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关键词： 核苷酸结合寡聚化结构域样受体3   Ⅰ型单纯疱疹病毒   病毒性脑炎   氧化应激   细胞免疫  

摘要： 目的探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体(NLRP)3在Ⅰ型单纯疱疹病毒性脑炎模型小鼠中的作用。方法60只SPF级雄性小鼠,其中NLRP3野生型(WT)小鼠30只,NLRP3敲除型(KO)小鼠30只,将NLRP3野生型分为WT-对照组、WT-模型组,NLRP3敲除小鼠分为KO-对照组、KO-模型组;WT-模型组、KO-模型组小鼠接种Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSVⅠ)悬液建立病毒性脑炎(HSE)模型,接种5 d后对小鼠脑脊液进行白细胞计数、病毒滴度检测,测定脑组织水分含量与氧化应激水平,蛋白免疫印迹法检测脑组织核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)样受体相关蛋白、氧化应激相关蛋白、T细胞亚群特异细胞因子蛋白相对表达情况。结果WT-对照组、KO-对照组小鼠状态良好,WT-模型组、KO-模型组小鼠出现眼角红肿溃烂、反应迟钝、抽搐等现象;与WT-对照组、KO-对照组相比,WT-模型组、KO-模型组小鼠脑脊液的白细胞计数(WBC)较高,脑组织湿重与含水量高,丙二醛(MDA)表达升高,干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-4、IL-17、叉头框蛋白(FOX)P3表达水平升高,总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)表达低,核因子E2相关因子(Nrf)2、血红素氧化酶(HO)-1、醌氧化还原酶(NQO)-1降低;KO-模型组病毒滴度、脑组织湿重与含水量、MDA、FN-γ、IL-4、IL-17、FOXP3低于WT-模型组,T-AOC、SOD、Nrf2、HO-1、NQO-1高于WT-模型组(P<0.05);KO-对照组、KO-模型组小鼠的脑组织中未检出NOD样受体相关蛋白,WT-模型组NLRP3、ACS、C aspase-1表达水平高于WT-对照组(P<0.05)。结论NOD样受体表达可能与脑组织氧化应激水平有关,其在HSE模型小鼠中高表达可激活氧化应激损伤及参与细胞免疫调节。

关键词： 甲型流感病毒   核酸检测   室间质量评价   公共卫生  

摘要： 目的了解我国临床实验室对甲型流感病毒核酸检测能力的总体情况,发现潜在问题以进一步提高检测质量。方法国家卫生健康委临床检验中心2024年共发放5份样本至1367家参评实验室。通过计算各参评实验室和使用不同试剂的实验室检测结果的符合率,评估其检测能力。结果样本总符合率为99.87%(6826/6835),阳性样本符合率为99.89%(5462/5468),阴性样本符合率为99.78%(1364/1367)。不同浓度的H3N2病毒样本、同等浓度水平(1.0×10^(4)拷贝/mL)的H1N1(2009)和H3N2病毒样本以及同等浓度水平(1.0×10^(5)拷贝/mL)的季节性H1N1和H3N2病毒样本,实验室检测的阳性符合率差异均未见统计学意义(P均>0.05)。结论我国临床实验室对甲型流感病毒H1N1(2009)和H3N2两种常见亚型检出能力较为理想,少数实验室存在假阴性和假阳性结果问题。

