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关键词： 煤矿井下   微生物群落   水化学成分   环境响应   生物地球化学作用  

摘要： 为探究煤矿井下不同环境区域的微生物群落特征及其对环境因子的响应,以安徽淮南谢桥煤矿为研究对象,在涉及矿井水来源、形成和汇集全过程的8个井下区域(井筒、岩巷、煤巷、采煤工作面、采空区、水仓、砂岩水出水点和灰岩水疏放点)中采集了24份水样,进行水化学成分和微生物16S rRNA基因高通量测序检测,并利用多元统计等方法进行序列数据处理。结果表明:①井筒水的水化学类型为Cl-Na·Ca型,砂岩水和采空区为HCO_(3)·Cl-Na型,其余区域均为Cl-Na型。在不同环境区域水体中,Na^(+)、Cl^(−)、SO_(4)^(2-)、HCO_(3)^(-)、NO_(2)^(-)、NO_(3)^(-)和Fe含量存在显著变化。②井下水仓水中微生物的丰富度和多样性最高,而岩巷水中最低。24个样本共检测到55个菌门和621个菌属,其中Pseudomonadota、Bacteroidota和Nitrospinota为优势菌门,Hydrogenophaga和Pseudomonas为优势菌属。Pseudomonadota在岩巷水中丰度最高,在灰岩水中丰度最低;Bacteroidota在水仓水中丰度最高,在岩巷水中丰度最低;Nitrospinota在灰岩水中丰度最高,在岩巷水中丰度最低。Hydrogenophaga在各区域水体中的丰度均较高,Pseudomonas主要分布在岩巷水中。③该煤矿井下微生物群落结构和分布受pH影响最强,其次还与营养元素(如C、N和S)、Temp、DO、ORP、Fe、Mn和Sb等氧化还原敏感物质有关。④FAPROTAX分析显示,该煤矿井下微生物群落普遍具有化学异养和需氧化学异养的功能。不同环境区域水体中的微生物群落表现出多样的生态功能,涵盖了从基本的代谢活动(如物质循环和能量转换)到复杂的环境修复过程(如污染物降解和水质改善)。这些功能不仅维持了煤矿井下水体的生态平衡,还在生态系统的调节和修复中发挥了重要作用。

关键词： 猪瘟病毒   E2蛋白   E^(rns)蛋白   串联表达   ELISA  

摘要： 本研究利用原核系统表达了猪瘟病毒(CSFV)E^(rns)和E2串联蛋白,通过切胶纯化的方法得到高纯度的目的蛋白作为包被抗原,经过各反应条件的优化初步建立ELISA方法,并对方法的特异性、敏感性和重复性进行检验,与商品化试剂盒以及IFA试验进行平行比较,评估方法的准确性。结果表明建立了一种特异性强、敏感性好、准确率高且适用于临床猪瘟抗体检测的间接ELISA方法。

关键词： 金刚石   硫化物包裹体   Re-Os定年   非质量分馏S同位素   古老地壳物质再循环   板块构造  

摘要： 地球早期演化及古老地壳物质再循环是地球科学领域研究的热点和难点问题之一。研究该科学问题的关键在于能否找到直接的物质记录。而形成于新太古代到中生代,主要分布于克拉通岩石圈地幔(可以延伸到过渡带甚至下地幔)的金刚石具有生长时间跨度长,分布范围广的特点。金刚石及其生长过程中所捕获的地幔矿物成为其最理想的研究载体。其中,金刚石生长过程中捕获的俯冲沉积硫化物和地幔原始硫化物,为与金刚石形成有关的克拉通早期形成与演化过程以及超大陆旋回背景下的俯冲事件提供了来自年代学及同位素地球化学的独特指示。近二十年来的研究表明:①硫化物包裹体主要有地幔原生来源和古老壳源俯冲物质来源两大类;②硫化物包裹体的Re-Os等时线年龄限定了金刚石的形成时代,大量定年工作为早期板块构造的启动时间提供了关键性证据;③硫化物包裹体的非质量分馏S同位素(MIF-S)记录了大氧化事件发生前贫氧大气环境下的壳源沉积硫化物信号,为建立地球早期硫循环模型和板块构造过程提供了重要依据。此外,本文在综合分析国际金刚石硫化物包裹体研究成果的基础上,提出了当前研究仍存在的问题以及对我国金刚石硫化物包裹体研究的思考。

