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关键词： Molecular biology   Genetics   Microbiology   Environmental engineering  

摘要： Anaerobic membrane bioreactors (AnMBRs) offer a potentially energy efficient means of treating domestic wastewater, but their performance with seasonal temperature variations must be understood to determine their feasibility in replacing conventional activated sludge processes. A bench-scale AnMBR treating primary clarifier effluent from a WWTP in Greenville, SC was found to achieve a similar chemical oxygen demand (COD) removal during operation at 35°C, 25°C, and 15°C, with average permeate COD concentrations of 70.5 mg/L, 60.7, and 77 mg/L respectively. Methane yields averaged 109 L CH4/kg CODremoved at 35°C, 114 L CH4/kg CODremoved at 25°C, and 64 L CH4/kg CODremoved at 15°C. Reduced methane yield is attributed to a decrease in methanogen abundance, seen by an almost 3-fold decrease in mcrA gene abundance during operation at 15°C. The conclusion that the AnMBR achieves similar methane yields at 35°C and 25°C is significant because substantial energy savings could be obtained from not heating the reactor to 35°C as is common in conventional anaerobic processes. Energy savings could especially be significant if the wastewater is already near 25°C for a portion of the year. By understanding the microbial components of AnMBR treatment through molecular microbial analysis and relating them with the performance of the AnMBR at different temperatures, we can better understand the functionality of specific microbial communities and therefore better inform, operate, and design anaerobic resource recovery processes for maximum effectiveness.

关键词： 厌氧消化   餐厨垃圾   微生物群落   搅拌   含固率  

摘要： 餐厨垃圾中易降解有机质含量高,如果用于厌氧消化产甲烷既能减少污染,还能回收能源。目前国内主流的厌氧消化工艺为湿式厌氧消化,因为其易于管理,但同时该工艺也有很多缺点,如造价高,处理能力低,耗能高等。而在欧洲有机垃圾的处理大多应用干式厌氧消化工艺,以Dranco为例,该工艺节省有空间和造价,没有浮渣和沉积物,节省能源等优点。因此模拟出干式推流式系统,并将其与同一有机负荷率下的完全混合湿式厌氧消化系统和完全混合干式厌氧消化系统相比较,观察不同系统产气性能和微生物群落之间的异同,并选出产气性能最佳的反应器。在整个实验期间,完全混合湿式反应器,推流式干式反应器和完全混合干式反应器都在3负荷下稳定运行,并监测其稳定运行状态的产气量、甲烷含量、pH、VFA、碱度、氨氮,在稳定运行一段时间后从三个反应器中取样并测序,根据三个反应器的理化指标和微生物群落的差异去评价其优劣。测出结果显示完全混合湿式反应器的甲烷产率、氨氮、挥发性脂肪酸、碱度、pH分别为0.55L/gVS、654mg/L、128 mg/L、3545 mg/L、7.21,推流式干式反应器的甲烷产率、氨氮、挥发性脂肪酸、碱度、pH分别为0.48L/gVS、565 mg/L、403mg/L、5377 mg/L、7.46,完全混合干式反应器的甲烷产率、氨氮、挥发性脂肪酸、碱度、pH分别为0.50L/gVS、3014 mg/L、962 mg/L、11319 mg/L,7.49。测序结果表明,完全湿式厌氧消化反应器中的主导细菌分别为ST-12K33 norank,Anaerolineaceae norank,Actinobacteria unclassified,Ruminococcaceae unclassified,主导古菌分别为甲烷鬃菌属、甲烷杆菌属和甲烷螺菌属;推流式干式厌氧消化反应器中的主导细菌分别为Anaerolineaceae norank,Christensenellaceae-7roup,Georgenia,优势古菌为甲烷鬃菌;完全混合干式反应器中主导细菌分别为Christensenellaceae-7roup,WS6 norank,Fastidiosipila,vadinBC27astewater-sludgeroup,优势古菌为甲烷八叠球菌和甲烷鬃菌。得出的主要结论为:1)在3负荷下,完全混合湿式反应器的产甲烷性能最佳;其氨氮、VFA、碱度相较于干式的两个反应器更低,更不易造成对系统的抑制和容器的腐蚀;2)干式反应器中古菌和细菌的种类比湿式更多,且干式和湿式的微生物群落差异较大。3)VFA含量更高的系统,厚壁菌门的丰度越高。4)干式推流式反应器中的Anaerolineaceae科丰度最高,说明含固率,搅拌和氨氮浓度对其都有一定影响;5)三个反应器都是乙酸营养型甲烷菌占优势,但氨氮对甲烷鬃菌的抑制使完全混合干式反应器中的优势菌属从甲烷鬃菌属变为甲烷八叠球菌属,湿式反应器中的氢营养型甲烷菌丰度较干式更高。

