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关键词： 脑心肌炎病毒   感染性克隆   拯救病毒   CMV启动子   体内转录   同源重组   反向遗传操作系统  

摘要： 采用RT-PCR方法扩增覆盖脑心肌炎病毒（encephalomyocarditis virus，EMCV）XX1-19全基因组且含载体同源臂的3段cDNA片段，EcoRI酶切真核表达载体pcDNA3.1使其线性化后，将3段cDNA片段同时连入载体，构建了含EMCV XX1-19全基因组的重组质粒，通过BamHI和Not I酶切、菌液PCR扩增及测序对重组质粒进行鉴定，结果显示，重组质粒构建成功，命名为pcDNA/XX1-19。将重组质粒经脂质体转染BHK21细胞进行病毒拯救，通过细胞病变效应观察、核酸完整性检测、电镜观察、TCID50检测等对拯救病毒进行鉴定，结果表明，构建的EMCV全长cDNA克隆具有感染性，可以拯救出病毒。一步生长曲线结果表明，拯救病毒与野生病毒具有相似的体外增殖特性。本研究建立的方法省去了基因片段的逐步克隆、拼接以及改造载体等繁琐步骤，避开了体外转录病毒RNA的弊端，利用pcDNA3.1载体的CMV启动子、通过同源重组及体内转录病毒RNA的方式，快速、高效地构建了感染性克隆并成功拯救出病毒。

关键词： 哈密瓜   木霉   根际促生菌   生物有机肥   土壤微生物  

摘要： 【目的】本研究筛选哈密瓜根际促生菌并制备生物有机肥，为研究生物有机肥哈密瓜生长、产量及根际土壤微生物群落结构和养分动态的影响提供理论参考。【方法】从哈密瓜根际土壤中筛选出具有促生功能的菌株W2桔绿木霉菌和W4长枝木霉菌，分别将W2桔绿木霉菌、W4长枝木霉菌单独以及与两者复合与固体发酵基质进行深度发酵，成功制备出W2、W4及W24 3种生物有机肥，设置5个处理：仅施用化肥（CK）、施用普通有机肥（COF）、施用W2生物有机肥、施用W4生物有机肥、施用W24生物有机肥。【结果】田间试验结果表明，W24处理不仅可以提高哈密瓜的茎长与根长，还显著增加了叶片数量，以及地上部和地下部的鲜重与干重，在土壤养分方面，W24处理显著提高了土壤中的速效钾、有效磷和碱解氮含量，从而有效增强了土壤肥力并促进了植物养分的吸收利用。W24处理还显著提升了土壤细菌和真菌的多样性，增加了厚壁菌门、放线菌门等有益微生物的丰度，改善了土壤微生物环境，并促进了子囊菌门和担子菌门的增长，此外，厚壁菌门与土壤有机质含量显著正相关，而接合菌门与土壤碱解氮、速效钾及果实产量显著正相关，也进一步证实了W24处理在提升土壤健康和促进作物产量方面的巨大潜力。【结论】W24生物有机肥可显著促进哈密瓜的生长和发育，提升土壤健康、作物产量以及优化土壤微生物群落。

关键词： 中华秋沙鸭   繁殖期   数量动态   繁殖生态学   行为  

摘要： 为了分析中华秋沙鸭（Mergus squamatus）种群繁殖期数量动态变化规律、行为对策、繁殖习性及种群繁殖力，为其种群保护和管理提供参考，在吉林省抚松县漫江流域对中华秋沙鸭繁殖种群采用观察法进行实地观察。结果表明：中华秋沙鸭种群数量在繁殖期变动明显，雄鸭的数量呈现较规律的正态曲线变化，雌鸭数量波动明显，种群数量动态能够充分反映繁殖活动的进程。通过繁殖期种群数量空间分布分析，确定长松电站旧址和野鸭湖为主要繁殖区。繁殖期以游动、取食、静息和睡眠为主要行为模式，占比86%，其中游动和取食是最主要的行为模式，占比58%，行为时间分配对环境变化和人为干扰响应明显。与越冬期行为比较发现，繁殖期行为模式倾向于简化以减少能量消耗。繁殖期有配偶看护行为，以保证雌鸭和巢址安全，并防止其他雄鸭与配偶交配，通过驱赶、伴飞和守候予以实现；潜水时间两性之间在年内无显著差异（P > 0.05），仅雄性在年际间存在显著差异（P < 0.05）。平均窝卵数（9.26 ± 2.10）（n = 19），繁殖成功率84.21%。

