关键词:
PLA/HA/Mg复合支架
3D打印
力学性能
生物相容性
降解性能
摘要:
目前,由于疾病和意外导致的骨缺损及其相关疾病患者日益增加,组织工程研究为这个问题提供了解决方案,将骨组织工程支架植入骨缺损部位,代替缺损部位的骨组织,成骨细胞在支架表面和内部不断增殖、分化,同时支架在体内降解,人工多孔支架作为最佳骨缺损植入物受到越来越多的关注。理想的骨组织工程支架应具备合适的孔隙结构以实现细胞附着、营养物质传输和代谢产物排出,与人体骨骼相近的力学性能以及良好的生物相容性和可降解性。本研究以聚乳酸(PLA)、羟基磷灰石(HA)和镁(Mg)为原材料,利用3D打印技术,制备出正四面体自锁多孔支架和空间网格结构支架,并对支架的理化性能、生物相容性能、降解性能进行研究。首先是骨组织工程支架的制备和表征。我们制备了不同质量分数HA和Mg的PLA/HA/Mg复合材料,采用熔融沉积成型(FDM)3D打印技术制备了纯PLA正四面体自锁结构支架和PLA/HA/Mg复合材料空间网格结构支架,然后对支架的表面形貌、孔隙率、亲水性和力学性能进行了表征和评价。结果表明,采用FDM 3D打印制得的支架外形规整,边界清晰,孔洞贯通且规则,重现性较好,孔隙率和尺寸都符合骨组织工程的要求,说明采用FDM 3D打印技术制备多孔组织支架的方法是可行的;HA和Mg可以增强支架的亲水性,有利于细胞在支架表面粘附、铺展和增殖分化,同时可以帮助营养物质的运输和代谢废物的排出;多孔支架具有良好的承重耐性和减震吸能效果,并且层状结构可防止整体性破坏,PLA正四面体自锁支架的力学性能与孔隙率呈负相关,压缩强度在1.24~6.27 MPa之间,压缩模量在11.99~33.25 MPa之间;PLA/HA/Mg复合支架的压缩强度和压缩模量均低于纯PLA支架,在加入10wt%的HA时,其压缩模量下降明显,加入2wt%的Mg时,其力学性能有所提高,但随着Mg含量的增加,Mg的团聚明显,支架的力学性能开始下降,压缩强度在4.48~9.48 MPa之间,压缩模量在88.75~168.75 MPa之间。10wt%HA、2wt%Mg的PLA/HA/Mg复合支架的压缩强度为9.48 MPa,其力学性能最优,且与松质骨力学性能相匹配,将其用于后续试验。然后,将纯PLA支架和PLA/HA/Mg复合支架分别与小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)进行体外共同培养,探究支架的生物亲和性和诱导成骨分化能力。结果表明,随着培养时间的推移,所有支架上的活细胞数量逐渐增多,死细胞数量极少,细胞活力旺盛,分布均匀,细胞膜的铺展面积变大且均匀,PLA/HA/Mg复合支架上的活细胞数量明显高于纯PLA支架,细胞活性更好,细胞数量和铺展状态更优,细胞形态良好,HA和Mg的引入不会对细胞产生明显的毒副作用,并且有效改善了PLA支架的生物相容性,有利于细胞在支架上的增殖、粘附和铺展;PLA支架和PLA/HA/Mg复合支架都能够有效促进细胞碱性磷酸酶(ALP)的表达,并且PLA/HA/Mg复合支架上细胞的ALP活性明显高于PLA支架,两组支架上都出现了大量的矿化面积,而PLA/HA/Mg复合支架上的钙结节更多、钙盐定量更高,HA和Mg的存在显著地提高了支架对细胞的诱导成骨分化能力。最后,将PLA/HA/Mg复合支架浸没于磷酸盐缓冲溶液(PBS)中,进行体外降解性能研究。结果表明,随着浸泡时间的推移,支架表面腐蚀程度愈加显著,表面变得粗糙,伴随有孔洞、裂纹以及腐蚀产物等产生;PLA/HA/Mg复合支架的质量先小幅增加,后逐渐减小;PBS缓冲溶液整体并未出现酸性环境,p H值总体上呈现上升趋势,一段时间后趋于稳定;PLA/HA/Mg复合支架的力学性能下降,压缩强度和压缩模量逐渐降低,维持在骨组织工程要求范围内。