关键词： 生物膜(污水处理)  

ISBN: (纸本)9787557666996

摘要： 本书介绍了膜生物反应器的基本知识，同时也对于一些相关的浸没式膜生物反应器元件与组件的设计与运行参数做了介绍，此外又涉及了对于浸没式中空纤维膜与平板膜生物反应器在具体的工程当中的设计要求以及设计参数和与之相关的配套设施的设计、运行参数等，另外还选取了一些代表性工程以及对于工艺的设计和运行参数的介绍。本书可以提供给有关膜生产企业或者是膜生物反应器的工艺设计人员以及污水处理的相关技术人员和管理人员作为参考书籍使用，具有一定的出版价值。

关键词： Design   Water resources management   Environmental science  

摘要： Silage bunker runoff is a form of agricultural pollution that contributes to aquatic ecosystem degradation. Current handling and treatment methods for this process wastewater are often ineffective or expensive. A woodchip bioreactor is an emerging treatment technology designed to facilitate denitrification through the provision of an anaerobic, carbon rich environment. A wood chip bioreactor treatment system, consisting of three pre-treatment tanks, two wood chip bioreactors, and one infiltration basin, was constructed at the Miller Research Complex in South Burlington, Vermont in 2016. Runoff and leachate from an adjacent silage storage bunker is directed into the system. The pre-treatment tanks include two settling tanks and one aeration tank. The former allows for sedimentation of organic matter, while the latter is designed to allow for nitrogen transformations that will help maximize nitrogen removal in the bioreactors. During the summer and fall of 2017, sampling occurred at four points within the system in order to determine the efficacy of various treatment steps. Samples were analyzed for nitrate (NOx– N), ammonium (NH4+–N), total nitrogen (TN), soluble reactive phosphorus (SRP), and total phosphorus (TP) in order to compare inflow and outflow pollutant concentrations and loads. Results indicate that this treatment system significantly reduced nutrient loads in the runoff. Over the entirety of the sampling period, the influent TN and TP mass load were both reduced by approximately 44%.

关键词： Balloon-type   Bubble bioreactor   Gynura procumbens   Inoculums density   Shoot culture   Sucrose  

摘要： Background and objectives: Gynura procumbens has been widely used as a traditional medicine in Indonesia. Micropropagation of this plant was important to fulfill the need of pharmaceutical industry. The aims of this study were to increasing the number of G. procumbens shoots in balloon-type bubble bioreactor influenced by sucrose concentration and inoculums density. Materials and Methods: Nodal segments of G. procumbens were used as explants which were grown in balloon type bubble bioreactor in MS liquid medium supplemented with 2 mg LG^-1 IAA and 4 mg LG^-1 BAP. Shoot culture were conducted under treatment of various concentration of sucrose (10, 30 and 50 g LG^-1) and various inoculums density (5, 10 and 15 explants). Results: The highest multiplication of shoots and growth index were obtained at 50 g LG^-1 sucrose treatment and 5 explants as initial inoculums;there are 9.36 shoots/explants and 13.8 shoots/explants, respectively. Conclusion: The study found that G. procumbens shoots cultured in balloon-type bubble bioreactors increased shoots multiplication significantly. © 2019 Ira Nailas Saadah et al.

