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关键词： 任务驱动   问题引领   种群基因组成   教学设计  

摘要： 本文对教材中的素材和相关内容进行合理删减和重组,以“桦尺蛾种群进化”作为教学情境展开教学,借助“任务驱动,问题引领”的理念,将教学内容分解为四个任务,并在每个任务下设置若干问题,从而引导学生思考、推理并得出相应观点,以期在实现学生深度参与课堂教学的同时,提升其观察和信息获取能力,培养逻辑推理、综合分析等科学素养。

关键词： 精原前体细胞   Rb1   精原干细胞   特化   细胞增殖   细胞凋亡  

摘要： 目的探讨静息期精原前体细胞Rb1敲除致雄鼠精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)特化异常的调控机制。方法①用R对在基因表达综合数据库(gene expression omnibus,GEO)(GEO登记号:GSE124904)获取的出生后0.5 d(postnatal day 0.5,P0.5)雄鼠精原前体细胞单细胞测序数据进行分析。②用Vasa-Cre工具鼠与Rb1^(flox/flox)(或Id4-gfpTg;Rb1^(flox/flox))小鼠配繁构建静息期精原前体细胞Rb1条件性敲除(conditional knock out,cKO)雄鼠或带ID4绿色荧光(ID4-GFP)的Rb1 cKO雄鼠,通过PCR基因鉴定判断生殖细胞Rb1敲除情况以区分cKO雄鼠与对照(Con)。采集出生后数天内的小鼠(n=3~8)睾丸,利用流式细胞术基于细胞荧光强度将ID4‐GFP细胞均分为3个群落,检测各个群落细胞数量和细胞周期。③免疫荧光染色检测生殖细胞增殖(Ki67+)、SSCs特化(FOXO1胞核转换)和生殖细胞分化(STRA8+)情况。④TUNEL染色检测细胞凋亡。结果①单细胞测序数据分析显示:在P0.5精原前体细胞的2类细胞中,与细胞增殖相关的基因在将特化为精原干细胞的那一群细胞中富集表达。②生殖细胞增殖情况检测表明:P2.5时,对照[(11.22±3.27)%]与cKO小鼠[(46.10±6.21)%)]小鼠睾丸横切面生殖细胞Ki67+占比差异具有统计学意义(P<0.01)。③流式细胞术分析表明:P2.5对照[(5.05±1.46)%]与cKO[(12.05±2.22)%]小鼠睾丸ID4‐GFP荧光强度最强的那群细胞处于S期的占比差异具有统计学意义(P<0.05)。④TUNEL染色显示cKO组而非对照组小鼠睾丸横切面检测到细胞发生凋亡。⑤SSCs特化标志检测结果显示对照[(20.57±2.15)%]和cKO[(45.08±2.45)%]小鼠睾丸横切面生殖细胞FOXO1位于细胞质的占比差异具有统计学意义(P<0.01)。结论静息期精原前体细胞Rb1敲除使其出生后细胞周期恢复紊乱、凋亡发生,导致SSCs特化异常。

关键词： 诺如病毒   生长发育阶段   中班幼儿   人员密集场所   易感人群   聚集性疫情   疾控部门   幼儿园  

摘要： 设计意图:春季是传染病高发季节,中班幼儿正处于生长发育阶段,免疫力相对较弱,属于易感人群。恰逢开学季,多地疾控部门紧急提示:目前正值诺如病毒的高发期,这种病毒会导致幼儿上吐下泻。鉴于诺如病毒人群普遍易感,且常在幼儿园等人员密集场所可能会引发聚集性疫情,幼儿一旦被感染会严重影响其健康以及正常生活,因此幼儿需要对诺如病毒有一定的生活经验。

关键词： 新扶正除疫颗粒剂   腺病毒   凋亡因子   Caspase-9  

摘要： 目的:探讨不同浓度新扶正除疫颗粒剂干预治疗感染腺病毒小鼠过程中,其肺内凋亡因子天冬氨酸蛋白水解酶-9(Caspase-9)变化情况,并探讨相关机制。方法:将120只BALB/c小鼠进行分组,包括低、中、高剂量组、腺病毒模型组与利巴韦林组。动物给药7 d,最后1 d后取其肺脏,用流式细胞仪测定Caspase-9肺内凋亡表达水平。结果:各治疗组动物肺组织中的Caspase-9含量与模型组比较,在使用新抗疫颗粒剂治疗后均有显著增加。利巴韦林组与高剂量组的Caspase-9含量比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:新扶正除疫颗粒剂促Caspase-9释放,高剂量组与西药组比较,Caspase-9释放效果更明显。

