课程文献中心 更多>>

关键词： 特异性引物   虫媒病毒   高分辨率熔解曲线  

摘要： 本文建立三种虫媒病毒(登革病毒、寨卡病毒、基孔肯雅病毒)高分辨率熔解曲线检测方法。分别针对三种虫媒病毒设计特异性引物,建立高分辨率熔解曲线检测方法,并对该方法的特异性、检测下限、重复性、符合率进行评价。建立的高分辨率熔解曲线检测方法,重复性良好,寨卡病毒的检测下限为1.0×10^(3)拷贝/mL,而登革病毒和基孔肯雅病毒的检测下限均为1.0×10^(2)拷贝/mL,能特异性地扩增这三种虫媒病毒,而对其他可致发热反应的病原体,包括甲型H1N1流感病毒、甲型H3N2流感病毒、乙型流感病毒、新型冠状病毒等无特异性扩增;盲样检测结果符合率达100%。本研究建立的高分辨率熔解曲线检测方法灵敏度高、特异性好、重复性好,可为这三种虫媒病毒检测提供可行的方法。

关键词： 景观服务   约束关系   绿色GDP   环境资源量   生态产业  

摘要： 生态系统服务从概念提出至今经历了50余年的研究历程,多学科、交叉学科和跨学科理论与方法的应用、旺盛的实践应用需求推动了生态系统服务研究向纵深和广域发展.总结与回顾了生态系统服务量化、生态系统服务维持机制和生态系统服务应用研究进展.建立了自然景观、半自然景观、农业景观和城市景观生态系统服务量化方法,提高了生态系统服务量化的精度,揭示了生态系统服务动态变化的驱动机制.提出了生态系统服务约束作用关系理论框架和方法,揭示了生态系统服务相互作用关系的依赖性、竞争性、独立性特征及其生态学机制.提出了集景观格局-生态过程/功能-生态系统服务-居民福祉于一体的土地利用优化策略方案,支撑了区域高质量发展政策制定.

关键词： 肠道病毒71型(EV71)   成簇规则间隔的短回文重复序列及其相关蛋白13d(CRISPR/Cas13d)   抗病毒活性   细胞毒性  

摘要： 肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)感染会导致手足口病和危及生命的神经系统疾病,目前尚无针对EV71的抗病毒药物可用。为了利用成簇规则间隔的短回文重复序列及其相关蛋白(clustered regularly interspaced short palindromic repeat/CRISPR-associated protein,CRISPR/Cas)系统抑制EV71感染,本研究选择CRISPR/Cas13d系统,构建U6启动子驱动的向导RNA(guide RNA,g RNA)、EF-1α启动子驱动的Cas13d和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的表达载体;将不同g RNA质粒分别转染人胚肾细胞293T(HEK293T)后感染EV71,通过实时荧光定量PCR检测EV71 VP1 m RNA的含量,采用Western-blot检测EV71 VP1蛋白的表达量,利用流式细胞术检测GFP蛋白的含量,运用CCK-8法检测细胞活力。结果显示,在5个靶向EV71基因组不同位置的g RNA质粒中,有4个可以显著抑制EV71 VP1 m RNA和蛋白质表达,其中1个质粒具有较强的旁切活性,但是所有的质粒均没有表现出显著的细胞毒性。实验结果初步表明,可以利用CRISPR/Cas13d系统抑制EV71感染,但是需要选择合适的g RNA,以保障抗病毒作用和避免细胞毒性。

关键词： 高级植物病毒学   案例教学   案例库   科研成果   植物病毒  

摘要： 专业学位研究生课程高级植物病毒学是植物病理学专业的核心课程之一,为进一步提高课程教学质量,培养高素质专业人才,该研究根据高级植物病毒学课程的教学要求,围绕课程的教学内容设立教学主题,通过查阅文献,搜集相关内容,并结合科研成果及科技前沿建设高级植物病毒学课程案例库。该研究按照“基础—应用—综合”层次递进,结合科研成果构建课程案例库。在教学过程中,将所构建的案例教学法与课程内容紧密结合,将案例库中的案例适时融入高级植物病毒学课程的课堂教学中进行应用,并获得良好的课堂教学效果。该课程案例库的建设以及应用为专业学位研究生其他课程的教学方法提供参考和借鉴。