关键词： 森林抚育   植被恢复   生态平衡   生物多样性   生态系统  

摘要： 森林抚育通过科学的管理措施,在植被恢复和生态平衡维护中发挥了重要作用。通过调节森林植被结构和优化生态系统功能,森林抚育能够促进物种多样性的恢复,改善森林的生长环境,并为退化生态系统的修复提供有效路径。此外,该实践还能通过调节地方气候及水文循环、保护生物多样性以及提升生态系统抵御外部干扰的能力来进一步加强生态系统的稳定性。基于实际操作和理论研究的支持,森林抚育展现了其在修复生态功能及增强生态服务价值方面的显著成果。研究表明,森林抚育技术为实现森林的可持续发展和生态系统健康提供了可行的解决方案。

关键词： 流域综合治理   绿色低碳发展   四化同步发展   百姓富   院士专家   生态系统   美丽中国建设   先行实践  

摘要： 湖北深入践行习近平生态文明思想,全面推进以流域综合治理为基础的四化同步发展,近年来绿色低碳发展迈出坚实步伐,生态系统实现整体性优化,“生态美、产业兴、百姓富”荆楚蝶变,“水清岸绿、江豚逐浪”美景再现,美丽中国建设卓有成效。2024年5月25日,美丽中国百人论坛2024年会在武汉举行,300多位院士专家围绕流域综合治理为美丽中国建设及湖北先行实践建言献策。

关键词： 参芪抑毒养肺汤   重症肺炎   放射免疫分析法   流式细胞术   IL-6   TNF-α   炎症   疗效  

摘要： 目的本研究通过随机对照试验,明确评估参芪抑毒养肺汤在西医治疗基础上对病毒性重症肺炎患者的治疗效果。方法选取2020年1月1日—2023年2月26日于某医院就诊的病毒型重症肺炎患者84例,按照随机数表法分成西医治疗组和中西医结合治疗组,各42例。采用放射免疫分析法检测血清IL-6、IL-8、IL-2受体、TNF-α和超敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)含量;流式细胞术测定外周血淋巴细胞亚群CD4^(+)T淋巴细胞计数、CD8^(+)T淋巴细胞计数;使用全自动血液流变仪测量白细胞(WBC)计数、中性粒细胞(neutrophil,N)计数和淋巴细胞(lymphocyte,L)计数。结果中西医结合治疗组IL-6和TNF-α水平低于西医治疗组,差异有统计学意义(t=-2.486、2.187,P<0.05);两组患者的CD4^(+)T淋巴细胞和CD8^(+)T淋巴细胞计数,差异无统计学意义(t=0.344、0.462,P>0.05);两组患者中WBC(治疗前WBC、治疗后WBC、δ-WBC)计数、L(治疗前L、治疗后L、δ-L)计数、IL-8、IL-2R、hs-CRP水平比较,差异无统计学意义(t=-1.138、-0.945、-1.652、-0.542、-0.012、0、0、0.832、1.023,P>0.05)。结论参芪抑毒养肺汤可降低病毒性重症肺炎患者体内炎症因子水平,提高整体治疗效果。

关键词： 流感病毒   流感疫苗   MDCK细胞   病毒灭活  

摘要： 目的筛选流感病毒在MDCK细胞上的灭活验证方法,并应用于流感病毒灭活前后样品的检测,以期为流感疫苗质量检测提供可靠的方法。方法将适应MDCK细胞的B/Yamagata(BY)、B/Victoria(BV)、H1N1、H3N24种型别的流感病毒分别稀释为10、1、0.1、0.01、0.001、0.0001 lgCCID50/mL后,接种于MDCK细胞,分别采用换液法(吸附1.5 h后弃掉病毒培养液,再加入病毒培养液,每3 d传代1次,共传3代)、补液法(吸附1.5 h后直接补加病毒培养液,每3 d传代1次,共传3代)及《欧洲药典》法(每4 d传代1次,共传3代)培养,每天观察细胞病变(cytopathic effect,CPE)情况,收获各代次病毒液,检测血凝素(hemagglutinin,HA)滴度,确定最佳灭活验证方法。采用最佳灭活验证方法检测流感病毒灭活前后样品。结果换液法和补液法均可在0.1~1 lgCCID50/mL滴度范围内检测到流感病毒,《欧洲药典》法可在1~10 lgCCID50/mL滴度范围内检测到流感病毒,且补液法测得的HA滴度高于其他两种方法,因此,确定补液法为最佳灭活验证方法。采用补液法检测流感病毒灭活前样品均为阳性,灭活后样品均为阴性。结论补液法是流感病毒在MDCK细胞上的最佳灭活验证方法,可用于流感疫苗质量的检测。

