关键词： 牛病毒性腹泻病毒   宿主特异性   黄病毒科   瘟病毒属   交叉感染   交叉反应   BVDV   边界病病毒  

摘要： 牛病毒性腹泻病病毒(BVDV)为一类黄病毒科、瘟病毒属的单股正链RNA病毒。该病毒在血清学上与猪瘟病毒(CSFV)及羊边界病病毒(BDV)存在交叉反应。此类病毒具有突破宿主特异性交叉感染的能力,不仅感染牛,还可感染其他动物。BVDV的存在对养殖生产造成很大危害。牛血清制备生物制品可能存在BVDV感染和潜在感染的风险。基于此,本文分析了牛病毒性腹泻/黏膜病病毒荧光定量PCR检测方法,以期为相关人员提供参考。

关键词： HIV   艾滋病   抗病毒治疗   及时性   影响因素  

摘要： 目的了解大理市近年新报告HIV/AIDS病例及时接受艾滋病抗病毒治疗情况,并分析其影响因素。方法从中国疾病预防控制信息系统下载现住址为大理市2018—2022年新报告HIV/AIDS病例随访和抗病毒治疗数据,对病例采用描述性研究、χ^(2)检验、多因素Logistic回归等方法分析抗病毒治疗及时性及影响因素,以P<0.05为差异有统计学意义。结果2018—2022年大理市新报告HIV/AIDS病例接受抗病毒治疗及时率60.44%(327/541),及时启动治疗时间中位数为10d,5年间患者接受治疗及时率差异有统计学意义(χ^(2)=22.308,P<0.001),2020年及时率最高。多因素Logistic回归分析显示:女性治疗及时率比男性高(OR=1.784,95%CI:1.061~2.999);外地报告转入(OR=0.387,95%CI:0.196~0.762)、离异或丧偶(OR=0.563,95%CI:0.344~0.950)、离退人员(OR=0.31,95%CI:0.138~0.696)、来源于医院就诊者检测(OR=0.332,95%CI:0.173~0.639)、来源于其他机构检测(OR=0.448,95%CI:0.221~0.905)、首次CD4细胞计数≥500个/μl(OR=0.445,95%CI:0.220~0.899)、CD4细胞未检测(OR=0.008,95%CI:0.001~0.062)、首次CD4细胞检测时间>14 d(OR=0.105,95%CI:0.062~0.181)治疗及时率相对较低。结论大理市抗病毒治疗及时性受报告地区、性别、婚姻、人群分类、样本来源、首次CD4细胞计数、首次CD4细胞检测时间等因素影响,可针对上述影响因素进行干预,提高抗病毒治疗及时率。

关键词： 牛病毒性腹泻病毒   囊膜蛋白E2   腺病毒载体   免疫效果   病理变化  

摘要： 为构建牛病毒性腹泻病毒(BVDV)囊膜蛋白E2重组腺病毒并分析其免疫效果。本研究通过PCR扩增获得目的基因BVDV E2,将其与穿梭载体pDC316-CMV-EFla-copGFP连接得到重组腺病毒载体,抽提质粒后酶切鉴定。将目的质粒与腺病毒骨架质粒p BHGlox-ΔE1,3cre采用AdMax系统共转染至Low Passage 293细胞中得到重组腺病毒rAdv-E2,同时包装重组腺病毒rAdv-EGFP用于阴性对照并均经PCR和测序鉴定;将重组腺病毒rAdv-E2和rAdv-EGFP分别感染Low Passage 293细胞后扩繁,并采用RT-PCR和TCID_(50)检测目的基因的表达及腺病毒滴度;将BVDV E2基因克隆至原核表达载体pET-28a中,转化至大肠杆菌Transetta(DE3)感受态细胞,使用IPTG诱导表达后经Ni-NTA琼脂糖树脂纯化获得重组E2蛋白(rE2),用于后续特异性抗体的检测;以1×10^(8)TCID_(50)/只分别将重组腺病毒r Adv-E2和r Adv-EGFP经肌肉注射免疫BALB/c小鼠,分别于第0、14 d两次免疫,首免后分别于7 d、14 d、21 d、28 d断尾采血,通过间接ELISA方法检测各组小鼠血清抗体水平;于首免后21 d时分别以BVDV TC株攻毒,于攻毒后0、5 d、10 d及15 d从各组小鼠中随机剖杀3只,取肝脏、肺脏、肾脏组织,使用福尔马林溶液固定小鼠各组织后,经脱水浸蜡、包埋、切片、HE染色后观察攻毒后各组小鼠的组织病理变化情况。结果显示,RT-PCR鉴定结果表明重组腺病毒r Adv-E2表达E2基因;ELISA检测结果显示,rAdv-E2组小鼠在免疫后7 d、14 d、21 d时抗体水平升高,28 d时显著升高,rAdv-EGFP组小鼠抗体水平无明显变化,rAdv-E2组小鼠的抗体水平整体极显著高于rAdv-EGFP组(P<0.001、P<0.0001),表明rAdv-E2诱导小鼠产生了良好的体液免疫反应;组织病理切片观察结果显示,BVDV攻毒后,接种rAdv-EGFP的对照组小鼠肝脏组织出现肝细胞变性坏死、水肿、炎性细胞增多,中央静脉有淤血产生;肺脏组织病变特征主要为肺泡破裂融合,炎性细胞浸润、出血、充血,黏膜脱落;肾脏组织有炎症产生,出现淋巴细胞浸润等病变特征,rAdv-E2免疫组小鼠各组织仅出现较轻的细胞病变,表明重组腺病毒r Adv-E2可以保护BALB/c小鼠免受BVDV的感染而致病。综上结果表明,重组腺病毒r Adv-E2将有望成为防控BVDV感染的新型疫苗。