关键词： EB病毒   鼻咽癌   酶联免疫吸附试验  

摘要： 回顾性分析EB病毒抗体[R反式激活因子(Rta)-IgG、早期抗原(EA)-IgA和病毒衣壳抗原(VCA)-IgA]在柳州地区体检人群中的分布规律,为鼻咽癌的早期筛查、预防和诊治提供理论依据。方法 选取2023年在柳州市人民医院健康管理中心进行以上3种EBV 抗体联合检测的体检者共8899 名,用酶联免疫吸附试验进行测定,用统计学软件(SPSS26.0版本)进行分析。结果 8899例体检者中,这三种抗体单项阳性率从高到底分别是 EA-IgA(3.90%)、Rta-IgA(2.29%)、VCA-IgA(1.72%),有显著性统计学意义(P=0.000)。不同性别间,男性VCA-IgA阳性率(2.03%)高于女性(1.45%),EA-IgA阳性率(3.25%)低于女性(4.47%),均有统计学意义(P=0.033,P=0.003)。不同年龄组的Rta-IgG、VCA-IgA、EA-IgA阳性率差异均有统计学意义(P=0.001,P=0.046,P=0.032),Rta-IgG、EA-IgA阳性率整体上随着年纪的增加而升高,>70岁体检者Rta-IgG、VCA-IgA、EA-IgA阳性率均最高,分别是8.04%、3.25%、9.82%。结论 3种EBV抗体的阳性率与性别和年龄都有一定的关系,3种抗体在>70岁年龄段中阳性检出率均最高,患鼻咽癌的风险更高,应加大健康人群特别老年人的筛查力度,做好EBV相关疾病特别鼻咽癌早期筛查及防治工作。

关键词： KHV   RAA   锦鲤疱疹病毒   重组酶介导等温扩增   快速检测方法  

摘要： 为建立一种快速、灵敏且适用于现场即时检验(POCT)锦鲤疱疹病毒(KHV)的方法,本研究根据KHVTK基因的保守序列,遵循荧光RAA引物及探针设计原则,设计多套KHV特异性引物及1条探针,通过试验筛选出最佳引物对,建立了KHV的重组酶介导等温扩增(RAA)荧光检测方法,并对该方法进行敏感性、特异性、重复性及临床样本测试。结果显示,本方法最低检测限为7.01×10^(2) copies/μL,与WOAH推荐的TK基因PCR检测方法一致(同为7.01×10^(2) copies/μL),高于Sph基因PCR检测方法(7.01×10^(3) copies/μL),低于KHV real-time PCR检测方法(7.01×10^(1) copies/μL)。RAA荧光方法特异性良好,与鲤春病毒血症病毒(SVCV)、真鲷虹彩病毒(RSIV)、金鱼造血器官坏死病毒(CyHV-2)、鳗鲡疱疹病毒(AngHV-1)、病毒性神经坏死病毒(VNNV)均无交叉反应,临床样本检测结果与WOAH推荐的两种检测方法结果一致,且仅需20 min。结果表明,锦鲤疱疹病毒RAA荧光检测方法具有简单快捷、敏感性高、特异性好等优点,可为实验室条件有限的养殖场及海关监管现场的快速病原筛查提供有效的技术手段,满足生产一线的疫病监测需求。

关键词： 心脑血管疾病   康复治疗   细胞治疗   基因治疗   机器人辅助  

摘要： 心脏疾病是世界范围内最突出的健康难题之一,其常规治疗方法包括药物疗法,康复训练及心理辅导等,然而随着科技的不断进步,新兴技术,如生物细胞治疗、基因修复疗法和机器人辅助,正在逐渐提高康复效果和疗效。干细胞技术研究和组织工程学技术在心脏和血管的修复和再生功能方面具有不可替代的重要性,而且基因编辑学技术也因此给个体化医疗方案带来了很大的潜力,下一步,康复训练及远程监控系统将有助于提高康复效果,提升病人生活品质。

关键词： 税收优惠   技术水平   支持力度   病毒性传染病   饲料配方   生猪养殖   饲养密度   疾病防控  

摘要： 随着我国政府对农业产业支持力度的不断增强,出台的扶持政策为生猪养殖企业提供了更多资金支持和税收优惠,鼓励企业加大投入,提升养殖规模和技术水平。在生猪养殖过程中,环境控制、饲料配方和疾病防控等方面取得了显著的技术创新,生猪养殖数量逐渐增加,推动了养殖业向规模化、集约化和智能化方向发展。然而,尽管猪的规模化、集约化养殖带来了许多便利,但也存在养殖空间有限、饲养密度较大、运动不足等问题,导致猪只抵抗力下降,容易引发细菌性和病毒性传染病。

