关键词： 动物细胞培养   单克隆抗体   细胞克隆   无血清培养基   杂交瘤细胞   顺反子   培养器   抗体可变区   肝细胞   细胞培养物  

摘要： 94一01025] 用3种血清添加培养基定量了草地夜蛾 (spodbpter口,rugiperda)Sf9细胞和顶灯蛾 (Estigme％e口ctea)BTI—EAA细胞摇瓶培养 物的生长、营养素消耗和终产物累积。计算了培养 基中大多数被分析成份的单细胞消耗率和产率。 TNM—FHJ音养基中的葡萄糖限制生长,但它是全 部培养物重要的有机碳唯一来源。ol一酮戊二酸和 苹果酸对TNM—FH中细胞的碳累积有重要意义。 细胞生长时一般不累积乳酸。细胞消耗大多数氨基 酸,但产生丙氨酸。应充分供应大多数氨基酸,谷 氦酸消耗最快,其次是谷氨酰胺。丙氨酸累积与葡 萄糖消耗相关。 (王颖) 941819 抗甲型

关键词： 动物细胞培养   细胞工程   细胞无血清培养   细胞分化   补充因子   生物科学   血清组   生长因子   生物技术   细胞生长  

摘要： 动物细胞无血清培养是当今生物科学领域中的重要研究课题之一。无血清培基可以是完全采用已知分子结构和构型的成分组成的低蛋白或无蛋白培基,因而它不仅为研究和阐明细胞生长、增殖和分化的调节机制提供有力的工具,而且也为现代生物技术,尤其是细胞工程的应用准备了更好的条件。近几年来,有关动物细胞无血清培基的研究和应用的发展很快,本文就其现状作一概述。

关键词： 阳性   阴性   支原体   PCR法   扩增   培养法   荧光染色   动物细胞培养   DNA   PCR产物  

摘要： 本文报告两步ＰＣＲ法快速检测污染动物细胞培养物的支原体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ）．外部引物ＰＦ１，ＰＲ１和内部引物ＰＦ２，ＰＲ２选自ｒＲＮＡ操纵子１６ＳｒＲＮＡ，２３ＳｒＲＮＡ空间保守区域，第一步ＰＣＲ产物长度在３０９～５２７ｂｐ之间，第二步ＰＣＲ产物长度在１１０～３０９ｂｐ之间，此方法能扩增污染细胞常见的七种支原体，灵敏度达到２０３ｆｇ／ｍｌ，不能扩增常污染细胞的ＣＭＶ、Ｅ．ｃｏｌｉ以及ＳＰ２／０细胞、Ｈｅｌａ细胞的ＤＮＡ．５３株细胞培养物，ＰＣＲ检测２０株（３７．７％）为阳性，直接培养法检测１３株（２４．５％）为阳性，ＤＮＡ荧光染色法检测１４株（２６．４％）为阳性，其中动物细胞２３株，ＰＣＲ检测９株（３９．１％）为阳性，直接培养法检测７株（３０％）为阳性，ＤＮＡ荧光染色法检测８株（３４．８％）为阳性，不计ＡＴＣＣ提供的４株阴性细胞，阳性率分别为４７．４％，３６．８％，４２．１％，三种方法检测１８株动物细胞结果一致（１２株阴性，６株阳性）．３株ＰＣＲ检测阳性，其他方法检测阴性；Ｖｅｒｏ４１ＤＮＡ荧光染色法检测阳性，其他方法检测阴性：Ｊ－１１１ＰＣＲ检测阴性，其他方法检测阳性。ＰＣＲ法与常规法相比，灵敏度提高?

关键词： 动物细胞培养   β-半乳糖苷酶   单克隆抗体   外源基因   细胞生长   载体转染   外源蛋白   二氢叶酸   细胞周期   编码区  

摘要： 941449重组CHO细胞在其细胞周期中表达外源基因(β-半乳糖苷酶)[英]/Gu,M.B.…∥***.-1993,42(9).-1113～1123[译自DBA,1993,12(25),93-14684] 用含二氢叶酸-还原酶基因(dhfr)和编码细菌β-半乳糖苷酶的LacZ基因的表达载体转染CHOβ-G72-16细胞。

