关键词:
温经汤
肝纤维化
网络药理学
动物实验
大鼠
摘要:
目的通过网络药理学方法探讨温经汤治疗肝纤维化的作用机制,并对核心靶点进行动物实验验证。方法检索TCMSP筛选温经汤组方药物活性成分及相关靶点,利用UniProt数据库获取温经汤活性成分对应靶点,采用Cytoscape 3.7.2构建“中药-成分-靶点”网络,检索GeneCards数据库筛选肝纤维化相关靶点,使用STRING数据库构建PPI网络,筛选肝纤维化核心成分和关键靶点,并进行GO功能和KEGG通路富集分析。对结果进行动物实验验证,选取10只作为空白组,其余45只采用四氯化碳诱导肝纤维化大鼠模型。造模结束后,将40只造模成功大鼠按随机数字表法分为模型组和温经汤高、中、低剂量组,每组10只。温经汤高、中、低剂量组灌胃1.5×3.18、3.18、0.5×3.18 g/kg温经汤,空白组灌胃等体积蒸馏水,1次/d,连续灌胃8周。采用HE染色观察大鼠肝组织病理形态,全自动生化仪检测大鼠血清GPT、GOT水平,Western blot检测大鼠肝组织TNF、Akt、IL-6蛋白表达。结果获得温经汤有效成分188个,度值较高的有效成分为β-谷甾醇、槲皮素、柚皮素等,收集肝纤维化基因靶点799个,PPI网络核心靶点为TNF、AKT、IL6等,通过GO功能和KEGG通路富集得到抗肝纤维化相关通路包括癌症通路、TNF及PI3K-Akt等信号通路。动物实验结果显示,模型组大鼠肝组织有明显炎症浸润、胶原纤维及假小叶生成,温经汤高、中、低剂量组大鼠肝组织炎症与纤维化水平较模型组均不同程度改善;与模型组比较,温经汤高、中、低剂量组大鼠血清GPT、GOT水平降低(P<0.05),TNF、Akt、IL-6蛋白表达下降(P<0.05)。结论温经汤可能通过干预TNF、AKT、IL6靶点,调节癌症通路及TNF、PI3K-Akt等信号通路,发挥抗肝纤维化作用。