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关键词： 宏基因组   根际土壤微生物   群落结构   功能差异   银杉  

摘要： [目的]通过探究不同银杉种群根际土壤微生物群落的结构及功能差异,旨在探讨根际土壤微生物群落对银杉生长发育的影响。[方法]以广西桂林花坪国家级自然保护区的红滩、谢塘湾和野猪塘3个银杉种群为研究对象,提取其根际土壤微生物总DNA,进行宏基因组测序,比较分析银杉人工种群(红滩)与自然种群(谢塘湾、野猪塘)根际土壤微生物群落结构与功能之间的差异,并探索造成该差异的主导土壤环境因子。[结果](1)银杉人工种群和自然种群根际土壤微生物群落结构存在显著差异,主要表现在相对丰度占比最大的3个菌门,即变形菌门、放线菌门和酸杆菌门;(2)土壤p H值和TK含量是造成银杉人工种群和自然种群根际土壤微生物群落结构差异的主导因子;(3)银杉人工种群和自然种群根际土壤微生物群落功能存在显著差异,主要表现在甘氨酸的生物合成和代谢(Glycan biosynthesis and metabolism)、寄生虫传染病(Infectious disease:parasitic)、其他氨基酸代谢(Metabolism of other amino acids)等方面;(4)土壤p H值和TK含量是造成银杉人工种群和自然种群根际土壤微生物群落功能差异的主导因子。影响银杉根际土壤微生物群落结构与功能的土壤环境因子具有一致性。[结论]银杉的根际土壤微生物群落结构与功能在自然种群中表现得比人工种群的更复杂,但两类种群中影响其结构与功能的主导土壤环境因子是一致的,在实施银杉种苗野外回归种植时,应充分考虑根际土壤微生物群落对银杉种苗生长的影响。

关键词： 复制型慢病毒   逆转录酶   嵌合抗原受体T细胞   方法学验证  

摘要： 目的建立基于逆转录酶活性的复制型慢病毒检测方法,并进行方法学验证及适用性研究。方法以莫洛尼鼠白血病病毒逆转录酶为标准品,以噬菌体MS2 RNA为模板,经反转录后采用TaqMan探针实时荧光定量PCR方法检测特异性扩增信号。对方法的专属性、线性范围、准确度、重复性、中间精密度、最低定量限、最低检出限、耐用性和适用性进行验证。结果通过优化qPCR引物、探针浓度及反应条件,已建立稳定灵敏的逆转录酶活性检测方法。该方法专属性良好,对4种类型的细胞上清样品均无特异性扩增;在10^(4)~10^(9)pU/μL之间具有良好线性范围,r^(2)>0.99,且扩增效率处于93%~97%;准确度回收率在86%~102%,重复性RSD≤6%;中间精密度良好,加标样品RSD≤4%;最低定量限为8000 pU/μL;最低检出限为100 pU/test;耐用性良好,RSD≤8%,回收率89%~105%;通过指示细胞培养法接种的三类样品(CAR-T细胞终产品样品、慢病毒载体生产终末细胞样品、慢病毒载体未加工收获液)及其病毒感染加标样品,在感染终末阶段收样后使用本方法进行逆转录酶活性检测的结果显示,三类样品均未检出复制型慢病毒,而病毒感染加标组样品均可检出病毒,方法适用性良好。结论建立了稳定可靠的基于逆转录酶活性的复制型慢病毒检测方法,各项方法学验证结果均达满意要求,且方法适用于指示细胞培养法终末阶段收样的检测,为基因治疗产品临床应用的安全性研究提供技术支撑。

关键词： 中华文明   翻译传播   瓶颈破解   受众期待   精神交往  

摘要： 立足中华文明翻译传播“走出去”但“走不进去”的现状,采用逆向思维模式,设计调查问卷和访谈问题,开展调查研究,从目标受众视角看中华文明翻译传播的瓶颈,了解国外受众对中华文明翻译传播的期待和诉求,从翻译传播内容的凝练、译介语言的选用、传播方式的采用、传播载体的选择四个方面,分析翻译传播陷入瓶颈的原因,提出破解瓶颈的对策,为中华文明翻译传播研究提供新视角,为翻译传播实践提供可靠的参考依据,以期有效提高国际传播的效能。

关键词： 自噬   自噬受体   病毒感染  

摘要： 自噬(autophagy)作为高度保守且依赖溶酶体的细胞内分解代谢过程,在维持细胞稳态和适应各种细胞应激中起着重要作用。自噬受体(autophagy receptor)参与的自噬则使其更具选择性、有效性地对细胞中的蛋白质聚集体和功能失调或冗余的细胞器,尤其是侵入细胞的病原体等进行识别降解,以维持机体稳态;某些病毒亦能拮抗或裹挟自噬受体,利用自噬这一途径靶向降解宿主蛋白,从而增加自身的感染。本文主要综述自噬受体的结构功能,探讨自噬受体调控病毒感染宿主的作用,为相关病毒性疾病的发展和寻找特定抗病毒治疗的靶标提供参考。

