关键词:
阿尔茨海默病
叉头框蛋白O3a
去整合素金属蛋白酶10
凋亡
SH-SY5Y
摘要:
目的 探讨抑制去整合素金属蛋白酶10(ADAM10)对阿尔茨海默病APPswe695细胞凋亡的影响及其作用机制.方法 使用1、5、10、20 μmol/L浓度的ADAM10抑制剂GI254023X处理APPswe695细胞,并设置PBS空白对照组及二甲基亚砜(DMSO)阴性对照组.采用Cell Counting Kit(CCK-8)法检测细胞活性,蛋白免疫印迹检测丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)/叉头框蛋白O3a(FOXO3a)信号通路和凋亡相关蛋白水平.结果 GI254023X组的Akt和FOXO3a的总蛋白表达量分别为(0.973 0±0.157 7)及(1.149 8±0.196 7),与PBS组、DMSO组相比,差异均无统计学意义(均P>0.05).p-FOXO3a(S253)/FOXO3a经10μmol/L GI254023X作用24 h后的比值为(0.866 7±0.075 8),PBS组与DMSO组的比值分别为(1.000 0±0.000 0)及(1.016 2±0.050 6),高于GI254023X组(P<0.05);p-Akt(S473)/Akt经10 μmol/L GI254023X作用24 h后的比值为(1.180 6±0.150 2),PBS组与DMSO组的比值分别为(1.000 0±0.000 0)及(0.893 2±0.041 3),低于GI254023X组(均P<0.05).GI254023X能够使抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤因子-2(Bcl-2)表达显著降低(P<0.05),促凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 9、促凋亡蛋白Bcl-2相关蛋白X表达均显著升高(P<0.05).结论 使用10 μmol/L的ADAM10抑制剂GI254023X处理APPswe695细胞能抑制其细胞活性,并通过Akt/FOXO3a信号通路诱导APPswe695细胞凋亡.