关键词： 慢性乙型肝炎病毒   恩替卡韦   HBeAg转阴  

摘要： 分析在慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染患者中应用恩替卡韦的临床疗效。方法 从2021.10-2022.10在本院就医的慢性HBV感染患者中选出72例,采用数字表分组方式,将其设定为对比组(36例、使用阿德福韦酯)、探究组(36例、使用恩替卡韦)。针对临床疗效进行对比。结果 探究组相关血清指标更优,HBV-DNA转阴率更高,治疗有效率及患者满意度(97.22%、97.22%)相较于对比组(80.56%、83.33%)均更高,不良反应发生率(8.33%)相较于对比组(19.44%)更低,(P<0.05)。结论 在面向慢性HBV患者实施治疗时,恩替卡韦有助于临床疗效的提升,且能够对不良反应起到较好的控制效果。

关键词： 去泛素化酶   新型冠状病毒   艾滋病病毒   流感病毒   调控机制  

摘要： 泛素化修饰在细胞生理过程维持中起着至关重要的作用,而去泛素化酶(deubiquitinating enzymes, DUBs)通过特异性移除靶蛋白上的泛素分子,以维持细胞内泛素化修饰的动态平衡。泛素特异性蛋白酶(ubiquitin specific protease, USP)作为DUBs家族中的重要组成,因其高度的多样性和特异性,在调控病毒复制和宿主免疫应答中发挥着关键作用。研究表明,不同USP蛋白依赖迥然不同的分子策略,可以正向或负向调控病毒复制,影响宿主的抗病毒免疫反应。其中,USP4、USP8、USP13、USP15和USP49等成员在抗病毒免疫中具有积极作用,而USP1、USP7、USP33和UL36泛素特异性蛋白酶(UL36USP)等则可能抑制宿主的免疫反应。本文综述了USP家族成员在抗病毒免疫应答中的调控机制,并探讨了这些调控机制的最新研究进展。这些研究不仅揭示了USPs在病毒与宿主相互作用中的复杂角色,而且为开发针对病毒的新型治疗策略提供了潜在的分子作用靶标和理论依据。

关键词： 口蹄疫病毒   持续感染细胞系   BHK21   利巴韦林   氯化铵   免疫阳性血清  

摘要： 为研究口蹄疫病毒(FMDV)持续感染形成的分子机理,本研究利用氯化铵、利巴韦林、免疫阳性血清和低剂量病毒处理O型FMDV(CATHAY株)和BHK21细胞建立持续感染细胞系,采用RT-PCR、核酸测序、IFA和Western-blot方法筛选和验证持续感染细胞模型。结果显示,除了低剂量病毒感染方法能连续传代,且从第5~20代次细胞中扩增到与亲代毒株高度同源的FMDV VP1基因,并能检测到VP1蛋白外,其他方法由于对细胞具有明显毒性作用,未能建立持续感染细胞模型。笔者认为化学药物可能不适合所选病毒毒株建立持续感染模型,而利用低剂量病毒法建立FMDV持续感染细胞系是一种简单可行的方法。上述结果表明,本研究成功建立了FMDV持续感染BHK21细胞模型,这为研究FMDV与宿主的互作关系,阐明FMDV持续感染机理奠定了重要的理论基础。

