关键词:
解毒化瘀颗粒
慢加急性肝衰竭
库普弗细胞
外泌体
miRNA
低氧诱导因子-1信号
中医药
炎症反应
摘要:
目的:基于库普弗细胞(Kuffer)外泌体微RNA(miRNA)的角度,观察解毒化瘀颗粒(JDHY)对慢加急性肝功能衰竭(ACLF)大鼠的干预作用,并探讨其可能的效应机制。方法:将70只大鼠随机分为正常组(10只)、模型组(30只)以及中药组(30只)。采用四氯化碳(CCl_(4))与脂多糖(LPS)和D-氨基半乳糖(D-GalN)结合构建ACLF大鼠模型,JDHY于造模前48 h灌胃,正常组和模型组给予等量蒸馏水代替。在中药干预及造模完成后,收集各组大鼠肝组织、血液等。提取每组大鼠肝组织库普弗细胞外泌体,并阐明JHDY和库普弗细胞外泌体之间的关系。使用高通量miRNA芯片技术检测各组大鼠库普弗细胞外泌体miRNA表达变化,并确定ACLF组与中药组之间的差异miRNA。最后,通过对库普弗细胞外泌体miRNA进行生物信息学分析,并使用信号相关通路阻断剂和miRNA干扰技术进行反向验证,确定了JDHY发挥药理作用的可能途径。结果:体内研究表明,JDHY颗粒能有效保护ACLF大鼠的肝功能,减轻肝组织病理损伤;体外研究表明,JDHY颗粒可以通过上调库普弗细胞外泌体中miR-9a-5p的表达,减轻ACLF大鼠肝细胞的损伤,提高肝细胞的存活率,这可能是抑制了低氧诱导因子(HIF)信号通路的过度激活,该结果与生物信息学分析一致。结论:JDHY通过上调库普弗细胞外泌体中miR-9a-5p的表达并抑制HIF信号通路的过度激活,在体外和体内保护ACLF大鼠的肝脏损伤,表明其在治疗肝脏疾病中的潜在作用。