关键词:
瑞马唑仑
细胞凋亡
神经炎症
脑出血
学习记忆障碍
摘要:
目的探讨瑞马唑仑(remimazolam,Re)对脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)大鼠学习记忆障碍的影响及机制。方法右侧尾状核注射胶原酶Ⅶ构建ICH大鼠模型。将大鼠随机分为假手术(Sham)组、ICH组和ICH联合Re组。ICH组和ICH联合Re组大鼠右侧尾状核内注射0.4 IU胶原酶Ⅶ,Sham组注射相同剂量的生理盐水。ICH联合Re组在胶原酶Ⅶ注射前1 h按20 mg·kg^(−1)剂量腹腔注射1次Re,然后,在胶原蛋白Ⅶ注射后每12 h注射1次Re。用Morris水迷宫实验评价大鼠的学习记忆能力,用神经功能评分评估大鼠神经功能缺损情况;干湿比评估脑水肿情况;冠状切片分析血肿大小;苏木素-伊红(hematoxylin&eosin,HE)染色和Nissl染色检测组织病理变化。用免疫荧光染色和蛋白质印迹法(Western blotting)检测相关蛋白的表达水平。酶联免疫吸附试验测定炎症因子的含量。末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling,Tunel)-神经特异核抗原(neurospecific nucleoprotein,NeuN)双免疫荧光染色和Fluoro-Jade C(FJC)染色分别评价神经元细胞凋亡和神经元退化情况。结果ICH术后24、72 h大鼠神经功能缺损和脑含水量均显著高于Sham组,Re可降低神经功能评分并降低脑含水量。Re可显著缩小ICH后3 d的脑血肿体积,减轻组织病理学损伤,并提高脑出血大鼠的学习记忆能力。ICH导致大鼠脑组织中离子钙结合适配器分子1(ionized calcium-binding adapter molecule-1,Iba-1)、髓过氧物酶(myeloperoxidase,MPO)阳性细胞数、Iba-1、MPO、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β和IL-6的表达水平及大鼠血清和脑脊液中TNF-α、IL-1β和IL-6的含量均显著增加,Re则可降低Iba-1、MPO、TNF-α、IL-1β和IL-6水平。此外,Re可显著降低ICH大鼠脑组织中FJC和Tunel阳性细胞数量及促凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)和剪切型天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3,cl-caspase-3)的表达水平,提高抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平。结论Re可通过抑制细胞凋亡和神经炎症改善脑出血引起的学习记忆障碍。