关键词:
棉铃虫
甲硫氨酸富集蛋白SP1
卵巢发育
RNA干扰
甲硫氨酸
摘要:
【目的】探讨甲硫氨酸富集蛋白(methionine-rich storage protein, HaSP1)在棉铃虫(Helicoverpa armigera)卵巢发育中的功能及相关机制。【方法】分析蛋白质不足处理棉铃虫4龄幼虫对卵巢发育、HaSP1基因转录表达和JH滴度的影响;PCR扩增棉铃虫HaSP1基因开放阅读框序列,并进行生物信息学分析;利用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测HaSP1基因在棉铃虫羽化前3 d至羽化后4 d雌成虫卵巢和脂肪体中的转录表达变化;最后通过RNA干扰技术(RNA interference, RNAi)敲低雌成虫体内HaSP1基因的表达量,分析对卵巢发育及其体内总氨基酸含量、甲硫氨酸(methionine,Met)含量以及HaVg转录表达量的影响。【结果】棉铃虫幼虫期饲料中蛋白质不足,会显著抑制雌成虫的生殖能力,并导致JH滴度和HaSP1基因的转录显著降低。棉铃虫HaSP1基因的开放阅读框长2 256 bp,棉铃虫、黏虫(Mythimna loreyi)和粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)中的SP1亲缘关系更近。HaSP1基因在卵巢中羽化前第2天高表达,在脂肪体中羽化前第3天高表达。敲低HaSP1基因转录会抑制棉铃虫卵巢发育,并显著降低HaVg转录、总氨基酸及Met含量。【结论】HaSP1通过影响甲硫氨酸含量从而在棉铃虫卵巢发育中发挥重要作用。