关键词： 鸭甲肝病毒3型   VP1基因   遗传进化分析   重组分析  

摘要： 为了解信阳地区鸭甲型肝炎病毒3型的遗传变异特性,对信阳市发生疑似肝炎的金定雏鸭进行9种常见病毒PCR/RT-PCR检测,同时采集病鸭肝脏组织无菌处理后,尿囊腔接种10日龄SPF鸭胚进行病毒分离,并对分离毒株进行全基因组和VP1基因序列分析。结果:成功分离到1株鸭甲型肝炎病毒3型(DHAV3),命名为HNXY23;接种病毒的鸭胚发育不良,死亡胚体全身呈出血水肿;序列比对和系统发育树表明,分离株HNXY23属于DHAV3 GⅠ基因型,与2022年分离株HB-1、HZ-1、HZ-2和HZ-3亲缘关系较近;利用DNAMAN软件比对31株DHAV3 VP1氨基酸位点变异情况,发现在184、187、195、206和209位这5个氨基酸位点有较为明显的变化差异。本研究结果丰富了信阳地区DHAV3的分子流行病学资料,为进一步研究DHAV3的致病机制奠定了基础。

关键词： 寨卡病毒   登革病毒   基孔肯雅病毒   献血者  

摘要： 目的了解昆明地区献血人群中寨卡病毒(ZIKV)、登革病毒(DENV)和基孔肯雅病毒(CHIKV)感染的流行情况。方法随机抽取2022年8月-2023年10月昆明地区献血者标本10662份,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应技术(RT-qPCR)检测ZIKV RNA、DENV RNA和CHIKV RNA。结果10554份标本获得了有效的检测结果,在这次调查中未发现ZIKV、DENV和CHIKV核酸阳性。结论昆明地区无偿献血人群中ZIKV、DENV和CHIKV的感染风险较低,暂时没有必要对昆明地区无偿献血人群进行ZIKV、DENV和CHIKV的常规筛查。

关键词： 玉米褪绿斑驳病毒   玉米矮花叶病毒   小麦线条花叶病毒   检测  

摘要： 本研究以进口高粱为材料,采用一步法RT-PCR检测玉米褪绿斑驳病毒(maize chlorotic mottle virus,MCMV)、玉米矮花叶病毒(maize dwarf mosaic virus,MDMV)和小麦线条花叶病毒(wheat streak mosaic virus,WSMV)。23份高粱样品中,2份检出MCMV,5份检出MDMV,19份样品检出WSMV。1份样品检出MCMV、MDMV和WSMV,4份样品检出MDMV和WSMV。综合前期和本研究结果,建议将MCMV-F7/MCMV-R7、MDMV482F/MDMV482R和WSMV-F3/WSMV-R3作为3种检疫性病毒的首选检测引物,MCMV-2452F/MCMV-3111R、3MDF/1MDR和WSMV-1F/WSMV-3R作为备选,引物3MDF/1MDR用于鉴定MDMV分离物的分支归属。

关键词： IgG4相关性疾病   COVID-19   新型冠状病毒   奥密克戎变异株   疫苗接种  

摘要： 目的分析IgG4相关性疾病(immunoglobulin G4-related disease,IgG4-RD)患者新型冠状病毒奥密克戎变异株流行下疫苗接种情况、新冠病毒感染特征及结局。方法采用调查问卷,回顾性收集2022年12月1日至2023年2月28日期间IgG4-RD患者的原发病特征和新冠病毒感染情况,应用χ^(2)和Fisher精确检验、t检验等进行描述统计;并应用Logisitic回归,基于比值比(odds ratio,OR)评估免疫抑制治疗减停和疫苗接种对发生新冠肺炎的影响。结果研究纳入321例IgG4-RD患者,其中247例感染新型冠状病毒。新冠感染和未感染患者中新冠疫苗充分接种率相当(54.30%vs 56.80%,P=0.70)。感染患者中充分和未充分接种新冠疫苗者严重结局发生率无显著差异,暂停原发病治疗对新冠肺炎发生有保护作用(OR=0.33,95%CI 0.12~0.89,P=0.03)。结论新冠疫苗接种及原发病治疗不影响新冠病毒感染率。奥密克戎流行前的新冠疫苗接种对奥密克戎流行期间的患者群体保护有限,但新冠感染相关严重结局发生率不高。暂停原发病治疗降低新冠肺炎风险。