关键词： 煤化工废水   陶瓷平板膜   MBR   膜污染  

摘要： 现代煤化工是煤炭清洁化,精细化利用的重要方式,其有利于缓解我国资源对外依赖程度,维护我国能源安全,但是水是制约现代煤化工发展的重要因素。煤化工废水具有水量大,水质复杂的特点,含有酚类,多环芳烃,长链烷烃,杂环类等有机物,对活性污泥存在一定的抑制作用。实验使用陶瓷平板膜生物反应器处理煤化工废水,结合MBR高污泥浓度以及陶瓷平板膜高通量、高强度的特点,考察反应器对煤化工废水的处理效果、膜污染情况及相关影响因素。实验室小试结果表明在MLSS≈7500 mg/L,HRT=24 h时,出水COD小于31.40 mg/L,氨氮小于3.03 mg/L,总酚小于3.76 mg/L,浊度小于0.4 NTU,满足污水综合排放一级标准(GB8978-2002),其中生物降解起了主要作用,微滤膜起到了强化作用。实验中测得HRT为21 h,DO在3.2.0 mg/L,pH在7.1.5时,污染物的去除效果较好,由于污泥有机负荷较低,MLSS对处理效果的影响不明显。活性污泥是MBR的主体部分,高通量测序表明混合液和膜片上的微生物多为好氧细菌,有机物降解菌和硝化细菌含量较高。在不同的生长环境下,优势菌群发生了变化,混合液中细菌总数更多,而膜片上的细菌具有更高的生物多样性。膜组件的污染和更换是限制MBR大范围使用的重要因素。通量为5 L·m·h条件下,反冲洗可以有效减缓膜污染进程,TMP在66 d后到达40 kPa。运行结束后,滤饼层阻力和浓差极化阻力分别占总阻力的50.08%和48.87%,固有阻力和内部阻力只占小部分。膜污染的过程是复杂的,膜的性能、进水的性质和膜所处的水动力环境是决定膜污染的基本因素。通过接触角,清水通量的对比显示出陶瓷膜具有较高的亲水性,表明其在有机废水处理中有一定的优越性。从运行初期到后期,EPS和SMP的浓度逐渐减小。MLSS在50000000 mg/L时,TMP的增长速率变化不明显,MLSS大于12000 mg/L时,增长速率快速增加。曝气量为200 mL/min时为此条件下的临界通量,抽停比为7:3时污染速率较慢。通过SEM观察,发现NaClO和NaOH作为化学清洗剂时效果较好,从废水水质,使用的经济性和安全性考虑,NaClO+柠檬酸的组合清洗方式最为合适。在陶瓷平板膜生物反应器中试研究中,HRT=3 h时COD的去除率达到37.42%,氨氮浓度小于4.46 mg/L,浊度稳定在1 NTU以下,通量为30 L·m·h下化学清洗周期超过5 d,达到中试运行目标。

