关键词： 生物传感器   食品检测   重金属污染   快速检测技术   电化学传感   荧光分析  

摘要： 随着当前社会工业化的快速发展,食品重金属污染问题日益突出,对人类健康的影响不容忽视。为此必须加强对食品中重金属污染的快速检测,而基于生物传感器的重金属快速检测技术因其高灵敏度、高选择性以及便携性等优点被广泛使用。本文综述了生物传感器在食品中重金属快速检测方面的应用情况,并展望了该技术的未来发展趋势。

关键词： 轮状病毒   反向遗传学   基因重配  

摘要： 目的建立基于全质粒的轮状病毒反向遗传学系统,为轮状病毒致病机制研究、疫苗研发提供更为快速有效的手段。方法基于11和14质粒系统进行毒株rSA11和携带外源荧光标记基因的rSA11-NSP3-UnaG毒株拯救,通过酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent serologic assay,ELISA)、荧光显微镜、RNA聚丙烯酰胺凝胶电泳(poly-acrylamide gel electrophoresis,PAGE)、蚀斑和半数细胞培养感染剂量(50%cell culture infectious dose,CCID_(50))结合ELISA(CCID_(50)combined ELISA,CCIDEA_(50))方法对拯救毒株进行鉴定、传代稳定性及增殖动力学研究。结果拯救病毒ELISA结果均为阳性。荧光显微镜观察发现,rSA11无绿色荧光,rSA11-NSP3-UnaG可见大量绿色荧光富集。PAGE结果显示,rSA11电泳带型与野生型SA11(wtSA11)电泳带型一致。相比于wtSA11和rSA11,rSA11-NSP3-UnaG毒株NSP3基因片段发生迁移,片段大小与预期一致。此外,rSA11和rSA11-NSP3-UnaG在MA104和Vero细胞中连续传代,其电泳带型均保持一致。蚀斑结果显示,相比于rSA11,rSA11-NSP3-UnaG蚀斑形态略小。CCIDEA_(50)检测结果显示,P1~P10代rSA11和rSA11-NSP3-UnaG在MA104和Vero细胞中的病毒滴度均≥6.5 lgCCIDEA_(50)/mL,最高可达8.5 lgCCIDEA_(50)/mL。病毒增殖动力学分析显示,不同MOI的rSA11在MA104细胞中的增殖趋势与wtSA11基本趋于一致,但在Vero细胞中其增殖趋势较wtSA11迟缓,且MOI=0.01与MOI=0.1的rSA11在Vero细胞中的增殖趋势一致。结论11和14质粒系统均可以成功拯救rSA11和rSA11-NSP3-UnaG,拯救毒株在MA104和Vero细胞中可以有效增殖,传代稳定性良好。

关键词： 进一步全面深化改革   价值取向   中国式现代化  

摘要： 进一步全面深化改革是党的二十届三中全会作出的重要部署,学习领悟其中蕴含的价值取向对于当前和今后一段时间我国经济改革十分关键。从进一步全面深化改革要把牢价值取向的逻辑起点出发,习近平总书记的系列讲话鲜明体现了我国进一步全面深化改革的立场原则和方式方法。同时,以进一步全面深化改革为关键手段推进中国式现代化,并牢牢把握其价值取向,还要结合学习党的二十届三中全会精神,从把握进一步全面深化改革的思想价值取向、根本价值取向、制度价值取向和发展价值取向中不断深化这一认识。

关键词： A型塞内卡病毒   单克隆抗体   双抗体夹心ELISA方法  

摘要： 为建立一种快速检测A型塞内卡病毒(SVA)的方法,本研究利用氯化铯密度梯度离心法纯化的SVA粒子免疫BALB/c小鼠3次,采用杂交瘤技术制备SVA单克隆抗体(MAb)。结果显示,共获得7株能够稳定分泌SVA MAb的杂交瘤细胞株。采用过碘酸钠法将其中5株MAb标记HRP(MAb-HRP),并采用ELISA法检测标记效果。将7株MAb与5株MAb-HRP两两组合进行抗体配对试验。结果显示,5株MAb均标记上HRP,且其中各稀释度标记的MAb 2C8-HRP的反应性均最强;当MAb 2G7作为捕获抗体,MAb 2C8-HRP作为检测抗体时,P/N值最大,表明这两种MAb的配对效果最好。在此基础上,通过优化各反应条件初步建立检测SVA的双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)方法。利用建立的DAS-ELISA方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪瘟病毒、O型和A型口蹄疫病毒和SVA,结果显示,该方法仅能检测SVA,其他常见的猪源病毒均为阴性结果,表明该方法特异性强。利用本研究建立的DAS-ELISA方法分别检测系列稀释的SVA上清液(1~1:80000,对应的病毒滴度分别为107.5TCID50/mL~1.25×10^(2.5)TCID_(50)/mL)和2倍倍比稀释的SVA猪阳性猪血清(1:2~1:256),同时采用猪塞内卡病毒抗原(SVA-Ag)ELISA试剂盒分别检测上述SVA上清液和SVA猪阳性血清,评估本研究建立DAS-ELISA方法的敏感性。结果显示SVA稀释40000倍后,其OD450nm值仍大于临界值0.115,即该方法对SVA上清液的检测限为2.5×10^(2.5)TCID_(50)/mL,且1:64倍稀释的SVA猪阳性血清样品仍为阳性;(SVA-Ag)ELISA结果显示,该方法检测的SVA最大稀释度为1:20000,即对SVA上清液的检测限为5×10^(2.5)TCID_(50)/mL,且仅能检测到稀释至32倍的SVA猪阳性血清,均低于本实验建立的DAS-ELISA方法,表明该方法敏感性高。对4份SVA猪阳性血清和1份SVA猪阴性血清采用DAS-ELISA方法进行批内和批间重复性试验,结果显示批间和批内重复性试验的变异系数均在10%以下,重复性较好。对采集的205份疑似SVA感染的猪扁桃体组织、鼻咽拭子及血清样品分别采用DAS-ELISA及RT-PCR方法检测。DAS-ELISA的检测结果显示,36份样品为阳性,169份样品为阴性;RT-PCR检测结果显示,50份样品为阳性,155份样品为阴性。经计算两种方法的阳性符合率为72%(36/50),总符合率为93%(191/205)。以上结果表明,本研究建立的DAS-ELISA适用于大规模多种临床样品的检测,为SVA的检测及流行病学调查提供技术支撑。

