关键词： 硬件建设   仪器设备   动物细胞培养   实验室  

摘要： 随着动物细胞培养技术在组织学与胚胎学、细胞生物学、肿瘤学、免疫学、营养学、药理学、毒理学等学科的广泛应用,促使细胞培养技术的普及已成为一种可能.目前,有许多基层科研机构正在建立动物细胞培养实验室,笔者就细胞培养室的硬件建设谈点看法,供参考.

关键词： amphibian decline   endotoxins   environmental stress   mitogen-activated protein kinase   reactive oxygen species   Xenopus  

摘要： The decline of many amphibian species could be caused by their susceptibility to environmental pollutants that cause cellular stress and cell death. A variety of intracellular signal transduction pathways are activated by environmental stress factors, which result in cell death. Mitogen-activated protein kinases are intracellular signaling molecules that include the extracellular signal-regulated kinases (ERK-1 and ERK-2), We used cultured Xenopus tadpole cells (XTC-2 cells) to investigate the activation of ERK by oxidative or bacterial stress, two environmental factors that could contribute to pollution in aquatic systems. We exposed XTC-2 cell monolayers to hydrogen peroxide or bacterial lipopolysaccharide and measured ERK activation by Western blotting using antibodies raised against phosphorylated ERK-1 and ERK-2. Only ERK-2 was detected in XTC-2 cells. Both hydrogen peroxide and lipopolysaccharide caused ERK-2 phosphorylation in a time- and concentration-dependent manner. Hydrogen peroxide caused a 20- to 30-fold increase in ERK-2 activation that peaked 30 min after treatment, and lipopolysaccharide induced a 5- to 10-fold increase in ERK-2 activation that peaked 60 min after treatment. PD98059, an inhibitor of the ERK pathway, reduced the cytotoxic response of XTC-2 cells to hydrogen peroxide or lipopolysaccharide. These data suggest that ERK-2 is an intracellular target of oxidative and bacterial stress in amphibians that mediates, at least in part, the cytotoxic response to hydrogen peroxide or lipopolysaccharide. Moreover, the Xenopus (XTC-2) cell culture system could serve as a useful model to identify agents that might threaten amphibian populations and human health.

关键词： 动物细胞培养   磁响应性微载体   Ⅱ型糖尿病   药物筛选模型  

摘要： 为建立和推广药物筛选的细胞模型,该文从工程和生物学两方面,选择两个关键问题进行了实验研究.为实现动物细胞高密度培养和细胞分离,研制了核/壳式磁响应性复合微载体.探索了两步聚合法,使Fe<,3>O<,4>包埋量提高了25%,最终达到46%;磁化强度为7.78emu/g,矫顽力仅为84Oe;球形度好,粒径分布可调.乳化包覆时先对磁核表面氧化处理,使包埋率提高10%.自行设计的锥形转盘雾化器,实现了连续稳定地制备核/壳式微胶囊,产率较平盘雾化器提高36%,适合连续大规模制备.为建立治疗糖尿病药物的胰岛筛选模型,提出并实现了冷消化和热消化两阶段消化模式,可提高活性胰岛收率10%,优化培养工艺和条件使胰岛体外存活6周,维持稳定分泌功能10天.在此基础上建立了高糖损伤模型和胰岛自由基损伤模型,使用已知治疗糖尿病的三类四种药物,验证模型的可靠性.通过定量检测胰岛素分泌水平和葡萄糖敏感性指数（SRI）,得到的结果与临床应用结果有很好的一致性,并同时发现二甲双胍具有维持胰岛对葡萄糖的敏感性功能.

关键词： 动物细胞培养   发展趋势   微重力组织工程  

摘要： 概述了微重力组织工程的产生与发展趋势。动物细胞培养技术为研究细胞的形态、结构、功能与遗传特性 ,揭示细胞分裂、组织分化、器官组织形成等生命科学领域的基本问题发挥了巨大作用 ;大规模动物细胞培养技术已广泛应用于生物制药、生产疫苗以及生物学诊断试剂。但是 ,常规培养技术无法实现由细胞重建组织这一构想。微重力组织工程利用旋转培养器产生的微重力环境与动物细胞培养技术相结合 ,使组织重建成为可能 ,成为生命科学发展史上的一个新的里程碑。

关键词： 哺乳动物   细胞培养   药用蛋白   细胞工程  

摘要： 近年来,应用哺乳动物工程细胞系统生产药用蛋白显示了越来越重要的地位。本文重点介绍了当前如何在生产药用蛋白的哺乳动物工程细胞表达系统、培养、生产技术、认证、生产过程组织等关键环节上进行优化,从而达到高效、安全、经济生产模式的核心技术和策略。

关键词： 动物细胞   培养技术   微载体   供氧   无血清培养基  

摘要： 组织培养技术是19世纪末由胚胎学技术衍生而来.近一个世纪,从能维持组织存活到生长出新细胞,从少数组织到各种组织细胞的培养,从精细的实验室培养技术到大规模的生产工艺 ,组织培养技术已成为生物制品制备以及基因工程等领域必不可少的工具之一.随着生物制品需求的不断增加,动物细胞的培养技术已向着大型化、自动化、精细化的方向发展.本文就近年来动物细胞培养技术有关的微载体、氧供应及无血清培养等问题作一文献回顾.微载体

关键词： 细菌污染   动物细胞培养   巨大   养目   鉴别   生物药物   严格   培养基   培养时间   发酵罐  

摘要： 动物细胞培养目前被利用于生产生物药物。工业生产多为大发酵罐，体积在10000升，因此对污染需要严格控制。在大规模动物细胞培养中，由于设备、培养基、培养过程中操作及培养时间等都能导致污染，一旦遭到细菌污染，损失巨大。为此早。期鉴别污染非常重要。

关键词： CHO细胞   葡萄糖   代谢   红细胞生成素   动物细胞培养  

摘要： 在CHO细胞批培养中 ,葡萄糖浓度从 8 9增加到 4 9 6mmol L ,最大活细胞密度没有明显的差异 ,乳酸对葡萄糖的得率系数首先随着葡萄糖浓度的增加而增加 ,葡萄糖浓度达到 17 9mmol L后 ,乳酸对葡萄糖的得率系数基本上维持恒定。在本实验中 ,葡萄糖浓度对谷氨酰胺代谢没有明显的影响。EPO的累积浓度首先随着起始葡萄糖浓度的增加 ( 8 9～ 17.9mmol L)而增加 ,进而又随着葡萄糖浓度的增加 ( 17 9～ 4 9.6mmol L)而下降 ,表明存在一最适浓度 ,在此浓度下重组CHO细胞的EPO表达最大。

关键词： 组织培养   水产动物   鱼   虾   贝   细胞培养   培养基   培养环境  

摘要： 综述了鱼虾贝类等水产动物细胞培养的方法 ,分析了动物细胞大规模培养过程中的问题与对策 ,展望了动物细胞培养的广阔前景 .

关键词： 细胞工程   生物制药   动物细胞培养  

摘要： 细胞工程是生物制药工业中的关键技术 ,它是利用动物细胞体外培养和扩增来生产生物产品 ,或者作为发现和测试新药的工具。本文综述了细胞工程发展的历史、现状和未来 。