关键词： 自生电场膜生物反应器   导电微滤膜   自生电场   膜污染   出水水质  

摘要： 膜生物反应器（Membrane bioreactor,MBR）因其良好的出水水质、较低的污泥产量和紧凑的装置结构等优势成为污水处理及回用领域中最具发展潜力的技术之一。然而长期运行过程中产生的膜污染问题始终是阻碍其大规模商业化应用的主要因素。与物理、化学及生物清洗方法相比,电场控制膜污染具有清洗效果好、过程稳定、无需外加化学药剂、没有二次污染等特点,是一种清洁、高效的膜污染原位缓解方法。然而,外加电场消耗额外能耗,增加系统运行成本。微生物燃料电池（Microbial fuel cell,MFC）可通过阳极氧化污水中有机物（电子供体）释放电子,进而产生电能,利用MFC产生的电能在MBR中获得电场,构建电场MBR系统,不仅可有效缓解膜污染,降低MBR运行成本,也有利于推进MFC的实际应用进程。主要研究内容和结果如下:（1）导电微滤膜的制备及性质表征。采用共混法,将铜纳米线（Cu-nanowires,Cu-NWs）加入到聚偏氟乙烯膜（Polyvinylidene fluoride,PVDF）铸膜液中,制备获得了Cu-NWs导电微滤膜。结果表明,与商用PVDF膜相比,添加基于PVDF质量35%的Cu-NWs时,所得微滤膜的接触角降低了19.7%,纯水通量提高了40.0%。Cu-NWs在膜面活性层中建立了良好的导电网络,为氧化还原反应（Oxidation-reduction reaction,ORR）提供更多的活性位点,提高了其催化氧化还原的能力。Cu-NWs成功镶嵌在膜的活性层内,减少了牛血清白蛋白（Bovine serum albumin,BSA）溶液中的蛋白质分子在膜面的吸附,膜面蛋白质污染层的厚度降低了18.5%。用纯水清洗膜后,Cu-NWs导电微滤膜面的污染层厚度降低了49.0%。（2）自生电场MBR的运行特性初探。以制备得到的导电微滤膜为过滤介质,以石墨毡为阳极,以质子交换膜（Proton exchange membrane,PEM）为厌氧室和好氧室的分隔材料,构建了序批式自生电场MBR（Spontaneous electric field membrane bioreactor,SEF-MBR）系统,处理模拟污水。结果表明,利用厌氧室的电化学活性菌可将模拟污水中的化学能转化为电能,自生电场强度可达0.077 V/cm,最大输出功率密度为307.7mW/m2,库伦效率（Coulombic efficiency,CE）为28.8±3.5%。此外,SEF-MBR对化学需氧量（Chemical oxygen demand,COD）、氨氮（Ammonia nitrogen,NH4+-N）、总氮（Total nitrogen,TN）和总磷（Total phosphorus,TP）的去除率分别达94.5±0.4%、99.9±0.1%、78.5±4.3%和86.6±4.2%。经过2个多月的运行,Cu-NWs导电微滤膜的膜通量衰减率为90.2%,PVDF膜通量衰减率为93.0%。Cu-NWs导电微滤膜面的污染层厚度约为80.0μm,比PVDF膜面的污染层厚度降低了55.3%。Cu-NWs导电微滤膜面吸附的生物量、EPS浓度和污染物生物体积分别比PVDF膜面的降低了37.3%、31.6%和24.6%。（3）电极间距对自生电场MBR运行特性的影响研究。采用折流板代替PEM作为厌氧室与好氧室的分隔材料,构建了连续流SEF-MBR装置。当系统电极间距从4 cm缩短为2 cm时,膜污染速率从0.15 kPa/d降低到0.08 kPa/d;最大输出功率密度由2.38mW/m2（35.30 mW/m3）提高到2.90 mW/m2（42.95 mW/m3）,平均自生电场强度从0.70mV/cm提高到1.20 mV/cm;好氧池产生的H2O2与·OH浓度分别从0.18 mg/L与未检出提高到0.86 mg/L与0.12 mg/L。除生物降解外,电化学作用和好氧池的氧化剂也能氧化部分COD,提高了COD的降解效率。随着自生电场强度从0.70 mV/cm提高到1.20mV/cm,好氧池产生的氧化剂浓度提高,微生物新陈代谢速度增加,提高了硝化反应和类色氨酸的去除,出水TN浓度从9.9±0.7 mg/L降低到7.5±0.9 mg/L。由于电场的刺激作用,SEF-MBR好氧池污泥的ATP含量比对照MBR的提高了12.8%,微生物活性的提高促进了聚磷菌对正磷的吸收,降低了溶液中TP的浓度,TP浓度从0.8±0.1 mg/L降低到0.5±0.04 mg/L。由于在所构建系统中存在自生电场,系统出水水质满足我国《城镇污水处理厂污染物排放标准》一级A标准。（4）自生电场强度对污泥性质的影响。污泥性质是影响膜污染的主要因素之一,不同电场强度通过改变污泥性质影响膜污染。结果表明,S