关键词： 菇渣   果园土壤   养分   微生物   光合作用   根系  

摘要： 为研究菇渣有机肥不同施用量对不同质地土壤养分含量与主要微生物数量变化、葡萄幼苗养分分配规律、光合作用及根系生长的影响,以阳光玫瑰葡萄幼苗为应试品种,开展盆栽试验。在壤土和黏壤土中均设置5种菇渣有机肥施用量(g·kg^(-1),肥料干质量/干土质量):0(T0)、10(T1)、20(T2)、40(T3)、60(T4)。结果表明:随着菇渣有机肥用量增加,两种质地土壤pH值显著降低,土壤电导率值、有机质、全氮、碱解氮、有效磷、速效钾含量显著增加。当菇渣有机肥在两种质地土壤中的用量均为T1时,葡萄幼苗总生物量及根冠比最高,较其他各用量分别提升1.04%~112.31%和34.78%~246.15%,与T0、T3和T4用量相比存在显著性差异;当用量为T1~T2时,葡萄叶片中全氮、全磷、全钾含量相对较高。与不施有机肥相比,菇渣有机肥在壤土中的施用并未有效增加葡萄细根总根长和根尖数,同时在T4用量下细根总根长和根尖数分别显著降低了44.81%和39.53%;菇渣有机肥在黏壤土中的施用量为T1和T2时,细根总根长分别显著增加了87.02%和77.20%,根尖数分别显著增加了40.29%和42.36%。葡萄叶片光合作用呈现波动性变化,当两种质地土壤中菇渣有机肥用量为T4时,葡萄叶片净光合速率、胞间CO_(2)浓度及气孔导度最低。适当的菇渣有机肥施用量(10~20g·kg^(-1))显著提升土壤养分及主要微生物数量、植株生物量、叶片氮磷钾含量和净光合速率、总根长及根尖数,但过高的菇渣有机肥用量(40~60g·kg^(-1))则显著抑制土壤微生物数量和葡萄幼苗生长。研究表明,菇渣有机肥施用量的增加显著提升土壤有机质和速效养分含量,而对土壤主要微生物数量及葡萄幼苗生长的影响表现为先促进后抑制。本试验条件下,菇渣有机肥在壤土中施用量为10g·kg^(-1)、在黏壤土中施用量为10~20g·kg^(-1)时对土壤肥力提升及葡萄幼苗生长促进效果最佳。

关键词： 数字孪生   可供性   互补创新   企业创新生态系统   价值共创  

摘要： 企业创新生态系统中的价值共创是驱动技术和经济发展的核心动力。数字孪生作为集成型前沿数字技术,其丰富的可供性成为推动企业创新生态系统中价值共创的关键要素。然而,其具体作用机制尚待深入挖掘。聚焦海尔集团的衣联网、日日顺、卡奥斯三大子生态系统,采用嵌入式案例分析方法进行研究发现:数字孪生技术的多维可供性在单一场景、多元场景及生成场景中展现了显著的应用潜力,成为推动企业创新生态系统中价值共创的关键引擎;互补创新连接了数字孪生的多维可供性与企业创新生态系统中的价值共创,成为催化这一过程的重要机制;数字孪生的多维可供性催生了聚焦化、多样化和模块化互补创新形态,进而促成了互动式、整合式和转化式的价值共创模式,显著提高了企业的创新效率和整个生态系统的协同发展。研究结论不仅丰富了数字技术管理与企业创新生态系统价值共创关系相关的理论文献,还为企业在不同场景中有效应用和管理数字孪生技术以实现价值共创提供了借鉴启示。

关键词： 子宫肌瘤   白果内酯   细胞凋亡   细胞周期   移植瘤   裸鼠  

摘要： 目的:探究白果内酯对子宫肌瘤细胞及裸鼠移植瘤的影响。方法:收集18例子宫肌瘤患者术后组织标本,分离和培养子宫肌瘤细胞,并将其分为对照组(无处理)、低剂量白果内酯组(10μmol/L白果内酯处理)、中剂量白果内酯组(50μmol/L白果内酯处理)和高剂量白果内酯组(100μmol/L白果内酯处理)。采用CCK-8法检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期分布情况,Western blot检测细胞外基质相关蛋白表达。将人原代子宫平滑肌瘤细胞于腹部皮下注射入雌性裸鼠体内建立裸鼠移植瘤模型。当移植瘤大小达到50~100 mm^(3)时,将裸鼠随机分为对照组和白果内酯组,每组60只。白果内酯组给予腹腔注射白果内酯10 mg/kg,每周2次,连续4周;对照组按照同样频率给予腹腔注射0.9%氯化钠溶液10 mg/kg。于干预后第0、7、14、21、28、35、42、49、56、66天分离肿瘤并测量其大小,计算移植瘤体积。采用免疫组织化学法检测组织增殖细胞核抗原(PCNA)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达。采用Western blot检测组织生长相关蛋白表达。结果:与对照组比较,低、中、高剂量白果内酯组子宫肌瘤细胞活性逐渐降低,细胞凋亡率逐渐升高(均P<0.05)。与对照组比较,中、高剂量白果内酯组阻滞在G1期的子宫肌瘤细胞比例逐渐增加(均P<0.05)。与对照组和低剂量白果内酯组比较,中、高剂量白果内酯组子宫肌瘤细胞纤维连接蛋白(Fibronectin)、Ⅰ型胶原(COL1A1)、波形蛋白(Vimentin)、α-SMA和β-连环蛋白(β-catenin)蛋白水平逐渐降低(均P<0.05)。与对照组比较,从干预后第49天起白果内酯组移植瘤体积显著缩小(均P<0.05)。与对照组比较,白果内酯组PCNA和α-SMA蛋白阳性细胞比例以及PCNA和Fibronectin蛋白表达水平降低,Bax/Bcl-2比值升高(均P<0.05)。结论:白果内酯能够促进子宫肌瘤细胞凋亡,诱导其发生G1期阻滞,抑制裸鼠子宫肌瘤移植瘤生长。

