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关键词： 新型冠状病毒   流感病毒   联合疫苗   佐剂   体液免疫   细胞免疫  

摘要： 目的评价分别用Al(OH)3、MF59、AS03和QS21佐剂配伍的新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)和流感病毒联合疫苗在小鼠中的免疫原性。方法分别用Al(OH)3、MF59、AS03和QS21佐剂配制SARS-CoV-2(灭活)和四价流感病毒(裂解)联合疫苗,在第0、14天分别腹腔注射免疫BALB/c小鼠,第14、28天采血检测血清抗SARS-CoV-2抗体滴度和流感血凝抑制滴度,并在第28天分离脾脏淋巴细胞检测针对SARS-CoV-2和流感病毒的细胞免疫应答。结果不同佐剂的SARS-CoV-2和流感病毒联合疫苗均能诱导小鼠产生抗原特异性的抗体和细胞免疫应答。初次免疫后28 d,MF59佐剂组诱导了较高的抗SARS-CoV-2结合抗体和中和抗体,几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)分别为89144和5418;MF59佐剂组也诱导了较高的针对四价流感病毒(H1N1、H3N2、BV、BY)的血凝抑制抗体,GMT分别为4457、5120、1470和5881;MF59和AS03佐剂组诱导了较强的针对SARS-CoV-2的Th1型(IFN-γ、IL-2)细胞免疫应答,与正常对照组的斑点形成单位差异均有统计学意义(IFN-γ:H=16.69,P<0.01;IL-2:H=15.21,P<0.05);AS03佐剂组诱导了较强的针对H1N1、H3N2、BV、BY流感病毒的Th1型(IFN-γ、IL-2)细胞免疫应答,与正常对照组的斑点形成单位差异均有统计学意义(IFN-γ:H=12.93、12.17、11.82、13.61,P<0.05;IL-2:H=12.24、12.42、11.72、12.43,P<0.05)。结论不同佐剂配方的SARS-CoV-2和流感病毒联合疫苗的免疫原性及抗原特异性抗体和细胞免疫应答均不同,证明了联合疫苗配方研究中佐剂的重要性。

关键词： 无人水下航行器   任务分配   自适应智能优化算法   预前任务分配模型   实时在线分配模型   动态降维规则   局部最优   混沌自适应搜索策略  

摘要： 为满足多个无人水下航行器(unmanned underwater vehicle,UUV)协同执行任务需求,提出基于种群智能优化的UUV任务分配方法。通过对多UUV执行任务情境进行分析,构建任务属性模型与任务分配优化模型,建立相应的目标函数与约束条件,根据实时在线任务分配特点,提出在线任务分配原则。基于动态交换目标算法思想,构建相应的动态降维规则,确定目标函数与约束条件;融合布谷鸟搜索算法、人工蜂群算法和混沌自适应搜索策略,根据不同寻优状态,构建3种对应的搜索机制,形成新的种群自适应优化算法,适应UUV任务分配最优解求取特点。通过仿真可得,本文算法寻优较快,可有效避免陷入局部最优,同时协同任务分配模型可有效用于预前任务分配和UUV突发任务实时在线任务分配场景。

