关键词:
脑淀粉样血管病
重复经颅磁刺激
类淋巴系统
水通道蛋白4
摘要:
目的探讨重复经颅磁刺激(rTMS)对脑淀粉样血管病(CAA)模型小鼠的学习记忆功能和Aβ异常沉积的影响,并进一步研究其作用机制是否涉及类淋巴系统的转运功能。方法8月龄SPF级的Tg-SWDI小鼠按照随机数字表法分为CAA组和rTMS干预组,每组7只。另设相同背景和月龄的7只野生型小鼠作为对照组。rTMS组接受为期两周的高频rTMS干预,CAA组和对照组仅进行束缚,不接受rTMS干预。通过新物体识别、Y迷宫、Morris水迷宫实验评估学习记忆功能;通过免疫荧光染色来评估Aβ沉积、类淋巴系统的清除功能和水通道蛋白4(AQP4)极化;通过Western blot评估AQP4的表达水平。采用SPSS 25.0和GraphPad Prism 9.5软件进行统计分析,逃避潜伏期数据采用重复测量方差分析,其他数据多组间比较采用单因素方差分析。结果(1)新物体识别实验:在测试期,3组小鼠的识别指数差异有统计学意义(F=22.59,P<0.05)。CAA组小鼠的新物体识别指数显著低于对照组(P<0.05);rTMS组小鼠的新物体识别指数高于CAA组(P<0.05)。(2)Y迷宫实验:3组小鼠的自发交替率差异有统计学意义(F=5.00,P<0.05)。CAA组小鼠的自发交替率低于对照组(P<0.05),rTMS组小鼠自发交替率高于CAA组(P<0.05)。(3)Morris水迷宫实验:3组小鼠的潜伏期时间和组别交互作用显著(F=4.05,P=0.02),时间主效应(F=713.22,P<0.01)和组别主效应(F=421.55,P<0.01)均显著。3组小鼠的游泳速度差异无统计学意义(F=0.19,P>0.05),穿越平台次数、中环滞留时间百分比差异有统计学意义(F=71.67,294.14,均P<0.05)。CAA组小鼠穿越平台次数和中环滞留时间百分比少于对照组(均P<0.01)。rTMS组小鼠穿越平台次数和中环滞留时间百分比均多于CAA组(均P<0.01)。(4)免疫荧光实验:3组小鼠脑血管Aβ表达差异有统计学意义(F=385.76,P<0.01)。CAA组小鼠脑血管中Aβ明显高于对照组(62.00±2.65,9.00±1.00,P<0.01);rTMS组小鼠脑血管中Aβ明显低于CAA组(51.33±3.21,62.00±2.65,P<0.01)。以对照组的荧光示踪剂残余量为基准,3组小鼠大脑胼胝体和大脑皮质示踪剂强度均差异有统计学意义(F=258.97,46.44,均P<0.05),CAA组小鼠胼胝体和大脑皮质区的示踪剂强度明显高于rTMS组(胼胝体:3.57±0.21,1.45±0.14;大脑皮质:4.96±0.79,1.78±0.47,P<0.01)。rTMS组小鼠脑皮质区AQP4极化水平明显高于CAA组(0.51±0.07,0.30±0.02,P<0.01)。结论rTMS可通过调节AQP4极化促进类淋巴系统转运功能来改善CAA模型小鼠的学习记忆损伤和Aβ异常沉积。