课程文献中心 更多>>

关键词： 流感病毒疫苗   MDCK工程细胞   高效生产  

摘要： 目的：MDCK-STAT1-KO工程细胞已被证实可高效生产H1N1流感病毒，但受限于培养规模和血清依赖性等贴壁培养固有的性质，该细胞株难以应用到实际的疫苗生产中。单细胞悬浮培养易于放大，操作简便，备受疫苗生产青睐。但MDCK-STAT1-KO工程细胞在悬浮培养条件下的病毒生产情况及其病毒感染应激特征尚不清楚，限制了其进一步的应用。方法：采用生产上的常规培养方式（传代培养和批式培养）和接毒条件（MOI=0.001），考察悬浮MDCK-STAT1-KO工程细胞(susMDCK-STAT1-)的生长和病毒生产情况；改变关键接毒参数，考察MOI、营养条件和毒株类型对susMDCK-STAT1-细胞产毒的影响。设置同步感染实验，考察该细胞在病毒感染后的细胞凋亡水平和细胞免疫应激水平。结果：susMDCK-STAT1-细胞生产H1N1病毒的最大HA滴度和最大Svy分别为（12.40 ± 0.11）log2HAU/100μl和（15.86 ± 1.34）×103virions/cell，均为H1N1病毒生产较高水平。同时改变关键工艺参数均不会影响该细胞株高效生产流感病毒的特性。此外，susMDCK-STAT1-细胞具有一定抗凋亡特性，及其胞内全局性的低免疫防御水平，有利于病毒快速扩增。结论：susMDCK-STAT1-细胞可高效生产流感病毒，同时其抗凋亡特性及胞内低免疫水平是该细胞株高效生产的关键因素。该细胞有望未来应用于流感病毒疫苗的实际生产中，提高流感病毒生产水平。

关键词： 风景园林   生态系统服务   生态系统文化服务   生态系统文化效益   人类福祉  

摘要： 生态系统文化效益是推动自然资源管理、土地利用决策和生态系统保护的重要潜在动力之一。然而，由于文化效益的主观性和无形性，使其难以界定和量化，在管理决策中常被忽视。为此，通过定性文献综述的方法，对文化效益的概念、评价指标与方法进行深入分析。结果表明：1)文化效益指“人们在与自然互动的过程中所获得的非物质福祉提升”，强调“交互”及“非物质”的特性；2)文化效益的评估指标包含英国国家生态系统评估界定的“认同建构”“身心体验”及“能力提升”3个维度的狭义指标，也涵盖了一些未使用“文化效益”概念但围绕非物质效益评价的广义指标，如地方感、场所依恋和注意力恢复等；3)文化效益的评估方法方面，当前研究主要分为主观和客观2类。主观评估方法中，社交媒体大数据分析的显示偏好法，与公众参与地理信息系统联合李克特量表的陈述偏好法是目前采用的主流方法。系统梳理了“文化效益”在中文语境下的内涵与外延，能够为土地决策和自然管理中文化效益的评估实践提供理论基础和方法参考。

关键词： 间充质干细胞   成药性   异质性   质量表征  

摘要： 人间充质干细胞因具有来源广泛、无伦理限制、免疫豁免等优势和治疗潜力，成为细胞类产品开发的热点方向，但真正成药过程中存在诸多挑战。基于当下中国监管法规框架，在药品研发和审评方面，间充质干细胞治疗产品从“干细胞移植技术”向“干细胞治疗药品”转化中面临许多问题，特别是来源异质性、差异化生产工艺、质量表征等使研发和监管面临挑战。本文对其进行综述，提出相关建议和对策，以期促进此类产品的研发和申报。

关键词： 柴胡皂苷A   猪轮状病毒   中药   抗病毒  

摘要： 体外筛选对猪轮状病毒（PoRV）有抗病毒作用的中药活性成分，为抗PoRV药物开发和临床防控提供理论依据。从6种中药活性成分中筛选到具有潜在抗PoRV作用的柴胡皂苷A（SSA），采用CCK8方法筛选了SSA在IPEC-J2细胞上药物安全浓度，然后用不同浓度的SSA处理PoRV感染的细胞，通过荧光定量PCR、TCID50及Western-blot实验技术分析SSA对PoRV（NJ2012株，G9P[7]型）增殖的影响；接着从病毒的吸附、入侵、复制及释放等阶段，分析了SSA对PoRV复制阶段的影响；最后通过荧光定量PCR和TCID50实验分析了SSA对不同基因型PoRV（G9P[23]型、G1P[7]型和G4P[23]型）、猴源RV及牛源RV增殖的影响。结果显示，SSA在120 μg/mL浓度范围内对IPEC-J2细胞均无明显的毒性作用，SSA分别在20、40、80 μg/mL处理浓度下，对PoRV呈现剂量依赖性抗病毒作用；SSA在PoRV复制阶段发挥抗病毒作用，对病毒的吸附、入侵及释放阶段均无明显影响；SSA对不同基因型PoRV、猴源RV及牛源RV均具有不同程度的抗病毒作用。综上，本研究发现SSA具有较好的体外抑制PoRV增殖的作用，且作用于病毒的复制阶段，进一步研究发现SSA对其他不同种属和基因型的RV也具有一定抗病毒作用，初步表明SSA具有潜在的广谱抗RV作用。该研究为开发抗RV药物和临床防控PoRV感染流行提供了一定的理论指导。