关键词： 诺如病毒   衣壳蛋白   唾液   寡糖   结合特征   分子模拟  

摘要： 目的 分析GⅡ.5型诺如病毒（norovirus,NoV）衣壳蛋白糖受体的结合特征，以期为NoV抗病毒药物和疫苗研发奠定基础。方法 采用原核系统分别表达GⅡ.5 N490和GⅡ.5 12X P蛋白，经谷胱甘肽琼脂糖凝胶亲和层析纯化后，通过ELISA法检测P蛋白与唾液和寡糖的结合特征；再对其与流行株GⅡ.17 KW308的结构进行分子模拟，并分析其与糖分子之间可能存在的结合位点。结果 GⅡ.5 N490和GⅡ.5 12X P蛋白表达产物相对分子质量均为61 000，主要以可溶形式表达于上清中，纯化后浓度为0.2 mg/mL。2株GⅡ.5的P蛋白可与大部分A、B、O分泌型和非分泌型唾液发生结合；GⅡ.5 N490 P蛋白可与H双糖结合，GⅡ.5 12X P蛋白可与H双糖和B三糖结合。2株GⅡ.5与GⅡ.17 KW308具有相似的空间构象；6个与寡糖相互作用的氨基酸位点中，GⅡ.5 N490和GⅡ.5 12X的Arg349、Asp378、Gly443与GⅡ.17 KW308相同，Asn375、Glu380和Phe444与GⅡ.17 KW308不同。结论 2株GⅡ.5的P蛋白与唾液结合特征相似，均具有广泛的易感人群，但与寡糖的结合模式略有不同。

关键词： CO   施肥效应   陆地生态系统   光合作用   CO   加富实验   生态系统碳循环模型  

摘要： 二氧化碳(CO2)施肥效应显著影响全球陆地生态系统碳循环过程。近半个世纪以来，大气中CO2浓度的持续上升，在导致全球变暖的同时，也显著促进植物光合作用速率(即CO2施肥效应)，增加陆地生态系统的碳汇能力，从而减缓全球变暖的速率。本文首先对CO2施肥效应产生的机理进行了系统的介绍；然后系统综述了目前用于评估全球CO2施肥效应的三种主要方法——CO2加富实验、生态系统过程模型和统计归因模型，评述了各类方法的优缺点；进一步对影响CO2施肥效应的各种气候和环境因素进行了分析。最后，探讨了全球CO2施肥效应评估方法目前存在的问题，并从全球CO2施肥效应时空变化格局研究、影响因素和植物适应等方面对今后全球CO2施肥效应的研究方向进行了展望。

关键词： 互助输血   战伤救治   乙型肝炎病毒感染  

摘要： 战伤救治中战地紧急互助输血是拯救官兵生命的重要措施,而传染病暴发始终是军事行动的重大威胁。讨论战伤救治互助输血部队官兵乙型肝炎病毒(HBV)感染供血安全和免疫防护的研究现状,指导根据不同地域不同个体免疫制定我军官兵个体化的健康防护策略。文章就部队官兵HBV感染的背景、部队官兵HBV感染的分子流行病学特征,分子流行病学调查的方法与应用、官兵HBV免疫防护的措施等方面进行综述。

