关键词： 动物细胞培养   工艺   控制  

摘要： 近几年,动物细胞培养在生物制品的生产、转基因动物的培养、检测有毒物质以及医学研究等领域都有重要的应用,比植物组织培养的应用更为广泛.本文就动物细胞培养的工艺与控制进行分析,为动物细胞大规模培养提供一定的理论依据.

关键词： 微流控   软光刻技术   细胞培养   荧光免疫实验  

摘要： 目前,国内外细胞生物学实验室还普遍采用传统的细胞研究手段,使用传统的细胞培养瓶、培养板等培养细胞,几乎所有的细胞研究过程都是通过手工完成,在操作过程中如收集细胞、更换培养基和细胞传代处理往往较繁琐、耗时及耗试剂量大。一种在每个小室里带有八个微筛的微流控细胞芯片培养平台显示了其可连续培养的能力。在这八个微筛的辅助下,细胞可以均匀地分布。在这些阵列中,细胞增殖到融合状态时可消化并重新获得。待细胞消化后在微筛内又重新被捕获从而在芯片中进行次代培养,建立一个若干周期连续传代培养的平台。这个微流控阵列细胞培养平台已通过BALB/3T3细胞系、人脐带血间充质干细胞、HeLa细胞、牛内皮细胞、乳腺癌细胞(MCF-7)得到了证明。目前此微流控细胞芯片培养平台展示了集成温度控制、微流体控制、微泵等形成一完全自动化细胞培养系统的潜力。 在生命科学里,细胞培养是一个基本且强有力的技术。一个世纪以来,细胞培养在人们解释许多生物现象上做出了很大的贡献,比如包内酶活性、细胞内代谢通量、细胞与细胞之间的相互作用等等。在近几年,高密度的细胞培养阵列,包括微流控阵列,由于其具有实现快速大规模细胞实验的潜力,引起了许多人的兴趣。许多微流控细胞阵列已经被用于研究包内酶活性、化学浓度梯度对细胞的刺激、细胞分化、基因表达的动力学特征和高通量药物筛选,且都在纳升或皮升级下进行。在大批细胞培养方式下,细胞播种密度的差异、营养输送和代谢废物清除是影响生物学检测准确度的一个重要因素。由于此研究强调改变大批培养方式,在微培养单元中的细胞行为,单细胞水平的研究,细胞存活率和标准化、均一化生长条件显得很重要。许多微流控芯片设计力图到达高通量,但未能使细胞在整个芯片阵列中均匀分布。在本研究中,阐述了微流控细胞连续传代培养平台,集成了在微培养室内带U-型筛的阵列,细胞均匀分布及生长,而其稳定从微室中控制培养液输送和排除的能力促进细胞存活。主要实验结果如下: 1.采用SU-8-10负胶做PDMS芯片模板较佳,其优化工艺是:旋涂SU-8-10负胶前等离子处理10秒钟,旋涂速度为750RPM(20μm);前烘:先60℃下5分钟,后90℃下8分钟;中烘:先60℃下1分钟,后90℃下3分钟;曝光18s,光强:40mW/cm2;显影3分钟;90℃下烘干。 2. U-型筛有效促进细胞均匀分布:平均密度为10/筛,100/微室。 3.微流控细胞芯片微单元间的细胞数目偏差控制在了10%以内。 4.此细胞芯片成功培养各种动物细胞如:人脐带血间充质干细胞、HeLa细胞、牛内皮细胞、MCF-7乳腺癌细胞等,形态和在传统培养皿里相似。 5.在此细胞芯片里能实现细胞反复传代培养细胞,且与传统的细胞培养瓶(细胞存活率95%)相比,在微流控细胞芯片中能够获得更高的细胞存活率,达到98%以上。 6.流式细胞术分析和微流控细胞芯片荧光免疫分析结果一致,都显示了脐带血干细胞强表达表面标记物CD44、CD73和CD105,而CD34、HLA-DR和CD45表达为阴性。

关键词： 动物细胞培养   新技术应用   细胞培养基   无血清   细胞培养技术   疫苗生产   小牛血清   胎牛血清  

摘要： 本课题通过引进技术，开发生产替代小牛血清、胎牛血清的无血清或低血清动物细胞培养基，引进先进的动物细胞培养技术，建立中空纤维细胞反应器培养技术，从而实现动物细胞无血清、连续化大规模的生产，将对生物工程、生物医药、疫苗生产等领域的应用有着重要意义。

