关键词：
布比卡因脂质体
生物相容性
臂丛神经
肌肉
软骨
摘要：
目的:
评估布比卡因脂质体对大鼠神经、肌肉、软骨组织的生物相容性,为指导其临床应用提供一定的理论支持。
方法:
选取成年雄性(Sprague-Dawley,SD)大鼠100只,8周,280-320g,实验分神经、肌肉、软骨3个部分进行。
神经部分选取25只大鼠,随机分为生理盐水组(NS组)、1.33%布比卡因脂质体组(LB1组)、0.665%布比卡因脂质体组(LB2组)、1%布比卡因组(B1组)、0.5%布比卡因组(B2组)5个组,每组5只大鼠。各组将生理盐水或对应浓度的局麻药注射在大鼠臂丛神经周围充分浸润臂丛神经,给药后第5天取大鼠臂丛神经,通过HE染色、甲苯胺蓝染色、电镜评估其纤维密度,神经轴突、髓鞘等结构的组织学变化。
肌肉部分选取50只大鼠,随机分为生理盐水组(NS组)、1.33%布比卡因脂质体组(LB1组)、0.665%布比卡因脂质体组(LB2组)、1%布比卡因组(B1组)、0.5%布比卡因组(B2组)5个组,每组10只大鼠。各组将生理盐水或对应浓度的局麻药注入大鼠腓肠肌,分别在给药后第4天及第21天选取5只大鼠取注射部位肌肉,通过HE染色评估其组织学变化,并通过免疫组化评估第4天注射部位肌肉的凋亡、自噬相关蛋白表达情况。
软骨部分选取25只大鼠,随机分为生理盐水组(NS组)、1.33%布比卡因脂质体组(LB1组)、0.665%布比卡因脂质体组(LB2组)、1%布比卡因组(B1组)、0.5%布比卡因组(B2组)5个组,每组5只大鼠。各组将生理盐水或对应浓度的局麻药注入大鼠膝关节腔,在给药后第7天取膝关节,通过HE染色评估软骨的组织学变化。
结果:
神经部分:神经周围注射药物5天后,与生理盐水组相比,各实验组在炎症浸润方面并无明显差异。与NS组相比,LB1、LB2、B2组的神经损伤评分无明显差异(P>0.05),B1组的神经损伤评分明显增高(P<0.01)。与NS组相比,各组的神经纤维密度无明显差异(P>0.05)。NS组、LB1、LB2、B2组臂丛神经组织学结构基本正常。B1组有髓神经纤维出现髓鞘板层分离,间隙扩大,即脱髓鞘现象,轴突变形萎缩。
肌肉部分:肌肉组织内注射药物后4天,NS组、LB2肌肉组织未见组织学变化,LB1组可见少量坏死变性的肌组织及炎性细胞浸润,B1组肌肉组织均发生广泛的坏死和变性,存在大量炎性浸润,B2组观察到大量肌组织变性坏死,在局部正常肌原纤维之间观察到大量炎性细胞浸润。与NS组相比,第4天LB1、B1、B2组的肌肉损伤评分明显增高(P<0.01),LB2组肌肉损伤评分无明显差异(P>0.05)。对比生理盐水组,LB1组、B1组肌肉组织中的caspase-3、beclin-1、p62蛋白的表达增加,但在B1组表达更明显。肌肉内注射药物21天后,LB1、LB2组、B2组的肌肉组织无组织学变化,B1组的肌肉组织仍有小部分肌肉组织变性坏死。与NS组相比,第21天B1组的肌肉组织损伤评分增高(P<0.01),LB1、LB2、B1组的肌肉组织无明显差异(P>0.05)。LB1组、B1组、B2组第21天的肌肉损伤评分明显低于它们第4天的肌肉损伤评分(P<0.01)。
软骨部分:膝关节给药7天后,LB1、LB2组、B2组大鼠关节软骨表面完整平滑,软骨基质染色均匀,骨小梁排列整齐规则,各层软骨细胞排列整齐、均匀,软骨细胞呈圆形或椭圆形,胞核居中,胞质饱满,形态规则完整。B1组大鼠关节软骨局部存在小部分软骨层细胞丢失或固缩,软骨平面、基质,软骨细胞形态基本完整。
结论:
1.臂丛神经周围给药5天后,1.33%、0.665%的布比卡因脂质体,0.5%的布比卡因未引发臂丛神经组织明显的组织学变化,1%的布比卡因可导致臂丛神经组织脱髓鞘、轴突变性萎缩。
2.肌肉内注射1.33%布比卡因脂质体、0.5%布比卡因4天后可引发肌肉组织学改变,但在第21天肌肉组织学恢复正常,0.665%布比卡因脂质体对肌肉组织学无明显影响。肌肉内注射1%布比卡因4天后可引发肌肉组织广泛组织学改变,且在第21天时未恢复完全。布比卡因脂质体、布比卡因引起的肌肉损伤与凋亡与自噬机制相关。
3.膝关节腔给药7天后,1.33%、0.665布比卡因脂质体、0.5%布比卡因未引发软骨组织明显的组织学变化、1%布比卡因可引发局部部分软骨细胞丢失。
