关键词:
心肌细胞
肥大
细胞凋亡
BHLHE41
大鼠
摘要:
目的探究基本螺旋-环-螺旋家族成员e41(basic helix-loop-helix family member e41,BHLHE41)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)刺激下的H9C2大鼠心肌细胞肥大和凋亡的影响。方法为探讨AngⅡ刺激下的BHLHE41的表达水平,将细胞分为两组,即正常组和AngⅡ组。为了探究沉默BHLHE41(silencing BHLHE41,siBHLHE41)对心肌细胞肥大与凋亡的影响,将心肌细胞分为4组,即空白组[转染小干扰RNA(siRNA)+磷酸盐缓冲盐水(phosphate buffered saline,PBS)]、siBHLHE41组(转染siBHLHE41+PBS)、模型组(转染siRNA+AngⅡ)和实验组(转染siBHLHE41+AngⅡ)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测BHLHE41、β-肌球蛋白重链(β-myosin heavy chain,β-MHC)、心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、B型钠尿肽(B-type natriuretic peptide,BNP)、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)、B淋巴细胞瘤2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)和p53的mRNA表达水平。采用Western blot法检测BHLHE41、Bax、Bcl-2、PARP及p53的蛋白表达水平。鬼笔环肽染色观察心肌细胞表面积,原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法(terminal deoxynucleotidyl trann sferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling,TUNEL)观察心肌细胞凋亡情况。结果与正常组比较,AngⅡ组BHLHE41mRNA水平及蛋白表达水平均升高。与空白组比较,模型组β-MHC、ANP、BNP mRNA表达水平上调,PARP、Bax、p53蛋白和mRNA表达水平明显升高,Bcl-2蛋白及mRNA表达水平明显降低,心肌细胞表面积明显增大,心肌细胞凋亡率显著升高(P<0.05);与模型组比较,实验组β-MHC、ANP、BNP mRNA表达水平上升,PARP、Bax、p53蛋白和mRNA表达水平明显升高,Bcl-2蛋白及mRNA表达水平明显降低,心肌细胞表面积增大,心肌细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。结论沉默BHLHE41可以加重AngⅡ诱导的H9C2心肌细胞肥大与凋亡,这可能与凋亡相关信号通路p53激活有关。