关键词： 乙型流感病毒   血凝素   神经氨酸酶   遗传进化分析  

摘要： 目的了解西安市2019—2023年分离的乙型Victoria系流感病毒(BV)血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)的基因特性和遗传进化特征。方法收集西安市流感监测网络实验室2019—2023年分离的BV毒株25株,利用MiniSeq高通量测序平台对HA和NA基因进行测序;利用生物信息学软件构建进化树,分析同源性及变异位点,在线预测N-糖基化位点;通过血凝抑制试验分析毒株的抗原性。结果西安市2019—2023年BV型流感呈季节性传播,流行高峰集中在冬春季。HA基因进化分析结果显示,西安市2019年毒株属于V1A.3分支,2021—2023年毒株属于V1A.3a.2分支。抗原位点分析显示,2021—2022年BV毒株HA蛋白与2019年相比有3个抗原决定簇的6个位点发生变异,2023年HA蛋白与2021—2022年相比变化了1个抗原决定簇的2个位点。2019年西安市BV毒株NA基因进化上属于A.1.1分支,到2021和2022年进化为A.1.2分支,2023年又进化为B分支及其衍生株,所有毒株均未发生NA抑制剂相关耐药位点变异。抗原分析结果显示西安市BV毒株多为疫苗组分株的类似株。糖基化分析结果显示2021—2023年毒株HA蛋白潜在糖基化位点比2019年毒株少1个,而NA蛋白的潜在糖基化位点仅有2023年个别毒株发生改变。结论2019—2023年西安市BV毒株HA和NA基因在不断发生变异,进化成新的分支。自2021年起V1A.3a.2成为HA基因优势进化分支,而2019—2023年NA基因进化分支不断改变。

关键词： 肝硬化   乙型肝炎   富马酸丙酚替诺福韦   恩替卡韦   高病毒载量   肠道屏障功能   治疗  

摘要： 目的分析比较富马酸丙酚替诺福韦与恩替卡韦治疗高血清病毒载量的代偿期乙型肝炎肝硬化患者的疗效。方法2020年1月~2023年1月我院收治的64例高血清病毒载量(HBVDNA为1×106 IU/mL或以上)的代偿期乙型肝炎肝硬化患者,被随机分为对照组32例和观察组32例,分别给予恩替卡韦和富马酸丙酚替诺福韦治疗,连续治疗观察12个月。使用高效液相色谱分析法检测尿液乳果糖/甘露醇(L/M)比值,采用比色法检测血清D-乳酸,采用紫外比色法检测血清二胺氧化酶(DAO),采用ELISA法检测血清内霉素和白细胞介素-7(IL-7),采用化学发光免疫分析法检测血清降钙素原(PCT),采用免疫荧光定量法检测肝素结合蛋白(HBP)。结果在观察治疗12个月末,两组均获得病毒学和生化学应答,两组血清TBIL、ALT和AST水平无显著性相差(P>0.05);观察组血清DAO、D-乳酸、内霉素和尿L/M比值分别为(2.8±0.6)U/mL、(7.9±1.8)μg/mL、(0.5±0.1)EU/mL和(7.3±1.6)%,与对照组【分别为(3.0±0.5)U/mL、(7.8±2.2)μg/mL、(0.6±0.1)EU/mL和(8.1±1.9)%,P>0.05】比,无显著性差异;观察组血清PCT、HBP和IL-7水平分别为(0.01±0.00)μg/L、(43.1±3.7)ng/mL和(768.9±20.3)pg/mL,与对照组【分别为(0.02±0.01)μg/L、(47.6±3.2)ng/mL和(743.4±21.5)pg/mL,P>0.05】比,无显著性差异。结论应用富马酸丙酚替诺福韦或恩替卡韦治疗高血清病毒载量的代偿期乙型肝炎肝硬化患者疗效肯定,对肠道屏障功能无明显的影响。

