关键词:
活心丸
心力衰竭
网络药理学
转录组学
环磷酸腺苷/蛋白激酶A信号通路
摘要:
目的基于网络药理学和转录组学分析探讨活心丸(HXP)防治心力衰竭(HF)的作用机制。方法将小鼠随机分为正常对照组,模型对照组,阳性对照组(沙库巴曲缬沙坦钠,60 mg·kg^(-1)),HXP小、大剂量组(31.2,62.4 mg·kg^(-1));其他组皮下注射异丙肾上腺素(ISO)(5 mg·kg^(-1))造模,正常对照组灌胃等量无菌0.9%氯化钠溶液;6 h后各给药组灌胃相应药物,正常对照组与模型对照组灌胃等体积无菌水,连续21 d。彩色多普勒超声成像系统检测小鼠心功能;酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定血清环磷酸腺苷(cAMP)、N端B型利钠肽原(NT-proBNP)及B型利钠肽(BNP)水平;苏木精-伊红(HE)染色和马松(Masson)染色法评价心肌组织病理形态,计算胶原容积分数(CVF);网络药理学结合转录组学预测HXP防治HF潜在靶点和信号通路,采用分子生物学手段进行验证。结果与正常对照组比较,模型对照组左室收缩末期内径(LVESd)及左室舒张末期内径(LVEDd)增大(P<0.01),左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(LVFS)降低(P<0.01),血清BNP、NT-proBNP、cAMP含量上升(P<0.01),心肌组织间胶原纤维增多,CVF值升高(P<0.01)。与模型对照组比较,HXP小、大剂量组和阳性对照组LVESd、LVEDd下降(P<0.01),LVEF、LVFS上升(P<0.01);血清BNP、NT-proBNP、cAMP水平下降(P<0.05);心肌组织纤维化程度减轻,CVF下降(P<0.01)。网络药理学与转录组学联合分析,共预测出HXP防治HF关键靶点10个:CACNA1H、SCN10A、FGF12、PVALB、ACAN、LGALS3、SERPINE1、MMP3、GSTM1、VDR。蛋白免疫印迹法结果显示,与正常对照组比较,模型对照组心肌组织蛋白激酶A(PKA)和cAMP反应元件结合蛋白(CREB)蛋白活化水平升高(P<0.01);与模型对照组比较,HXP小、大剂量组和阳性对照组心肌组织PKA、CREB蛋白活化水平下降(P<0.05)。结论HXP对ISO所致小鼠HF具有改善作用,该作用可能涉及众多靶点及cAMP/PKA信号通路。