关键词： 水稻草状矮化病毒   外壳蛋白   载体构建   酵母双杂交   亚细胞定位   双分子荧光互补   蛋白互作  

摘要： 【目的】明确水稻草状矮化病毒(Rice grassy stunt virus,RGSV)外壳蛋白CP的自身互作,为揭示CP蛋白在RGSV侵染中的功能提供理论依据。【方法】利用酵母双杂交(Y2H)技术鉴定RGSV CP与CP蛋白之间的互作。提取感染RGSV水稻叶片的总RNA,通过RT-PCR扩增得到CP基因。将CP基因分别构建到酵母表达载体pGBKT7和pGADT7上,利用菌液PCR鉴定阳性克隆。将酵母质粒组合pGBKT7-CP/pGADT7、pGBKT7-CP/pGADT7-CP、阳性对照pGADT7-T/pGBKT7-53、阴性对照pGADT7-T/pGBKT7-Lam分别转化到酵母感受态细胞Y2HGold中,先后涂布于缺陷型培养基SD/-Leu/-Trp和SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-gal上。通过观察酵母细胞在缺陷培养基上的生长和显色情况鉴定CP蛋白的毒性、自激活活性和自身互作关系。利用亚细胞定位和双分子荧光互补(BiFC)鉴定CP在本氏烟中的定位及互作。将CP构建到植物瞬时表达载体pEarleyGate101(101)、pEarleyGate202-YN(YN)、pEarleyGate202-YC(YC)上,并利用菌液PCR鉴定阳性克隆。将阳性克隆101-CP、YN-CP、YC-CP、空载体YN、YC分别转化到农杆菌GV3101中。将含阳性质粒101-CP的农杆菌单独注射本氏烟叶片;将含阳性质粒YN-CP/YC-CP、阴性对照YN-CP/YC、YN/YC-CP的农杆菌共注射本氏烟叶片;利用激光共聚焦显微镜观察融合蛋白的发光和定位。【结果】RT-PCR扩增得到CP基因,其大小为978bp。成功构建酵母表达载体pGBKT7-CP和pGADT7-CP。含质粒pGBKT7-CP/pGADT7、pGBKT7-CP/pGADT7-CP、阳性对照和阴性对照的酵母菌均能在缺陷培养基SD/-Leu/-Trp平板上生长,且含质粒pGBKT7-CP/pGADT7的酵母菌的生长情况与对照一致,说明CP蛋白对酵母菌无毒性。但仅含质粒pGBKT7-CP/pGADT7-CP的酵母菌和阳性对照可在缺陷培养基SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-gal平板上生长并显色,表明CP蛋白无自激活活性,且CP蛋白在酵母细胞中能够自身互作。成功构建CP基因的植物表达载体;亚细胞定位结果显示,CP蛋白主要定位于本氏烟细胞的细胞核和细胞膜上。BiFC结果显示CP存在自身互作,且互作也定位于本氏烟细胞的细胞核和细胞膜。【结论】水稻草状矮化病是由水稻草状矮化病毒引起的,给粮食产量造成了严重威胁。RGSVCP是该病毒的外壳蛋白,可能在病毒复制、装配、侵染等过程中发挥着重要的作用。通过亚细胞定位、Y2H和BiFC鉴定了RGSVCP的定位和自身互作,为CP蛋白的功能研究提供参考,为解析RGSV的致病机制提供依据。

关键词： A型塞内卡   VP2蛋白   原核表达   多克隆抗体   竞争ELISA  

摘要： 依据A型塞内卡病毒(SVA)结构蛋白VP2基因序列构建原核表达质粒pET-30a-VP2,经转化和诱导,表达出VP2重组蛋白,纯化后免疫新西兰大白兔,采集血清获得VP2的多克隆抗体。用间接ELISA方法测定血清中VP2抗体效价,并用Western blot与IFA验证其特异性。随后建立竞争ELISA方法,并对实验室收集的2016-2019年广西11个地区64个规模猪场592份猪血清进行SVA抗体检测。结果显示,诱导表达出的重组VP2蛋白主要以可溶性形式表达,血清中VP2抗体效价大于1∶64000,且制备的VP2抗体能特异结合SVA感染细胞中的VP2蛋白。竞争ELISA检测结果显示广西地区猪场SVA血清阳性率高达76.6%,血清样品阳性率高达55.9%,研究结果为SVA的检测和研究奠定了基础。