关键词： 单克隆抗体   动物细胞培养   轻链可变区   细胞生长   重链   引物扩增   基因片段   昆虫细胞   杂交瘤技术   骨髓瘤细胞  

摘要： 941019抗猪搜乱病毒单克隆抗体的生产和鉴定〔英〕/Ca-ij,A.…了***一1993,131(i~2)一155~192〔译自DBA,1993,12(22),93一1277幻 用混合弗氏完全佐剂的纯化猪霍乱病毒(PCV)株Alfortis7(EEC参考株)经腹腔致敏BALB/c小鼠。3周后给小鼠加强注射一次混合弗氏不完全佐剂的病毒。融合前3天,给中和滴度最高的小鼠腹腔接种病毒。取出脾细胞,与SpZ/0骨髓瘤细胞融合。用过氧化物酶单层测定筛选杂交瘤上清液。测出了15个分泌PCV一专性单克隆抗体(MAb)的杂交瘤,经软琼脂克隆稳定之并在姥鱿烷致敏的BALB/c小鼠腹水中扩增。用硫

关键词： 粉末型   动物细胞   培养基  

摘要： 现代生物工程所制造的药物是通过微生物发酵和正在发展的大规模细胞培养的工业生产方式获得。特别是动物细胞培养,它可制得微生物发酵所难以制造的糖蛋白类药物、病毒类抗原以及疫苗等产品。

关键词： .catabolic   Refs   glycolysis   heat flow   heat flux   energy balance   Human neutrophils   ATP turnover   adenosine triphosphate   lymphoma cells   mouse fibroblasts   enthalpy change   cultured animal   enthalpy flux   CR ratio   ATP cycle  

摘要： The measurement by microcalorimetry of heat flux in cultured animal cells can be allied to biochemical analyses of the catabolic process. This energy balance approach is exemplified by studies on muscle, human neutrophils and T-lymphoma cells using the heat flux/enthalpy flux ratio. The heat flux/reaction flux ratio is another form of this approach. An important example is the calorimetric-respirometric (CR) ratio, which was used to show that cultured LS-L929 mouse fibroblasts undergo intensive anaerobic glycolysis simultaneously with respiration. once an account of energy balance was achieved, ATP turnover was calculated from heat flux measurements and the coupled flows and forces between catabolic reactions and the ATP cycle using mechanistic molar stoichiometries.

关键词： 动物细胞培养   连续灌注培养   单克隆抗体   人造血干细胞   细胞生长   骨髓单核细胞   祖细胞   免疫原性   BMMNC   巨噬细胞  

摘要： 940587 人骨髓单核细胞干细胞和远祖细胞在连续灌注培养中大规模扩展[英]/Aastrom-Biosciences/Koller, M. R. …∥Blood. -1993, 82(2). -378～384[译自DBA, 1993, 12(19), 93-10999] 研究了用于骨髓(BM)移植或基因治疗的人造血干细胞(HSCs)的体外扩展。用连续灌注培养容器系统扩增来自BM单核细胞(MNC)群体的人干细胞和远祖细胞。10个容器各接种30百万BMMNC,并分别分析不粘附的、松散粘附的和粘附的细胞。总细胞数继续增加,到14天时,扩增量超过10倍。粘附基质层扩增20百万个细胞,但不到总细胞群体的6％。CFU粒细胞巨噬细胞到14天扩增21倍,并在第14天富集4倍。

关键词： 动物细胞培养   GMP   医药品   东曹   Pilot   微载体   防护盒   骨胶原   特殊加工  

摘要： 东曹公司宣布从6月开始在日本销售美国Cellex公司研制的动物细胞培养装置“SYSTEM20”。“SYSTEM20”将适合于优良制造规范(GMP)的能生产的部件、附带设备装配在一起。适合GMP的能生产的细胞培养装置目前只有大型的装置。但是,“SYSTEM20”将是适合于GMP的能生产试验的第一个台式细胞培养装置。要开发医药品必须开发改变GMP的产品。为了制造满足GMP的产品,因目前只有大型装置,尽管下决心试验,也要花费成本和风险费。如能生产台式的适合于GMP的样品,就可以用于前临床试验等的医药品开发,医药品候补的Pilot生产就容易进行了。希望缩短开发时间,减少费用,降低risle。

关键词： 动物细胞培养   单克隆抗体   细胞生长   杂交瘤细胞   基因片段   昆虫细胞   表达载体   胰岛素原   银纹夜蛾   灌流培养  

摘要： 940185人腺岛素的遗传工程:!.在主要生产阶段对产物进行HpLC分析〔俄〕/Klyushniehenko,V.E.…泌***一1992,15（12）一147814名6仁译自DBA,1993,12（16）,93一091713 利用不同的HPLC法测试了人的遗传工程重组胰岛素的主要生产阶段的产物分离。人胰岛素的生产包括:（1）融合蛋白（FP）的分离,FP由质粒转化的重组大肠杆菌菌株产生;（2）FP在Net残基的cNBr裂解,形成线性胰岛素原;（3）从胰岛素原分子中除去C一肤;（4）分离形成的胰岛素。在（1）8期间,利用流动相（磷酸缓冲液pH7.o,硫酸钠和5%乙睛）TS