关键词： 肺肿瘤   三级淋巴结构   评估   临床应用   共识  

摘要： 三级淋巴结构(tertiary lymphoid structure,TLS)在肿瘤微环境中发挥着至关重要的作用,影响肿瘤的发生发展。作为预测肿瘤患者预后及治疗反应的一种新兴生物标志物,TLS越来越受到重视。但目前对于TLS的评估缺乏统一的标准,且TLS在不同肿瘤组织中存在差异,为该标志物在临床转化中的应用带来困扰。为满足非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)临床诊治需求,本共识围绕NSCLC TLS的定义、临床意义、检测内容及评估方法等基本要点,结合相关研究和中国临床实践,为临床TLS评估及应用提供标准化和规范化建议,以提高临床医师及病理检测诊断人员对TLS的认识,为NSCLC TLS检测临床应用提供参考依据。

关键词： 牙髓   牙髓干细胞   浓缩生长因子   过氧化氢   氧化应激   组织工程学  

摘要： 目的探讨浓缩生长因子(CGF)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的氧化应激状态下人牙髓干细胞(hDPSC)生物学性能的影响。方法采用组织块分离法从因正畸拔除的健康恒牙中提取hDPSC, 流式细胞术检测hDPSC的表面标志物CD34、CD45、CD90、CD105, 碱性磷酸酶(ALP)、茜素红S、油红O染色和集落形成实验对hDPSC进行鉴定。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测后选用最适H_(2)O_(2)浓度构建hDPSC氧化应激模型。采用反复冻融法制备CGF条件培养基, CCK-8检测后选用最适CGF浓度用于后续实验。将hDPSC分为对照组、H_(2)O_(2)组(H_(2)O_(2)单独处理)、H_(2)O_(2)+CGF组(H_(2)O_(2)联合CGF处理)和CGF组(CGF单独处理), 细胞分组后进行后续所有实验。应用活性氧、β-半乳糖苷酶染色和蛋白质印迹法对氧化应激模型进行验证。CCK-8和细胞划痕实验分别检测CGF对氧化应激状态下hDPSC增殖和迁移能力的影响;ALP及茜素红S染色检测CGF对氧化应激状态下hDPSC成骨分化能力的影响;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测成牙相关基因mRNA的表达, 蛋白质印迹法检测成牙、成骨相关蛋白的表达。结果分离培养的hDPSC阳性表达间充质干细胞表面标志物CD90、CD105, 阴性表达造血干细胞表面标志物CD34、CD45;hDPSC具有成骨、成脂向分化能力和克隆形成能力。200 μmol/L H_(2)O_(2)为构建氧化应激模型的最适浓度。20%CGF为用于后续实验的最适CGF浓度。与对照组相比, H_(2)O_(2)组衰老蛋白p53表达从(0.82±0.12)显著上调至(1.19±0.14)(P<0.05), β-半乳糖苷酶染色加深、活性氧荧光强度增加。H_(2)O_(2)+CGF组在第1、3、5、7天的增殖能力(0.23±0.01、0.50±0.02、1.60±0.07、1.80±0.21)均显著高于H_(2)O_(2)组(0.15±0.01、0.14±0.02、0.50±0.03、0.90±0.09)(均P<0.05);且H_(2)O_(2)+CGF组在12、24 h的细胞愈合能力[(47±7)%、(58±44)%]也均显著高于H_(2)O_(2)组[(36±2)%、(44±2)%](均P<0.05), ALP活性和矿化结节形成增加;在第28天时H_(2)O_(2)组中成牙相关基因牙本质涎磷蛋白(DSPP)(0.52±0.16)、牙本质基质蛋白-1(DMP-1)的mRNA表达(0.39±0.13)均显著低于H_(2)O_(2)+CGF组(分别为0.96±0.24、0.83±0.30)和CGF组(分别为1.12±0.18、1.23±0.19)(均P<0.05);第28天时H_(2)O_(2)组成牙相关蛋白DMP-1(0.27±0.04)、成骨相关蛋白Runt相关转录因子2(0.42±0.15)的表达均显著低于H_(2)O_(2)+CGF组(分别为0.66±0.18、0.68±0.04)和CGF组(分别为1.15±0.13、1.06±0.19)(均P<0.05)。结论 H_(2)O_(2)能诱导hDPSC氧化应激模型, CGF能促进氧化应激状态下hDPSC的增殖、迁移和成牙、成骨向分化能力。