关键词： 孟鲁司特钠   病毒性小儿哮喘   临床疗效   安全性   肺功能测定  

摘要： 孟鲁司特钠开始对病毒性小儿哮喘是有有何疗效,及其使用安全性如何。方法 72名小患者选中,按随机数表法被划分为疗法一组和药用二组。比较他们治疗过后在哮喘发作次数上,入医院的次数以及肺功能测定结果的差异,观察哮喘复发情形以及病症消失所需的时间,由此评估孟鲁司特钠的疗效和适用的安全性。结果 经过医治后,对疗法一组和药用二组进行比较,无论是在哮喘发作次数,肺功能测定结果,还是在哮喘复发情形上,疗法一组都较药用二组展现出的成果而言,表现异常优秀(p<0.05)。症状消失时间也表明,治疗一组的咳嗽,气促,肺腑特征的消失时间更短。在治疗中,治疗一组的各项指标在4周和12周后也表现更好(p<0.05)。结论 孟鲁司特钠在治疗病毒性小儿哮喘方面,疗效优于常规药物治疗,且安全性高,具有明显的临床应用价值。

关键词： 新冠病毒感染   下呼吸道   病原体   分布  

摘要： 目的:研究分析新冠病毒感染患者下呼吸道病原体情况。方法:选取2022年12月到2023年8月在广东省高州市人民医院重症医学科接受治疗的新冠患者122例作为观察对象。其中76例实施病原学高通量检测。根据患者的转归情况进行分组,其中好转61例,记为好转组,死亡61例,记为死亡组。分析病原学高通量检测结果以及各组患者下呼吸道病原体情况。结果:病原学高通量检测结果显示,76例患者中,下呼吸道病原体为鲍曼不动杆菌的占48.68%,为肺炎克雷伯菌的占32.89%,为烟曲霉的占13.16%,分别位居前三,且明显高于其他病原体的占比,差异有统计学意义(P<0.05)。好转组的下呼吸道病原体中,细菌占60.66%,真菌占31.15%,病毒占8.20%。死亡组的下呼吸道病原体中,细菌占62.30%,真菌占29.51%,病毒占6.56%。两组的下呼吸道病原体情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:新冠病毒感染患者下呼吸道病原体以细菌和真菌为主,且在不同转归患者中的差异不大,值得临床关注。

关键词： 奥司他韦   帕拉米韦   儿童流感病毒性肺炎   免疫指标   炎症因子   疗效   药品不良反应  

摘要： 目的 探讨奥司他韦和帕拉米韦治疗儿童流感病毒性肺炎的临床效果及不良反应发生情况。方法 选取2022年12月至2023年12月张家港市第五人民医院收治的120例流感病毒性肺炎患儿,抽签随机分为观察组(n=60)和对照组(n=60)。两组患儿均进行常规治疗,同时,观察组加用帕拉米韦,对照组加用奥司他韦,治疗5 d后,比较两组患儿的临床疗效、临床相关指标(体温恢复时间、咳嗽消失时间、肺部啰音消失时间、住院时间及用药成本)、免疫功能指标(CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))、炎症因子[白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平及不良反应发生情况。结果 观察组总有效率91.67%(55/60)高于对照组85.00%(51/60),差异无统计学意义(χ^(2)=1.294,P>0.05);观察组治疗后用药成本、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)分别为(685.55±125.76)元、(38.01±2.76)%、(1.54±0.52),高于对照组[(157.85±24.86)元、(34.88±2.62)%、(1.32±0.36)],差异具有统计学意义(t=31.886,P<0.01;t=6.371,P<0.01;t=2.694,P<0.01);观察组体温恢复时间、咳嗽消失时间、肺部啰音消失时间、住院时间、CD8^(+)、TNF-α、CRP、IL-6分别为(2.68±0.87) d、(9.01±1.25) d、(6.57±0.75) d、(7.75±1.55) d、(24.76±1.54)%、(6.34±1.57) ng·L^(-1)、(5.18±1.24) mg·L^(-1)、(11.58±2.04) ng·L^(-1),均短于或少于对照组[分别为:(4.78±1.06) d、(11.46±1.57) d、(10.75±1.74) d、(12.76±1.88) d、(26.88±1.65)%、(9.48±2.35) ng·L^(-1)、(6.62±1.64) mg·L^(-1)、(14.03±3.16) ng·L^(-1)],差异具有统计学意义(t=11.862,P<0.01;t=9.456,P<0.01;t=17.088,P<0.01;t=15.927,P<0.01;t=7.276,P<0.01;t=8.606,P<0.01;t=5.425,P<0.01;t=5.046,P<0.01);观察组和对照组的不良反应发生率分别为15.00%(9/60)和13.33%(8/60),差异无统计学意义(χ^(2)=0.069,P>0.05)。结论 奥司他韦和帕拉米韦治疗儿童流感病毒性肺炎均可获得良好效果,安全性好,但帕拉米韦可快速缓解患儿症状,有效改善免疫炎症反应,用药成本偏高。