关键词： 无泡充氧   生物膜   反应器   生活污水   膜丝特性   处理效果   机制  

摘要： 无泡充氧膜生物反应器（MABR）是一种新型、具有广泛应用前景的污水处理技术,它利用中空纤维膜为水体充氧,同时又作为微生物的附着介质,利用微生物对水中的碳、氮和磷等污染物进行生化处理。其无泡充氧、氧气和底物异向传递、微生物膜结构分层等特点,使得MABR工艺具有高效、节能、占地面积小等多重优势。研究以MABR系统对生活污水的处理效果为研究对象,系统地考察其在不同的工况条件下对生活污水中的碳、氮和磷等污染物的去除情况;研究设计了一种新的膜生物反应器,使得水流均匀分布,且水流方向与中空纤维膜错流;开展了三部分的运行试验,得到了以下结果:1、中空纤维膜丝充氧的特性进行研究:无泡充氧膜生物反应器利用中空纤维膜丝充氧,其起泡点为（0.0368±4.5E-4）MPa。将中空纤维膜丝无泡充氧与传统鼓泡充氧对比,两者氧体积传质系数（KLα）为分别为0.5592h-1和0.0641h-1,无泡充氧约为传统鼓泡充氧的8.7倍,无泡充氧具有高效性。在一定合适范围内,充氧压强越大、水流流速较高、水深较深的条件下,膜丝对水体的充氧效果越佳。2、无泡充氧反应器处理生活污水研究:以低碳氮比的生活污水为试验对象,跟踪了反应器挂膜启动,考察了水力停留时间（HRT）、水流流速、充氧时长、温度和进水有机负荷和氨氮负荷对反应器去除效果的影响,并优化了工艺参数。结果表明:（1）通过接种活性污泥启动MABR系统,并且经过30天使反应器完成挂膜并使微生物驯化成功;（2）当HRT为24h、水流流速为0.068m/s、水温18～36℃、溶解氧（DO）1.38±0.2mg/L时,该反应器具有较好的处理效果;CODCr、NH4+-N、总氮和总磷的平均去除率分别达到85.30%、65.60%、48.20%和25.37%;（3）反应器具有一定的抗冲击性和适应性,对于有机负荷和氨氮负荷具有良好的适应潜力。3、反应器基本工作机理及效能初探:MABR工艺利用中空纤维膜作为水体充氧的介质,并且用作生物膜的附着介质;由于氧气透过中空纤维膜进行扩散,形成氧浓度梯度,导致附着在膜丝上的生物膜出现分层结构,分别为好氧区、兼氧区和厌氧区,满足不同微生物的生存条件;所以进入反应器的碳氮磷等有机物在不同的分区完成降解和去除,通过显微镜观察发现微生物相种类丰富,从侧面验证生物膜分层结构;反应器主要耗能为空压机电耗、循环泵电耗和进水隔膜泵电耗,无泡充氧氧体积转移系数（KLα）约为传统鼓泡充氧的8.7倍,节约曝气电耗潜能可达88.5%。

关键词： 厌氧氨氧化   固定填料   膜生物反应器   生物膜   微生物群落结构  

摘要： 厌氧氨氧化(Anaerobic Ammonia Oxidation, Anammox)技术作为一种新型的可持续生物脱氮工艺，采用NH4+-N和NO2--N作为底物，在厌氧条件下进行脱氮反应，具有耐高氮负荷、理论脱氮效率高(达88.8%)、运行过程能耗低、剩余污泥产生量少等优点。因此，厌氧氨氧化技术在处理晚期垃圾渗滤液、污泥热水解消化液、养殖废水等高氨氮废水方面具有天然的优势。然而，在实际推广应用过程中，厌氧氨氧化技术也面临厌氧氨氧化菌生长缓慢、富集困难、反应启动时间长、易受基质和环境条件影响和抗冲击负荷能力差等问题。　　膜生物反应器(Membrane bioreactor, MBR)可以实现水力停留时间(Hydraulic retention time, HRT)和污泥龄(Sludge retention time, SRT)的分离，适合富集长污泥龄的厌氧氨氧化菌。而填料价格低廉、比表面积高，适于微生物附着生长，在提高厌氧氨氧化系统的抗冲击负荷能力方面具有可行性。本研究通过在膜生物反应器中添加固定填料，形成固定膜-膜生物反应器，研究固定填料对膜生物反应器快速启动及长期运行阶段的厌氧氨氧化菌富集情况、污染物去除效能、抗冲击负荷能力、微生物群落结构特性的影响，以期强化系统的厌氧氨氧化性能。　　研究了聚氨酯(Polyurethane, PU)固定填料对反应器的快速启动效果的影响。在启动阶段，实验组(固定膜-膜生物反应器，IF-MBR)和对照组(膜生物反应器，C-MBR)的脱氮性能均得到了较好的提升。在第75天时，IF-MBR的总氮去除负荷(Nitrogen removal rate, NRR)达到0.56kgNm-3d-1，同时氨氮去除负荷(Ammonia removal rate, ARR)达到0.26kgNm-3d-1，厌氧氨氧化系统启动成功。在第85天时，C-MBR的NRR达到0.52kgNm-3d-1，ARR达到0.24kgNm-3d-1，厌氧氨氧化系统启动成功。相较于对照组，加载固定填料有助于提高反应器的启动效率，缩短启动时间，降低启动成本。　　系统地研究了固定膜-膜生物反应器长期运行过程中厌氧氨氧化菌富集情况、污染物去除效率、系统抗冲击负荷能力、胞外多聚物组成等。结果表明，在长期运行过程中，固定填料可明显提高厌氧氨氧化系统的氮负荷能力，且当进水氮浓度进一步增加时固定填料可以明显提高厌氧氨氧化系统的稳定性，在运行320天后实验组NRR达到1.09kgNm-3d-1，而对照组NRR仅为0.60kgNm-3d-1。此外，固定填料的负载极大地改变了微生物在膜生物反应器内的生长状态，能在有限的容积内对微生物进行更有效的富集，并有效缓解膜污染。对微生物胞外聚合物(Extracellular polymeric substance, EPS)进行检测发现，固定填料使大量胞外多聚物被固定在微生物表面，附着生长态的微生物衰亡后无法快速脱落，仍固定在膜丝和填料上，并产生了腐殖酸，且微生物的生长形态可能对松散结合型胞外多聚物(Loosely-bound EPS, LB)与可溶性微生物代谢产物(Soluble microbial product, SMP)之间的物质交换过程具有一定的影响。　　高通量测序结果表明，长时间运行后，IF-MBR与C-MBR两个反应器内各部分的OTU和Shannon指数均下降，Simpson指数升高，表明反应器中的微生物群落功能性得到增强，多样性降低，其中IF-MBR填料部分OTU和Shannon指数为所测各部分的最高值，表明固定填料对微生物有非常明显的聚集作用。实验初期，两个反应器中CandidatusBrocadia的种群丰度均较低，在10%左右。此时短波单胞菌属Brevundimonas、金黄杆菌属Chryseobacterium、厌氧氨氧化菌属CandidatusBrocadia、Paenisporosarcina等4种微生物为优势菌群。经过250d的运行，IF-MBR内部悬浮液、膜丝、填料三部分CandidatusBrocadia的种群丰度差异较大，为悬浮液76%，膜丝样8%，填料样40%;C-MBR内部悬浮液、膜丝两部分CandidatusBrocadia的种群丰度未有明显差异，均在25~33%之间。此时两个反应器中粒杆黏细菌属Chondromyces、Blastocatella、厌氧氨氧化菌属CandidatusBrocadia等3种微生物为优势菌群。

