病方面也发挥了重要作用,成为了一种具有广阔应用前景的临床检测指标。但目前其检测手段存在局限性,有必要开展Cys C检测方法的深入研究。盐酸克伦特罗（Clenbuterol hydrochloride,CL）可提高动物体的胴体瘦肉率,故常被用作一种“瘦肉精”进行非法添加,并导致食物中毒案件频发,因此,开展CL检测方法研究势在必行。本研究旨在建立方便、快捷、灵敏且适用于基层普查的Cys C和CL定量检测方法,以期为临床与食品安全的检测与监控提供新的视角与技术参考。方法:（1）背景荧光猝灭-免疫层析技术（background Fluorescence Quenching Immune Chromatographic Assay,b FQICA）是在传统金免疫层析技术（Gold Immune Chromatographic Assay,GICA）的基础上发展起来的一种能够定量检测的免疫分析技术,在GICA免疫层析试纸条的固相上增加了一层“背景荧光”,采用金纳米粒子作为猝灭剂,利用免疫反应中的双抗体夹心原理,通过检测检测线（T线）处与“背景荧光”的相对荧光强度（F1/F2）进行Cys C的定量检测。（2）荧光内过滤免疫分析技术（Fluorescence internal filtration immunoassay,FIFI）是基于荧光内过滤效应的液液均相反应,仍采用金纳米粒子作为猝灭剂,利用免疫反应中的竞争法原理,通过检测荧光强度进行CL的定量分析。结果:（1）在0.0-100.0 ng/m L的范围内,胱抑素C的浓度与相对荧光强度（F1/F2）呈现良好的相关性（r=0.9977）,检出限为0.69 ng/m L,加标回收率在87.9%-110.8%之间,批内与批间相对标准偏差均小于15%,血清中常见的干扰物质以及抗凝剂等均对测试结果无影响,与临床检测方法对比,无显著性差异（t=0.963,P=0.338＞0.05）。（2）在0.0-5.0 ng/m L的范围内,盐酸克伦特罗浓度与荧光强度呈现良好的相关性（r=0.9986）,检出限为0.01 ng/m L,加标回收率在98.1%-101.2%之间,批内与批间相对标准偏差均小于15%,与酶联免疫吸附法（ELISA）对比,无显著性差异（t=1.401,P=0.169＞0.05）。结论:（1）背景荧光猝灭免疫层析技术能够快速灵敏地检测血清胱抑素C,并且简单易行,抗干扰能力强,可以应用于社区和基层医疗机构的普查。（2）荧光内过滤免疫分析技术可快速灵敏的检测盐酸克伦特罗,仪器便携且成本低,有望在食品安全检测与监控方面提供重要的技术支持。

关键词： 慢阻肺   布地奈德福莫特罗   噻托溴铵   肺功能  

摘要： 目的:探讨布地奈德福莫特罗联合噻托溴铵吸入用于C、D组慢阻肺的治疗价值.方法:回顾分析本院2018年2月～2019年2月收治的80例慢阻肺患者临床资料,随机均分为两组,对照组选择布地奈德福莫特罗吸入,观察组加用噻托溴铵吸入.结果:观察组治疗总有效率高于对照组,P<0.05;观察组FVC、FEV1、FEV1/FVC均优于对照组,P<0.05;观察组呼吸困难评分低于对照组,P<0.05;观察组6MWD大于对照组,P<0.05.结论:布地奈德福莫特罗联合噻托溴铵吸入可以提升疗效、改善肺功能并增强生活能力.

关键词： 职业精神  

摘要： 众所周知,C罗能取得今日的成就,离不开他的严格自律和职业精神。我们都听说过C罗一天做三千个俯卧撑的故事,那么,C罗究竟有多勤奋刻苦呢?C罗在2018年夏天开启了中国行,在北京和上海参加了各种活动,见到了无数的中国球迷。结束中国行之后,C罗在7月28号回到了西班牙的马德里。上午刚刚回

摘要： This project delivers to the scholar and performer a critical edition of a little-known horn concerto by Antonio Rosetti. Standing in contrast to performance or practical editions, critical editions demand that the editor exerts a non-trivial measure of authority over the state of the text. Performers often find this fact to be uncomfortable given the normal tendency to revere the perceived intent of the composers based upon the text that they set down. When engaging with sources, it is rarely clear what that intent is, or which of the available sources most closely represents that intent. Those available sources often disagree with one another, even those in the composer’s own hand. It is vital for the editor to know, as precisely as is possible, who created the source material, when they created these sources, and why they created these sources. At that point the editor must decide which sources will best fit his or her framework for the creation of the critical edition. At that point the editor will grapple with numerous inconsistencies and ambiguities within those sources, and then use his or her own authority to fix the text of the composer’s work into a single version for today’s use. The Horn Concerto in E-flat Major (C41) by Rosetti presents a unique case to the editor, scholar, and performer, in that it exists in two versions that carry substantial differences in the solo part. These differences are so great that it is often difficult to consider them as representative of the same work. This edition presents both versions, as each have different original purposes, and edits them in parallel so that the performer may determine which usage is most appropriate for his or her needs.