关键词： 自身免疫性胶质纤维酸性蛋白星形胶质细胞病   人类疱疹病毒   胶质纤维酸性蛋白  

摘要： 目的 分析人类疱疹病毒(HHV)感染后继发自身免疫性胶质纤维酸性蛋白(GFAP)星形胶质细胞病(GFAP-A)患者的临床资料,探讨其临床特征及预后。方法 2021年4月—2024年4月河南省人民医院诊治HHV感染后继发GFAP-A患者20例,分析其临床特征、实验室和影像学检查结果及治疗转归。结果 20例患者中HHV感染后7 d内出现症状8例,感染后2周内出现症状12例;有HHV 4型感染史14例,单纯疱疹病毒感染史3例,水痘-带状疱疹病毒感染史3例;临床表现主要为发热12例,头痛10例,肢体无力或麻木8例,恶心呕吐6例;脑脊髓炎9例,脑膜脑炎3例,软脊膜炎2例,未见明显异常6例。13例行头颅MRI平扫,脑白质T_(2)高信号9例,合并老年性脑萎缩10例;10例行头颅MRI增强扫描,软脑膜强化4例,双侧大脑半球多发线样强化5例,未见明显异常1例;12例行全脊髓MRI平扫,颈胸髓内及脊膜多发异常强化5例,颈胸腰脊膜多发异常强化4例,颈胸髓内散在异常强化灶4例;10例行全脊髓MRI增强扫描,软脊膜受累4例,未见明显异常6例。20例脑脊液GFAP抗体均为阳性,脑脊液压力升高10例,部分患者脑脊液白细胞计数及蛋白、乳酸、白细胞介素-6、免疫球蛋白水平升高,氯化物、葡萄糖水平降低;部分患者血钾、血钠、血尿酸水平降低,血清降钙素原、C反应蛋白、白细胞介素-6、白细胞介素-8、白细胞介素-10、干扰素-α水平升高;10例行风湿免疫相关抗体检测,抗核抗体阳性3例,抗SSA抗体阳性2例。20例患者经糖皮质激素治疗后,10例临床症状较前明显减轻,1例有视力障碍,2例有单侧肢体运动障碍;6例无明显症状,1例失访。结论 HHV感染后继发GFAP-A的发病时间和临床表现有个体差异,临床症状以发热、头痛和肢体麻木无力为主;MRI和脑脊液GFAP抗体检测有助于早期诊断,糖皮质激素治疗效果较好,患者预后良好。

关键词： 猫传染性腹膜炎病毒   N蛋白   单克隆抗体   竞争ELISA  

摘要： 为建立抗猫传染性腹膜炎病毒(feline infectious peritonitis virus,FIPV)抗体竞争ELISA检测方法,应用原核表达FIPV截短N蛋白[rFIPV N(aa17-172)]免疫BALB/c小鼠,经细胞融合和间接ELISA方法筛选能稳定分泌针对重组N蛋白(17-172 aa)的杂交瘤细胞株,制备腹水并进行纯化和鉴定。以重组N蛋白为抗原,纯化后的单克隆抗体为一抗建立抗体竞争ELISA方法。试验结果显示,纯化后重组N蛋白浓度为0.5 mg/mL,纯度大于85%,将其作为包被抗原,通过间接ELISA筛选出3株单克隆杂交瘤细胞株,命名为5C5、1F8和4A10。纯化的3株单克隆抗体效价均高于1∶102400。间接免疫荧光试验结果显示,3株单克隆抗体均能与FIPV发生特异性反应。抗体竞争ELISA方法最佳包被抗原浓度为1.25μg/mL,最佳抗体工作浓度为1∶128000。通过检测本实验室保存的94份FIPV阴性血清,确定本研究建立的抗体竞争ELISA方法阳性阻断率≥20.1%,阴性阻断率≤15.9%。对62份猫血清和本实验室前期建立的FIPV抗S蛋白的抗体竞争ELISA方法进行符合率比较,两种方法符合率为85.5%。本研究建立的抗N蛋白抗体竞争ELISA方法可用于FIPV抗体的检测,为FIP诊断提供了技术支撑。