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关键词： 鹅星状病毒   P2蛋白   原核表达   单克隆抗体   抗原表位  

摘要： [目的]本研究旨在制备抗鹅星状病毒(goose astrovirus,GAstV)单克隆抗体并鉴定其识别的抗原表位,为快速检测GAstV感染和研究P2蛋白的结构与功能奠定基础。[方法]通过原核表达系统表达并纯化GAstV-2 P2蛋白,用其免疫6周龄BALB/c雌鼠,利用杂交瘤技术,经过细胞筛选和亚克隆,获得3株能稳定分泌抗P2蛋白的单克隆抗体,利用Western blot(WB)和间接免疫荧光(IFA)鉴定单抗特异性,用获得的单抗对GAstV感染阴、阳性肾脏切片进行免疫组化检测,用间接ELISA测定单抗效价和亚型,同时构建P2蛋白的不同截短体来鉴定单抗识别抗原表位。[结果]本研究共获得3株能稳定分泌抗P2蛋白抗体的杂交瘤细胞,命名为1B10、3C6、5B1。单抗效价分别为1∶2048000、1∶512000、1∶256000,亚型鉴定结果显示,3株单抗的重链均为IgG2b,轻链均为Kappa型。WB和IFA结果显示,3株单抗均可以特异性结合鹅星状病毒。免疫组化结果显示,5B1和3C6可以应用于免疫组化的检测。抗原表位鉴定结果显示,1B10识别_(109)TSTTSTGGLITELRN_(123),3C6识别_(206)LTDPEEDDDPLS_(217),5B1识别_(96)LNPELETAVLRV_(107)。[结论]本研究成功制备能识别不同抗原表位的3株单克隆抗体,为快速检测GAstV感染和研究P2蛋白的结构与功能奠定物质基础。

关键词： 山楂果胶寡糖   衰老   细胞凋亡   抗氧化能力   p53/p21/p16   通路   本文网刊:  

摘要： 以过氧化氢(H2O2)诱导的人胚肺成纤维细胞(Human embryonic lung fibroblast cells,MRC-5)作为衰老模型,通过对细胞活力、存活率、β-半乳糖苷酶活性、线粒体膜电位、活性氧(ROS)含量、抗氧化能力和p53/p21/p16信号通路相关蛋白的表达水平等指标进行测定,研究山楂果胶寡糖(HPOS)对MRC-5衰老细胞的抗衰老作用。结果表明:与模型组相比,在浓度为0.8 mg/mL的山楂果胶寡糖干预下,MRC-5衰老细胞的细胞活力、存活率和线粒体膜电位分别极显著增加了16.4%,17.0%和284.3%(P<0.01);β-半乳糖苷酶阳性细胞比例和ROS荧光强度分别极显著降低了66.9%、77.2%(P<0.01);超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力较模型组细胞分别增加了72.0%和50.0%,而丙二醛(MDA)含量极显著降低了42.6%(P<0.01)。浓度为0.8 mg/mL的山楂果胶寡糖干预极显著抑制了p53/p21/p16信号通路中p53、p21和p16蛋白的表达(P<0.01)。总之,山楂果胶寡糖通过抑制由衰老诱发的细胞凋亡和氧化应激损伤,调节p53/p21/p16通路,从而改善H2O2诱导的MRC-5细胞衰老。本研究结果将为开发山楂果胶寡糖作为抗衰老的功能性食品配料提供科学依据。

关键词： 养殖密度   水质   高通量测序   水体细菌群落   肠道微生物   种虾   罗氏沼虾  

摘要： 为探讨保种期罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)种虾合理的放养密度,实验以温室保种期的种虾为研究对象,雌雄比例2﹕1,雌虾初始体重为(17.95±1.11)g,雄虾初始体重为(21.39±1.63)g,设置3个放养密度:LD(1.0 kg/m^(3))、MD(1.5 kg/m^(3))、HD(2.0 kg/m^(3)),研究了密度对罗氏沼虾种虾抱卵率、存活率、水质、水体和肠道微生物群落的影响。结果表明:水质未稳定前,水体中氨氮和亚硝态氮的含量随着放养密度的增加而升高,HD组显著高于LD组(P<0.05)。水质稳定后各密度组之间无显著差异(P>0.05)。LD组和MD组雌虾的抱卵率显著大于HD组(P<0.05),LD组和MD组无显著差异(P>0.05)。存活率随着放养密度的增加显著降低(P<0.05)。放养密度显著影响罗氏沼虾的规格,小规格虾的比例随着放养密度的升高显著增加(P<0.05)。水体微生物群落结果表明,水体中氨氮含量最高时,硝化螺旋菌属(Nitrospira)为HD组的指示物种。肠道微生物结果表明,在相同的采样时间,放养密度对罗氏沼虾肠道微生物菌群组成无显著影响。但当水体中氨氮含量最高时,潜在病原菌柠檬酸杆菌(Citrobacter)的占比在MD组和HD组有所升高,说明密度引起的水质变化显著影响中高密度组的肠道微生物群落组成。综上,建议保种期罗氏沼虾的放养密度以1.0 kg/m^(3)为宜。