关键词： 丙肝   医务人员   防治知识   知晓率   影响因素  

摘要： 目的了解医务人员丙型病毒性肝炎(简称“丙肝”)防治知识知晓情况,为提高丙肝防治水平提供参考依据。方法2021年采用问卷方式调查447名医务人员,问卷内容包括一般社会人口学特征、丙肝基础知识、传播风险、病例报告和治疗措施等相关内容。采用SPSS 23.0软件对医务人员丙肝防治知识知晓率的影响因素进行单因素χ^(2)检验和多因素logistic回归分析。结果447名医务人员丙肝防治知识总知晓率为31.99%。病例报告知识的知晓率最低,为21.03%,传播风险知识知晓率最高,为97.54%。单因素分析结果显示,不同年龄、工作年限、医院类型以及1年内是否接受过丙肝知识培训的医务人员,丙肝防治知识知晓率差异有统计学意义(χ^(2)=12.80、8.50、20.47、16.40,P<0.05)。多因素分析显示,年龄30~<40岁(95%CI:1.02~3.14,P=0.04)和40~<50岁(95%CI:1.24~4.41,P=0.01)、工作年限10~<20年(95%CI:1.15~3.41,P=0.01)、医院类型中县级医院(95%CI:1.51~5.36,P<0.01)以及1年内接受过丙肝知识培训(95%CI:1.58~3.84,P<0.01),是影响医务人员丙肝防治知识知晓率的主要因素。结论受调查的医务人员对丙肝防治知识知晓率较低,特别是病例诊断分类模糊不清,亟待加强丙肝业务培训,提高诊疗水平。

关键词： 美丽火桐   种群结构   静态生命表   生存分析   时间序列预测  

摘要： 美丽火桐(Firmiana pulcherrima)是中国特有种和国家Ⅱ级重点保护野生植物,自然分布于海南中部热带雨林区。为厘清美丽火桐种群的生存现状和发展趋势,探究导致其濒危的主要原因,该文对吊罗山美丽火桐天然种群进行了野外调查。以空间代替时间构建种群龄级结构,通过静态生命表、动态量化分析等方法分析该种群结构特征和动态变化规律,并采用时间序列模型预测种群未来发展潜力。结果表明:(1)美丽火桐种群为增长型种群,忽略外部干扰时整个种群结构的数量动态变化指数(V_(pi))大于考虑外部干扰时整个种群结构的数量动态变化指数(V′_(pi))且都大于0,种群对完全随机干扰所承担的最大风险概率(P max)为1.82%,种群龄级结构完整,抗干扰能力弱,增长性和稳定性差。(2)该种群生命期望在第Ⅱ龄级达到最大值,随龄级增加而减小,死亡率和消失率均在第I、第Ⅶ和第Ⅸ龄级有峰值,存活曲线为Deevey-Ⅲ型。(3)生存分析表明该种群具有早期锐减、中后期趋于稳定的特点。(4)经过未来3个、6个、9个龄级时间后,除第Ⅳ和第Ⅷ龄级外,其余龄级个体数均有增多,种群自然更新良好。综上认为,强烈的光环境筛和种间竞争是导致吊罗山美丽火桐种群濒危的主要原因,建议采取适度间苗和修枝、强化种群及生境保护、积极开展人工繁育及回归种群扩充等措施,促进美丽火桐种群增长和种群恢复。

关键词： 坐骨神经损伤   运动功能障碍   推拿   Fas/FasL信号通路   运动神经元   细胞凋亡  

摘要： 目的探讨“三法三穴”推拿手法抑制坐骨神经损伤(SNI)大鼠脊髓运动神经元凋亡及对Fas/FasL信号通路蛋白表达变化的影响。方法选择SPF级健康雄性SD大鼠36只,随机分为4组,Control组,Sham组,Model组,Massage组。Massage组取大鼠右侧殷门、阳陵泉、承山,每穴依次进行点法、拨法、揉法操作,比较各组的BBB评分及斜板试验结果,于第20次干预结束后取大鼠L_(4)~L_(6)节段脊髓进行形态学及分子生物学检测。结果BBB评分结果显示:Massage组干预10次、20次后,与Model组比较升高(P<0.05);斜板试验结果显示:Massage组斜板试验角度高于Model组(P<0.05);TUNEL染色结果显示:Model组的神经元凋亡细胞较Control组和Sham组增多(P<0.05),Massage组则较Model组减少(P<0.05);Western blot检测结果显示:Model组Fas、FasL、Caspase-3表达水平均较Control组、Sham组升高(P<0.05),Massage组较Model组降低(P<0.05)。结论“三法三穴”推拿手法可以改善坐骨神经损伤后的运动功能障碍,其机制可能是通过抑制脊髓Fas/FasL信号通路中Fas和FasL蛋白的表达,并作用于Caspase-3发挥抗细胞凋亡作用,从而改善SNI模型鼠的运动功能障碍。