关键词： 猪   仔猪   猪肠病毒G型   分离鉴定   生物学特性   人工感染模型   腹泻  

摘要： 为分析临床腹泻发病猪场疫情发生的原因,在开展初生仔猪腹泻样品病毒分离试验中,获得了能够在Marc145细胞上稳定增殖的病毒,并对该病毒进行宏基因组测序、核酸序列分析、培养特性研究、仔猪回归试验等研究。该病毒的分离株鉴定为猪肠病毒G1型(EV-G1),能在Marc145、 ST、 Vero等多种细胞上生长,无胰酶依赖性,对氯仿不敏感,适应细胞培养滴度均能达到10^(7.0)TCID_(50)/mL以上。人工感染3~5日龄仔猪,可导致一过性腹泻,在感染仔猪的脑、心脏、空肠、回肠、盲肠、结肠中均可检测到该病毒。本研究从与猪轮状病毒混合感染的组织样品中分离到1株EV-G病毒,该病毒可导致新生仔猪腹泻,且病毒有良好的细胞适应性,旨在充分了解仔猪感染EV-G病毒的致病性,为EV-G免疫原性研究以及疫苗研发奠定基础。

关键词： 海洋生态系统   海洋观测   健康评估   健康指标  

摘要： 经济社会的发展需要一个健康的海洋生态系统,对海洋生态系统健康状态进行有效评估是全球关注的重大科学问题。人类不居住在海洋中,所以不可能通过我们自身的感受和观察来了解海洋的状态,我们对海洋的深入了解只能来自对海洋的观测。开展海洋生态系统健康评估这一重大科学目标驱动下的海洋生态系统观测,是支撑健康海洋与可持续发展的重要举措。如何对中国近海生态系统健康状态进行评估、如何建立支撑生态系统健康状态评估的海洋综合观测方案是我们当前亟待解决的重大科学问题。在综合分析海洋生态系统现状、存在问题与健康评估需求的基础上,建议基于近海生态系统健康评估重大科学考察航次方案,选取中国近海重点区域和断面,基于历史观测资料整合研究,提出中国近海生态系统健康评估关键指标,构建生态系统健康评估技术体系和模式,确定明晰近海生态特征所需观测的空间范围、典型断面和时间频率,在中国近海选定的固定断面观测,精准获取相关资料并开展验证;评估中国近海生态系统健康状况,为健康海洋与可持续发展提供科学依据。

关键词： 生物学实验   核心素养   光合作用  

摘要： 为了让学生更加深入、完整地理解光合作用的概念及实质,整合教材相关内容创设实际生产生活实验情境,通过问题串的引导,组织学生设计并开展探究实验活动,以发展学生的科学思维,同时渗透结构与功能观、物质与能量观等生命观念及爱绿护绿的态度责任。