关键词： 全球变暖   梭梭(Haloxylon ammodendron)   光合作用   水分利用效率   蒸腾速率  

摘要： 随着全球变暖,气温持续升高,极端干旱气候水文事件频发,对全球(特别是干旱荒漠)地区生态系统造成不利影响。梭梭(Haloxylon ammodendron)具有极强的耐干旱高温的能力,在中国西北荒漠地区被广泛种植。探究不同林龄(5、10、20、30、40 a)梭梭光合生理和水分生理特征在极端高温下的适应策略,有助于预测梭梭未来在全球变暖(极端高温)条件下的生存境况。利用LI-6800F光合-荧光全自动测量系统测量梭梭温度光合响应曲线,依据IPCC发布的增温幅度,设置了25、27.5、30、32.5、35、37.5、40℃梯度模拟升温变化,分析不同林龄梭梭气体交换差异,利用1515D压力室仪器测量不同林龄梭梭同化枝水势。结果表明:(1)不同林龄梭梭同化枝水势有显著性差异,5~30 a梭梭水势随林龄增加而升高,40 a梭梭降低且略大于20 a梭梭。(2)随着温度升高,不同林龄梭梭光合特性有明显差异,5 a梭梭由于受到水分胁迫最严重,净光合速率(P_(n))最小,10 a梭梭P_(n)呈线性增加,20、30、40 a梭梭P_(n)较高且随温度升高波动较小。不同林龄梭梭在极端高温(35~40℃)P_(n)持续升高(10 a)、保持稳定(20、30 a)或下降(5、40 a)。(3)不同林龄梭梭水分生理特征也有较大差异,特别在极端高温时的差异性与植物生存发展有紧密联系。中龄(20 a)幼龄梭梭(5、10 a)采取的水分利用策略较为保守,在极端高温时,气孔导度(G_(s))、水分利用效率(WUE)、蒸腾速率(Tr)波动较小,且保持着较高的P_(n),对极端高温环境抗逆性强;老龄梭梭(30、40 a)则采取较为激进的水分利用策略,在极端高温时仍然不断提高Tr致使WUE不断降低,虽然能保持较高的P_(n),但是也可能导致树木生长受限,长此以往也可能导致树木的死亡。不同林龄梭梭在极端高温下的气体交换特征有着较大差异,对极端高温有着不同的适应策略,尤其老龄(30、40 a)梭梭的采取适应策略较为激进,未来在全球变化(特别在极端高温)情况下要重点监测老龄(30、40 a)梭梭种群。

关键词： CTAB   FMDV结构蛋白   DNA   内毒素   VLPs  

摘要： 为确定十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrimethyl ammonium bromide,CTAB)对大肠杆菌发酵菌泥重悬液的澄清效果及口蹄疫病毒样颗粒(foot-and-mouth disease virus-like particles,FMD VLPs)组装的影响,通过在破碎后的FMDV结构蛋白大肠杆菌发酵重悬液中加入CTAB,用核酸电泳和鲎试剂显色法分别检测DNA及内毒素含量的变化,确定CTAB对发酵菌泥重悬液的澄清效果,然后经His亲和层析凝胶法纯化目标蛋白,并将纯化蛋白在无细胞体系内组装成FMD VLPs,利用蔗糖密度梯度超速离心结合高效液相分析法对FMD VLPs进行定量分析。结果表明,加入CTAB,均质离心后上清中宿主DNA含量明显减少(P<0.01),纯化后收获目的蛋白浓度未出现明显变化(P>0.05),但收获蛋白的内毒素含量明显上升(P<0.01),重悬液上清及纯化蛋白Zeta电位绝对值明显降低(P<0.05),且FMD VLPs的组装量显著减少(P<0.05)。CTAB在一定盐浓度溶液中能够沉淀DNA,利于宿主DNA的去除,但同时会改变目标蛋白的带电属性,增强目标蛋白与内毒素的结合,并降低组装体系的稳定性,致使FMD VLPs的组装率显著下降。

关键词： 猪流行性腹泻病毒   卵黄抗体   竞争ELISA  

摘要： 为能够快速检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)特异性抗体水平并评估疫苗免疫效果,采用PEDV病毒液作为包被抗原,抗PEDV卵黄抗体(IgY)作为竞争抗体,通过方阵法确定反应的最优条件,建立一种抗PEDV的竞争性ELISA检测方法。实验优化结果表明最佳条件为:37℃孵育2 h后置于4℃过夜进行抗原包被;使用10 g/L BSA于37℃封闭2 h;血清稀释度为1∶5;竞争性一抗质量浓度为0.01 g/mL;二抗稀释度为1∶3000;血清、抗体均在37℃孵育30 min;TMD底物显色液在25℃避光反应15 min。设定阴阳性的临界值分别为阳性(PI)≥0.420,阴性(PI)<0.325后,在对30份血清样本进行标准化试剂盒与本研究方法的检测对比中,符合度为78.3%;该方法的批内和批间重复变异系数在1.1%~8.7%之间,均小于10%,证明其具有较好的重复性和可靠性。因此,该抗PEDVIgY竞争ELISA为PEDV感染的精准防控提供了一种有效工具。

