关键词:
功能性消化不良
肝郁脾虚证
舒胃汤
线粒体自噬
细胞凋亡
Cajal间质细胞
摘要:
目的观察舒胃汤对功能性消化不良(FD)肝郁脾虚证大鼠Cajal间质细胞(ICC)钙稳态、氧化应激、线粒体自噬和细胞凋亡的影响,探讨其治疗FD的作用机制。方法将50只SD大鼠随机分为空白组、模型组和舒胃汤低、中、高剂量组(3.78、7.56、15.34 g/kg),每组10只。采用改良复合病因法建立FD肝郁脾虚证大鼠模型,并对舒胃汤低、中、高剂量组大鼠灌胃给药14 d。取胃窦,分离并培养原代ICC,采用Fluo-4 AM、Rhod-2 AM染色分别检测ICC细胞质和线粒体钙离子积累,DCFH-DA、MitoSox Red分别检测ICC细胞质和线粒体活性氧(ROS)含量,免疫荧光染色、流式细胞术分别检测ICC线粒体自噬和凋亡情况,Western blot检测ICC线粒体LC3和电压依赖性阴离子通道(VDAC)1蛋白表达。结果与空白组比较,模型组ICC细胞质和线粒体钙离子、ROS积累均显著增多(P<0.01),TOMM20与LAMP2共表达显著升高(P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.01),线粒体LC3Ⅱ/Ⅰ、VDAC1蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,舒胃汤中、高剂量组ICC细胞质和线粒体钙离子、ROS积累均显著降低(P<0.05,P<0.01),TOMM20与LAMP2共表达显著降低(P<0.01),细胞凋亡率显著降低(P<0.01),线粒体LC3Ⅱ/Ⅰ、VDAC1蛋白表达显著降低(P<0.01)结论舒胃汤可能通过降低线粒体钙离子负荷、减少ROS积累及线粒体过度自噬,抑制ICC细胞凋亡,恢复ICC功能,达到治疗FD肝郁脾虚证的目的。