关键词： 数字档案馆建设   国家社会科学基金项目   中国人民大学   知识产权出版社   生态系统研究   业务变革   现状和问题   研究成果  

摘要： 中国人民大学信息资源管理学院教授刘越男等的新著《生态系统视角下我国数字档案馆建设战略研究》(知识产权出版社2024年版)是刘教授主持国家社会科学基金项目的研究成果。全书共九章,第一章通过在分析我国数字档案馆的现状和问题的基础上,阐释生态系统研究视角的内涵,构建数字档案馆建设的研究框架;第二章至第六章深入探讨了我国数字档案馆建设需要从体制机制、业务变革和系统建设三个方面进行全方位加强能力建设。

关键词： 慢性乙型肝炎   恩替卡韦   丙酚替诺福韦   低病毒血症   高荧光质量PCR法   治疗  

摘要： 目的探讨采用高敏HBV DNA检测技术在低病毒血症(LLV)慢性乙型肝炎(CHB)患者抗病毒治疗疗效监测中的应用价值。方法2019年1月~2022年12月我院诊治的200例CHB患者,纳入患者均接受恩替卡韦(ETV)治疗48 w或以上,对获得完全病毒学应答(CVR)患者继续口服ETV治疗,对未获得CVR患者,均改为富马酸丙酚替诺福韦(TAF)治疗,观察48周。分别采用实时荧光定量PCR(qPCR)和高荧光质量PCR(fq-PCR)法检测血清HBV DNA载量。结果在200例经ETV治疗48 w的CHB患者,经fq-PCR检测发现CVR者145例(72.5%),血清HBV DNA载量>2000 IU/mL(PR)者13例(6.5%),血清HBV DNA载量在21~2000 IU/mL(LLV)者42例(21.0%);在TAF继续治疗48 w末,经qPCR检测发现PR组获得CVR者13例(100.0%),而经fq-PCR检测发现只有5例(38.5%,P<0.05),LLV组则分别为41例(97.6%)和30例(71.4%,P<0.05),fq-PCR检测两组CVR比较,差异具有统计学意义(x^(2)=4.662,P<0.05);PR组和LLV组血清AST和ALT水平均正常,无统计学差异(P>0.05),而LLV组血清HBV DNA载量为(125.6±114.2)IU/mL,显著低于PR组【(370.4±217.8)IU/mL,P<0.05】。结论采用高敏PCR检测技术可以帮助发现接受抗病毒治疗而处于LLV状态的CHB患者,以帮助临床做出治疗决策,其临床意义还有待于进一步观察。

关键词： 腺病毒   流感病毒   临床特征   重症肺炎  

摘要： 目的研究住院儿童腺病毒合并流感病毒性肺炎的临床特征及分析重症肺炎的危险因素,以提高对儿童腺病毒合并流感病毒性肺炎的认识。方法收集2023年3月-2024年2月在南京医科大学第一附属医院儿科住院的468例腺病毒肺炎患儿临床资料。采用SPSS 23.0统计学软件分析腺病毒合并流感病毒性肺炎的临床特征及发生重症肺炎的危险因素。结果468例住院儿童腺病毒肺炎中,单纯腺病毒感染21.15%(99/468),腺病毒合并流感病毒感染14.10%(66/468),腺病毒合并流感病毒及支原体感染14.96%(70/468),腺病毒合并支原体感染29.91%(140/468),腺病毒合并呼吸道合胞病毒感染3.63%(17/468)。与单纯腺病毒感染的肺炎病例相比,腺病毒合并流感病毒感染的肺炎病例有更长的住院时间、更长的发热时间、更多的呕吐与腹泻等消化道症状、更易发生CRP升高(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,年龄小于5岁、入院后前3天未使用糖皮质激素、CT示肺大片实变或肺不张以及支气管镜下见痰栓堵塞或塑型支气管、D-二聚体升高等是腺病毒合并流感病毒感染的肺炎病例发生重症肺炎的独立危险因素(P<0.05)。结论及早应用激素可改善预后,小于5岁、早期未使用糖皮质激素、肺实变或肺不张以及痰栓堵塞或塑型支气管、D-二聚体升高等是腺病毒合并流感病毒感染的肺炎病例发生重症肺炎的独立危险因素。

