关键词:
天山雪莲
槲皮素
骨肉瘤
基质金属蛋白酶2
网络药理学
摘要:
目的:探讨天山雪莲药效成分在骨肉瘤治疗中的潜在机制。方法:利用传统中药系统药理学平台(TCMSP)筛选天山雪莲的药效成分和潜在靶点,并通过GEO数据库分析骨肉瘤的差异表达基因。通过韦恩图识别天山雪莲治疗骨肉瘤的潜在靶点,结合蛋白质相互作用(PPI)网络及拓扑学分析筛选核心靶点。随后进行分子对接分析,并通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹法(WB),验证重要药效成分对核心基因表达水平的影响。结果:识别天山雪莲与骨肉瘤的共同靶点67个,确定基质金属蛋白酶2(MMP2)为其中的核心基因。分子对接分析显示,槲皮素与MMP2蛋白具有较强的结合能力(结合能为8.9 kcal/mol)。实验进一步证实槲皮素显著抑制MMP2 mRNA在骨肉瘤细胞系U2OS(7.5μmol/L:t=9.30,P=0.0007;15μmol/L:t=11.97,P=0.0003)及HOS(7.5μmol/L:t=13.09,P=0.0002;15μmol/L:t=21.77,P<0.0001)中的表达水平。此外,槲皮素还显著下调了MMP2蛋白在U2OS(7.5μmol/L:t=9.14,P=0.0008;15μmol/L:t=11.97,P=0.0003)及HOS细胞中的表达(7.5μmol/L:t=20.55,P<0.0001;15μmol/L:t=41.88,P<0.0001)。结论:天山雪莲的关键成分槲皮素可靶向抑制骨肉瘤细胞中MMP2的表达水平,对骨肉瘤具有潜在的治疗价值。