关键词： 人参外泌体   肿瘤相关巨噬细胞   人非小细胞肺癌细胞   细胞周期   细胞凋亡  

摘要： 目的:旨在探讨人参外泌体(Ginseng-derived nanoparticles,GDNPs)通过改变巨噬细胞极化状态,抑制人非小细胞肺癌细胞(A549)生长的分子机制,为人参鲜药的深入研究提供一定的理论基础。方法:采用CCK-8法检测人参外泌体对巨噬细胞(RAW264.7)活力的影响;实时定量PCR检测人参外泌体刺激巨噬细胞M1极化相关指标IL-6、iNOS、TNF-α、MCP-1转录水平;流式细胞术检测M1型巨噬细胞分子标志CD80的表达。收集LPS和人参外泌体处理的RAW264.7细胞衍生的上清液,制成条件培养基(CM),并与A549共培养。CCK8和流式细胞术检测A549细胞活力、细胞周期和细胞凋亡;采用Western blot检测GDNPs-CM对A549细胞中TLR4/MyD88通路相关蛋白表达的影响。结果:人参外泌体能够增强巨噬细胞的细胞活力(P<0.05,P<0.01),并提高巨噬细胞M1极化相关指标IL-6、iNOS、TNF-α、MCP-1转录水平的表达(P<0.05,P<0.01,P<0.0001);人参外泌体增强了M1型巨噬细胞分子标志CD80的表达(P<0.01)。在条件培养基作用下,A549细胞的细胞活力受到抑制,并发生G1期阻滞,A549细胞的凋亡率提高(P<0.05,P<0.01);同时,GDNPs-CM促进了A549细胞中TLR4、MyD88、NF-κB、iNOS、COX-2等炎症相关蛋白表达量(P<0.05,P<0.01)。结论:人参外泌体通过刺激巨噬细胞M1极化,抑制A549细胞增殖,调节A549细胞周期,激活TLR4/MyD88/NF-κB信号通路提高炎症因子的表达水平,从而诱导肺癌细胞凋亡。

关键词： 新型冠状病毒感染   维生素C   甘草酸   网络药理学   作用机制  

摘要： 基于网络药理学技术,探索维生素C(VC)和甘草酸(GA)联合防治新型冠状病毒感染(COVID-19)的作用机制.通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、SuperPred、SEA Search Server(SEA)、DrugBank、Comparative Toxicogenomics Database(CTD)和SwissTargetPrediction数据库综合相关文献获得VC和GA功能靶标,以及Genecards等数据库获取COVID-19治疗靶点;构建“药物-疾病-靶点”网络,并进行基因本体论(GO)富集分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析和蛋白互作网络分析(PPI);运用Autodock Vina软件进行分子对接.筛选出VC功能靶标667个、GA功能靶标154个、COVID-19靶点1 586个,VC与GA共有45个靶标与COVID-19致病靶点相关.关键靶点包括ALB、MAPK3、EGFR、IL2、MAPK1和CTLA4等. GO分析显示靶点富集于肽基丝氨酸磷酸化、蛋白结合等生物过程,KEGG分析提示靶点主要作用于5-羟色胺能突触通路.分子对接表明,VC和GA与SARS-CoV-2 3CL水解酶、ACE2等靶点具有较强结合能力.研究表明,VC和GA可能通过调节免疫系统的激活,在COVID-19预防和治疗中发挥协同作用.

关键词： 浓香型白酒   发酵后期   微生物群落   高通量测序  

摘要： 本研究以发酵后期的浓香型白酒为研究对象,采用高通量测序技术分析微生物群落结构动态变化特征,结合理化指标和风味物质测定,探究微生物群落与酒质形成的关系。结果表明,发酵后期的优势菌群主要包括乳酸菌属、酿酒酵母属和芽孢杆菌属,其相对丰度随发酵进程呈现显著变化。微生物群落结构与风味物质具有显著相关性,可解释白酒风味特征变异的82.3%。本次研究结果可为深入了解白酒发酵机理和提升白酒品质提供科学依据。

关键词： 人类乳头瘤病毒   免疫逃逸   微生物组   益生菌   抗病毒机制  

摘要： 人类乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染是全球重大的健康挑战,与宫颈癌等疾病密切相关。目前暂无有效的HPV治疗手段,因此需要开发新型的抗病毒生物制剂以减少HPV感染的危害。最近多项研究揭示了HPV感染与人体微生物组之间的复杂关系,提示HPV感染会破坏微生物组的平衡,导致菌群失调,继而引起机体免疫功能的障碍。近年来,研究发现口服或外用特定的益生菌菌株可降低患者HPV滴度、预防病毒感染相关癌症,是具有开发价值的新型抗HPV制剂。本文从HPV的分子生物学特征出发,系统阐述了HPV感染的致病机制,并从抑制病毒复制、免疫调控、增强黏膜屏障功能及重塑微生态4个角度总结现有抗HPV益生菌的作用机制,为抗HPV益生菌的高效选育及机制解析提供理论参考。

关键词： 肝功能障碍   多器官衰竭   失血性休克   肝切除术   未折叠蛋白反应   脑缺血再灌注损伤   肝移植   细胞凋亡  

摘要： 肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)是肝切除术、肝移植和失血性休克中常见的临床问题。持续的HIRI可导致严重的肝功能障碍和全身炎症反应综合征,最终引发多器官衰竭甚至死亡。然而,其分子机制尚未完全阐明。GRINA是一种定位于内质网膜的钙稳态调节蛋白,在脑、肝脏及肾脏中均有较高表达。既往研究表明,GRINA通过调节未折叠蛋白反应发挥抗凋亡作用,并在脑缺血再灌注损伤中发挥关键调控功能。

关键词： 批判性思维能力   循证思维   客观评估   课堂教学   教学实践   实际教学   评价证据   结构和功能  

摘要： 循证思维的核心在于系统地收集、分析和评估证据,形成合理的结论,这种思维方式要求人们能够学会精准发现并使用高质量的证据,灵活运用批判性思维能力对所获取的信息进行客观评估。本文基于获取证据、审视证据、评价证据这三个环节,从实际教学出发,以“细胞核的结构和功能”具体教学知识点为基础,详细探讨了如何运用课堂教学培养学生的循证思维。