关键词： RT-RAA   CRISPR/Cas13a   SVA  

摘要： 建立一种基于逆转录-重组酶聚合酶等温扩增(reverse transcription-recombinase polymerase amplification, RT-RAA)及CRISPR Cas13a技术检测猪A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)的快速检测方法。根据猪SVA保守基因序列设计8对RT-RAA引物,筛选最适扩增引物、最佳反应温度、最优RT-RAA反应体系。针对优化的RT-RAA体系设计并筛选最佳CRISPR-derived RNA(crRNA),构建最优RT-RAA-CRISPR反应体系。利用6种常见猪群病原核酸验证已建立方法特异性。用数字PCR标定的SVA cRNA标准品验证已建立方法敏感性。通过重复试验验证方法的稳定性。应用已建立的方法与临床样品进行符合检验。RT-RAA及CRISPR反应体系优化结果显示,RT-RAA反应温度为37℃,扩增效果最佳;从8条crRNA中筛选出crRNA 5检测信号最强。建立的RT-RAA-CRISPR Cas13a方法特异性好,与ASFV、PRRSV、PEDV、PCV2、CSFV、PRV等常见猪群疫病均无交叉反应;方法敏感性高,对SVA最低检测限为0.86 copy/μL;对3个稀释度标准品检测均能稳定产生荧光,重复性好;能够在50 min内完成临床样品检测,对临床检毕的6份阳性样品及58份阴性样品进行符合检测,结果表明检测结果一致,符合率100%。结果表明,本研究建立了一种高特异性、高敏感性的RT-RAA-CRISPR Cas13a检测方法,有望应用于SVA的现场快速检测。

关键词： 阴道群落状态类型   乳酸杆菌   早产   16S   rRNA高通量基因测序   网状Meta分析  

摘要： 目的探究孕期不同阴道微生物群落状态类型(community state type,CST)与早产的相关性。方法搜索在PubMed、Web of Science、Elsevier Science Direct、中国知网、万方数据知识服务平台和维普数据库建库至2024年6月公开发表的关于孕期阴道CST与早产关系的文献,根据纳入与排除标准筛选文献并提取信息,所得数据使用Revman 5.4及Stata 16.0软件进行统计学分析。结果共纳入13篇队列研究,共计1959例孕妇,涉及经16S rRNA高通量基因测序分析明确的5种阴道CST,4种CST以乳酸杆菌占主导地位,分别为CSTⅠ卷曲乳酸杆菌、CSTⅡ格氏乳酸杆菌、CSTⅢ惰性乳酸杆菌和CSTⅤ詹氏乳酸杆菌,另外1种为CSTⅣ低乳酸杆菌。网状Meta分析结果显示,各CST诱发早产的风险排序由高至低为CSTⅤ>CSTⅣ>CSTⅢ>CSTⅡ>CSTⅠ,各CST两两比较,其导致早产风险的差异无统计学意义。早孕期采样组(采样孕周<14周)中,CSTⅣ与CSTⅠ比较增加了早产风险,差异有统计学意义(P<0.05)。亚裔人群中导致早产高风险菌群高危排序为CSTⅤ>CSTⅡ>CSTⅣ>CSTⅠ>CSTⅢ,各CST组间比较差异无统计学意义。结论当前研究显示,整体孕期各类阴道CST导致早产风险的差异无统计学意义,但亚组分析显示早孕期CSVⅣ较CSTⅠ增加了早产风险,差异有统计学意义。采样孕周及种族等均可能对研究结果产生影响,需要开展更多高质量、大样本量研究,以期探讨阴道CST与早产的相关性。