关键词： 动物   细胞培养   教材  

ISBN: (纸本)9787542413505

摘要： 本书分为上下两篇，上篇以理论为主，着重讲述了动物细胞培养的基本概念、基本理论、基本要求、基本技术以及应用等方面的内容，下篇由24个实验组成。

关键词： Mycoplasma Cell Cultures DNA fluorescence staining   Polymerase chain reaction  

摘要： [ Objective ] To develop a rapid efficient method for detecting mycoplasma contamination in cell cultures. [ Method] A pair of primers was designed according to two highly conserved nucleotide sequences of the 16S RNA from six kinds of mycoplasma that commonly contaminated cells. Then the mycoplasma contamination of 25 cell samples was defected by PCR and DNA fluorescence staining. EResultl When these cell samples were detected by DNA fluorescence staining, the positive rate and probable positive rate were respectively 24% and 16%. And when they were detected by PCR, the positive rate was 36%. [ Condusion] The PCR method is more sensitive and specific than the DNA fluorescence staining, and combining these two methods is the optimal way to detect mycoplasma contamination in cell cultures.

关键词： 动物细胞培养   大规模培养   流技术   搅拌式反应器   悬浮培养细胞   无血清培养基   单克隆抗体   微生物发酵  

摘要： 随着对单克隆抗体等产品需求量的不断增加，2000年以后，动物细胞培养的产能迅速增加．现在全球的反应器总容量超过2000000L，比8年前增加了约4倍。产物浓度也比15年前提高了约100倍。达到了5g／L以上。动物细胞大规模培养产业，在规模和技术方法上，越来越与微生物发酵产业类似。在重组蛋白的生产中，当今的主流技术是．在大型机械搅拌式反应器中，用无血清培养基和流加培养工艺悬浮培养细胞，

关键词： 动物细胞培养   素食主义者   栖居地   牛奶制品   一个问题   板条箱   巢框   食物生产   鸡蛋生产   野生环境  

摘要： 在美国加州,动物权利保护运动成为了主流,我们会很快成为严格的素食主义者吗?动物应该拥有权利的观念在上个世纪70年代首次提出时受到了普遍的质疑,现在它已经得到了更多的重视。为动物争取权利的运动获得了数以千万人的支持。

关键词： 静电纺丝法   二氧化硅   纳米纤维   制备   批量生产技术   动物细胞培养   固定载体   医疗卫生  

摘要： 九州大学工学研究院与日本拜铃公司共同确立了用静电纺丝法制备二氧化硅纳米纤维的批量生产技术。采用该法可制成单纯二氧化硅或者含有二氧化硅的纳米纤维无纺布，纤维直径从数百nm至数μm。由于其化学和热稳定性好，比表面积又巨大，可望用于动物细胞培养载体和催化剂固定载体，以及薄型电池、高性能滤材、医疗卫生部件、防火服和医疗或生物实验等所用的超净室部件等。

关键词： 动物细胞培养   流感疫苗   流行性感冒   哺乳   呼吸道感染   临床特征   季节性   总人口  

摘要： 1 流行性感冒的概况 流行性感冒是一种特别的呼吸道感染，其临床特征是全身不适症状比一般感冒厉害，而且可以侵犯所有的年龄层。在季节性流行时，能在全世界迅速传播，影响总人口的10％-20％，病毒的流行据认为可造成300—500万严重病例和25～50万人死亡。

关键词： 膜过滤技术   生产工艺   中空纤维   单抗   应用   单克隆抗体   动物细胞培养   亲和层析  

摘要： 作为生物药物的”重磅炸弹”，大规模动物细胞培养生产治疗用单克隆抗体（以下简称单抗）已成为生物制药发展的主导。Mabselect SuRe亲和层析结合Capto Adhere复合离子交换两步层析工艺已经成为抗体生产工艺的亮点，而中空纤维膜过滤技术是一种快速高效的膜分离技术，具有容尘量高、温和低剪切力、操作灵活、成本低、易于放大等优点．因此广泛应用于重组蛋白、疫苗等生物制药领域。通过将中空纤维膜过滤技术和下游两步层析工艺相结合，可以成功的迎接几十甚至上百公斤单抗生产所面临的挑战。