关键词： 转基因猪   生物反应器   唾液腺   神经生长因子  

摘要： 神经生长因子（Nerve growth factor,NGF）是一种能促进神经元细胞增殖和分化的蛋白。提取自小鼠唾液腺的鼠源神经生长因子（mouse NGF,m NGF）在我国已被批准作为药物用于治疗人神经退化及损伤类疾病。m NGF虽然与人神经生长因子（human NGF,h NGF）同源性很高,但它在人细胞中的生物活性显著低于h NGF,且其作为药物用于人类临床治疗仍然存在免疫原性问题。因此,如能高效低成本生产高活性的h NGF,将可用其来替代目前使用的m NGF药物。动物唾液腺天然高水平表达高活性的NGF,这表明动物唾液腺是NGF表达的一个理想组织。此外,动物唾液腺也是一种潜在的高效的生物反应器。本研究的目的是利用转基因猪唾液腺作生物反应器生产h NGF。本研究将携带绿色荧光蛋白（Enhanced green fluorescent protein,EGFP）筛选标记基因的h NGF表达载体转染猪胎儿成纤维细胞,筛选获得转h NGF基因单细胞克隆团,将其作为供体细胞通过体细胞克隆法制备出4头原代转h NGF基因猪;EGFP表达观察,PCR和Southern blot分析都证明该4头原代转基因猪基因组整合了外源的EGFP和h NGF基因;酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA）检测结果显示转基因猪唾液中分泌的h NGF浓度约达600-1200ng/m L;用含高浓度h NGF的转基因猪唾液处理培养的PC12细胞证明其具有促进类神经元细胞分化的活性;为了防止转基因猪表达的内源猪神经生长因子（pig NGF,p NGF）“污染”从唾液中纯化的h NGF,本研究还构建了11个靶向猪神经生长因子（p NGF）基因的CRISPR/Cas9系统表达载体,选出两个突变p NGF基因效率最高的载体,将其共转染从转h NGF基因猪耳组织分离培养的的成纤维细胞后,成功筛选得到5个p NGF基因被敲除的转h NGF基因单细胞克隆团。该5个单细胞克隆团在后续研究中可作为供体细胞用体细胞克隆法制备p NGF基因敲除的转h NGF基因猪。综上,本研究成功建立了一种利用转基因猪唾液腺作为生物反应器制备人类药物蛋白的新技术,并为制备h NGF蛋白提供了一种高效的新方法。