关键词： 鸟类   砂质海岸   生态系统   多样性   日照  

摘要： 为更好地掌握砂质海岸生态系统中鸟类多样性分布现状,于2020—2021年鸟类迁徙期对日照砂质海岸生态系统中两城河口国家湿地公园、万宝滨海风景区、日照国家海滨森林公园、秀水河口4种具有代表性生境类型的鸟类采用样线法和样点法进行调查,共记录鸟类61种,隶属于12目19科,其中国家一级保护动物有2种,二级保护动物有8种。居留型以旅鸟和夏候鸟为主;区系以广布种占优。在4个生境中,两城河口国家湿地公园鸟类多样性指数在2020年最高(2.59),秀水河口鸟类多样性指数在2021年最高(2.37);秀水河口鸟类均匀度指数2年均为最高(0.84和0.79);万宝海滨风景区鸟类优势度指数2年均为最高(0.46和0.37)。通过调查丰富了区域鸟类的基础信息,为砂质海岸生态系统的保护和管理提供了科学依据。

关键词： 血管修复与再生   人工血管   血管支架   细胞治疗  

摘要： 近30年来,随着我国经济水平的大幅提高,人民饮食习惯的改变,以及人口老龄化发展速度的进一步加快,涉及血管外科的疾病谱也发生了很大变化。与此同时,作为新兴学科的血管外科发展也伴随着巨大的挑战。血管的修复与再生一直是血管疾病治疗及研究的重点与难点,近年来相关基础研究蓬勃发展。本文从人工血管、血管支架和细胞治疗三个方面介绍关于血管修复与再生的近期基础研究进展与未来的发展展望。

关键词： 高危型人乳头瘤病毒持续性感染   妇宁栓   重组人干扰素α2b阴道泡腾片   真实世界研究   药物经济学  

摘要： 目的 基于真实世界数据,分析妇宁栓治疗高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)持续性感染的经济学优势,为临床治疗HR-HPV持续性感染和政府决策提供科学依据。方法 通过溯直医疗数据库收集2017年1月1日—2023年1月1日采用妇宁栓或重组人干扰素α2b阴道泡腾片治疗HR-HPV持续性感染的疗效和成本数据,以HPV转阴率为主要疗效指标,采用Treeage Pro14软件,构建决策树模型,进行成本—效果分析。结果 (1)有效性与安全性:妇宁栓组转阴率为76.26%,与干扰素组的70.08%比较差异无统计学意义(χ^(2)=2.642,P=0.104);治疗3个月后,2组HR-HPV病毒载量均低于治疗前,且妇宁栓组低于干扰素组(P<0.01);妇宁栓组不良反应发生率为4.32%,低于干扰素组的10.98%(χ^(2)=8.611,P=0.003);随访6个月,妇宁栓组复发率为6.12%,低于干扰素组的14.77%(χ^(2)=10.955,P=0.001)。(2)经济性:妇宁栓组1个疗程总成本为5 684.89元,干扰素组1个疗程总成本为4 439.74元;妇宁栓组的成本—效果比(CER)为7 688.71,干扰素组的CER为6 716.29,2组增量成本—效果比(ICER)为18 715.72;妇宁栓降价至68.8元/枚,妇宁栓组的CER为6 688.15,干扰素组的CER为6 716.29,2组ICER为6 369.07。妇宁栓和重组人干扰素α-2b阴道泡腾片价格分别向上、向下调整10%,妇宁栓组的CER最高为7 113.08,最低为6 263.22;干扰素组的CER最高为7 122.52,最低为6 310.06。结论 妇宁栓治疗HR-HPV持续性感染有良好的有效性、安全性及经济性。