关键词： 创新创业教育   生态系统   运行机制   可持续发展  

摘要： 在对创新创业教育生态系统两类研究视角比较分析基础上,探讨价值观视角下创新创业教育生态系统运行机制,指出教师、学生和企业三大微观主体对自身价值的追求和价值实现过程的互动驱动高校创新创业教育生态系统的持续运行,并对创新创业教育生态系统从外部驱动转化为内部驱动的路径进行实践层面的分析。认为将创新创业教育对学生“创新精神和创业能力培养”的表述具象化为可感知的价值主张,并以价值创造为核心实现创新创业教育生态系统各微观参与主体的价值追求,是创新创业教育生态系统持续演进的基础动力和良性运行的基础。

关键词： 藏西北绒山羊   过瘤胃蛋氨酸   过瘤胃赖氨酸   生长性能   血浆指标   瘤胃内环境  

摘要： 本试验旨在探究过瘤胃氨基酸对藏西北绒山羊生长性能、血浆生化指标、抗氧化指标及瘤胃内环境的影响。试验选取12月龄的藏西北绒山羊32只,随机分为4组,每组8个重复(公母各半),每个重复1只羊。对照组羊饲喂基础饲粮,RPMet组羊饲喂基础饲粮+0.5%RPMet(过瘤胃蛋氨酸),RPLys组羊饲喂基础饲粮+1%RPLys(过瘤胃赖氨酸),RPLys+RPMet组羊饲喂基础饲粮+0.5%RPMet+1%RPLys,预试期7 d,正试期49 d。结果显示,RPLys组和RPLys+RPMet组羊的末重(FBW)和平均日采食量(ADFI)显著高于对照组和RPMet组(P<0.05);各试验组的平均日增重(ADG)显著高于对照组(P<0.05)。试验第21天,各试验组的血浆尿素氮(BUN)和丙二醛(MDA)含量显著低于对照组(P<0.05),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著高于对照组(P<0.05);试验第49天,RPMet组和RPLys+RPMet组的总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性显著高于对照组(P<0.05),RPMet组的GSH-Px活性显著高于对照组(P<0.05)。RPMet组和RPLys+RPMet组的血浆蛋氨酸(Met)含量显著高于对照组(P<0.05);各试验组的血浆天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、丝氨酸(Ser)、精氨酸(Arg)和总氨基酸(TAA)含量均显著高于对照组(P<0.05);苯丙氨酸(Phe)含量RPLys组最高,对照组最低,两者差异显著(P<0.05),RPMet组与RPLys+RPMet组间差异不显著(P>0.05)。RPMet+RPLys组的瘤胃氨态氮(NH3-N)含量显著高于对照组(P<0.05);RPMet组和RPMet+RPLys组的微生物蛋白(MCP)含量显著高于对照组(P<0.05);瘤胃液总挥发性脂肪酸各组间均无显著差异(P>0.05)。综上,过瘤胃蛋氨酸和赖氨酸可以显著提高藏西北绒山羊的生长性能和血浆抗氧化能力,对瘤胃挥发性脂肪酸的产生没有影响。

关键词： 免疫效应细胞   嵌合抗原受体   淋巴瘤患者   根治性治疗   血液系统疾病   神经毒性综合征   白血病   CAR  

摘要： 近年来,嵌合抗原受体-T细胞疗法(chimeric antigen receptor-T cell,CAR-T)因其高度的特异性与强大的肿瘤细胞杀伤力,已广泛用于血液系统疾病如白血病与淋巴瘤患者的根治性治疗。免疫效应细胞相关神经毒性综合征(immune effector cell associated neurotoxicity syndrome,ICANS)为CAR-T细胞回输后诱发的内源性或输注的T细胞和(或)其他免疫效应细胞的激活。

关键词： 呼吸道病毒   实体器官移植   造血干细胞移植   抗病毒治疗   流感病毒   新型冠状病毒   巨细胞病毒   呼吸道合胞病毒  

摘要： 病毒感染始终是人类健康面临的重要挑战。实体器官移植和异基因造血干细胞移植受者因接受免疫抑制治疗,免疫功能较弱,属于病毒感染的高危人群。与普通人群感染不同,移植受者呼吸道病毒感染后容易出现肺炎甚至重症肺炎,需要临床医师高度关注。因此,本文针对该类人群病毒感染的临床特点及特殊性管理,就移植受者常见呼吸道病毒感染的流行特点、感染后早期诊断及干预、重症预警、药物治疗策略等方面进行综述,供临床同行借鉴及参考。