关键词： β-胡萝卜素   Crispr-cas9   代谢平衡   解脂亚罗酵母  

摘要： 解脂亚罗酵母是生物合成β-胡萝卜素的理想菌株,目前本课题组已经利用解脂亚罗酵母成功构建了具有β-胡萝卜素合成能力的重组菌株,但还存在以下问题尚未解决,首先该重组菌株中所有基因均为游离表达,质粒和菌体不会同时进行复制,菌株的稳定性较差且β-胡萝卜素含量较低;其次用于解脂亚罗酵母中的基因工程技术效率较低。因此,本研究拟以解脂亚罗酵母作为底盘细胞工厂构建产β-胡萝卜素的稳定菌株,在此基础上通过调控代谢平衡提高β-胡萝卜素的含量,并在解脂亚罗酵母中对Crispr-cas9技术进行初步探索。主要研究内容和结果如下:(1)产β-胡萝卜素稳定菌株YL-C1的初步构建。通过在polf和产油菌株polf-mfe--pex10-中合成β-胡萝卜素筛选出最优宿主菌为polf,在中敲除Ku70基因提高同源重组的效率,在此基础上以Snf为靶点将基因Thmg,Ggs1,CarRA,CarB整合至敲除ku70基因的*** polf基因组中,构建了产β-胡萝卜素的稳定重组菌株,经过60代的传代重组菌株的稳定性下降缓慢,β-胡萝卜素的含量达到了2.34mg/g DCW。(2)调控关键基因Thmg、Ggs1的拷贝数提高β-胡萝卜素的含量。对*** polf(Δku70)中β-胡萝卜素代谢通路的中间产物HMG-CoA,FPP测定后发现,当菌体中含有2Thmg时,β-胡萝卜素的含量达到最高,为14.12 mg/g DCW,当菌株中含有1Ggs1时,β胡萝卜素的含量最高,为11.86mg/g DCW。(3)解脂亚罗酵母中Crispr-cas9体系的构建。通过对影响Crispr-cas9技术关键因素的研究发现敲除基因Ku70使同源重组的效率提高25%;最佳Donor DNA长度为100bp;Donor DNA浓度越高越好:打靶位点的评分系统中特异性分在100左右、推荐细胞中表达的指导分数在60左右,推荐用于体外转录的指导分数在40左右,框架内缺失的克隆百分比分数在40左右,脱靶效率为0时效果最佳。本研究构建了产β-胡萝卜素的稳定重组菌株YL-C1,对生物合成类胡萝卜素具有一定的指导意义;同时对解脂亚罗酵母中Crispr-cas9技术进行了初步探索,这为在解脂亚罗酵母中利用Crispr-cas9技术奠定了基础。

关键词： 弑父   葡萄牙人   进取心   肌肉  

摘要： 现在,经过几波鸡汤或者鸡血的刷屏,不管喜不喜欢足球,不管喜不喜欢C罗,但大概齐人人都知道C罗的肌肉、自律和不知疲倦的进取心了。就连我妈,她也能指着电视里那个外国男人,说,他的身材可没有那个葡萄牙人好,人家浑身50%都是肌肉,体脂才7%呢。

关键词： LPL   北京时间   职业生涯   俱乐部   马德里   合同  

摘要： 北京时间7月10日晚间,五届世界足球先生/金球奖得主,刚刚带领皇家马德里俱乐部夺得欧冠三连冠的克里斯蒂亚诺·罗纳尔多(以下简称C罗),正式转会意甲豪门尤文图斯。据悉,他的转会费达到了1.05亿欧元,合同长达四年,年薪3000万。对于已经33岁的C罗来说,这无疑将是他职业生涯最后一纸大合同。同时,在皇马服役的九年期间,欧冠、联赛、国王杯,冠军拿到手软,不仅如此,在个人荣誉方面,C罗也完成了对宿敌梅西的弯道超车。

关键词： 新闻   评论   商业利益   赞助合同   商业形象   赞助商   运动员   生命线  

摘要： 真正让C罗团队被动的，是像耐克这样赞助商对自身商业利益的警惕。C罗是耐克第三位“终身运动员”，赞助合同价值超过10亿美元，这样的商业形象关联才是真正的生意生命线。

关键词： C罗   足球   体育运动   运动员  

摘要： 有多少人爱C罗，就有多少人恨C罗。他才华横溢，对自己充满自信，甚至是自负。很多球员吹嘘自己伟大，但C罗打骨子里认为自己伟大，不仅是现阶段最好的球员，甚至是历史最佳。

关键词： 瑞士手表   世界杯足球赛   自律   刻苦   生活   罗纳尔多   克里斯蒂   退役年龄  

摘要： 一人扛起一个国家队 今年俄罗斯世界杯足球赛最大的热点无疑是C罗（克里斯蒂亚诺·罗纳尔多）。原本已近退役年龄，却一人扛起一个国家队，令全世界为之欢呼。