关键词： 防范化解   新陈代谢   能力提升   中共中央办公厅   国务院办公厅   人员流动性   应急管理   灾害事故  

摘要： 基层是应急管理的最前沿,加强基层应急管理能力建设是防范化解重大安全风险、及时应对处置各类灾害事故的固本之策,是推进应急管理体系和能力现代化的重要内容。2024年9月,中共中央办公厅、国务院办公厅印发《关于进一步提升基层应急管理能力的意见》,为提升基层应急管理水平注入了一针“强心剂”。不过,记者调研发现,在一些地方,人才队伍建设“新陈代谢”受阻已成为制约基层应急管理能力提升的关键,具体表现在乡镇(街道)应急管理岗位年轻人员流动性大,“老将”不敢轻易调整,致使基层应急管理人才队伍建设青黄不接,“小马拉大车”问题突出。

关键词： 可再生能源   生物多样性丧失   供应链   生态系统   应对气候变化   系统崩溃   不可忽视   改变现状  

摘要： 自然和生物多样性是人类生存的基石,保护生物多样性与应对气候变化一样,不只是企业或个人的社会责任,而是关乎人类存续的切身利益的大事。当前,生物多样性丧失和生态系统崩溃的趋势急需遏制,改变现状迫在眉睫。可再生能源作为清洁、绿色的能源方式,已成为全球各国降低对化石能源依赖、应对气候变化的关键投资产业之一。作为大型基建,可再生能源近年来发展迅猛,其发展足迹和相关供应链正在对生物多样性和生态系统产生不可忽视的影响。在支持可再生能源大力发展的同时,应避免顾此失彼,关注可再生能源与生物多样性的协调发展至关重要,避免在其高速发展中加剧生物多样性丧失。

关键词： 强骨康疏方   类风湿关节炎   破骨细胞   RANKL/RANK/OPG信号通路  

摘要： 目的:基于网络药理学及分子对接技术探讨强骨康疏方(Qianggu-Kangshu formula,QGKSF)治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)骨破坏的作用机制并利用细胞实验进行验证。方法:通过TCMSP数据库及文献检索获取QGKSF的主要活性成分及潜在靶点;使用OMIM数据库和GeneCards数据库检索与RA骨破坏相关的靶点,利用Venny 2.1.0筛选QGKSF抗RA骨破坏的靶点和靶点数量;通过STRING数据库构建潜在作用靶点的蛋白质-蛋白质相互作用网络,并利用Cytoscape软件进行拓扑分析筛选核心靶点;通过Metascape系统将筛选的QGKSF抗RA骨破坏的靶点进行进行京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)和基因本体(Gene Ontology,GO)富集分析;使用AutoDock和PyMOL软件对药物的核心成分与核心蛋白进行分子对接验证。体外培养小鼠RAW264.7巨噬细胞,使用CCK-8法检测细胞活力;抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrateresistant acid phosphatase,TRAP)染色观察各组TRAP阳性多核细胞的数量;测定TRAP酶活性以反映细胞酶活性;鬼笔环肽染色检测F-肌动蛋白环形成情况;Western blot检测活化T细胞核因子1(nuclear factor of activated T cells 1,NFATc1)、TRAP、组织蛋白酶K(cathepsin K,CTSK)、c-Fos、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factorκB,RANK)、RANK配体(RANK ligand,RANKL)和磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-AKT)蛋白水平。结果:从QGKSF中共筛选出136种有效活性成分及126个有效成分靶点;QGKSF抗RA骨破坏的靶点有207个,其中175个核心靶点。GO富集得到199条通路,筛选出与破骨细胞相关的通路共20条,主要有磷脂酰肌醇3-激酶/AKT信号通路和破骨细胞分化等。TRAP染色、酶活性测定及鬼笔环肽染色结果显示,与model组相比,QGKSF和氨甲蝶呤(methotrexate,MTX)组的阳性细胞形成减少,酶活性降低,F-肌动蛋白环形成减少;Western blot结果显示,与model组相比,QGKSF和MTX组的NFATc1、TRAP、CTSK、c-Fos、MMP9、p-AKT、RANK和RANKL蛋白水平显著降低(P<0.05),OPG蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论:QGKSF可抑制RANKL诱导的RAW264.7细胞向破骨细胞分化,其机制可能是通过RANKL/RANK/OPG信号通路的调控作用而抑制破骨细胞过度分化,从而起到减轻RA骨破坏的作用。

关键词： miRNA-299-3p   胃癌AGS细胞   细胞凋亡   细胞周期   活性氧   细胞迁移  

摘要： 目的探索miRNA-299-3p对胃癌AGS细胞增殖、凋亡、细胞周期及迁移的影响,并进一步探索其机制。方法体外培养胃癌AGS细胞,并将其分为空白对照组、阴性对照组及实验组。利用qPCR检测miRNA-299-3p的表达,将空载体质粒和miRNA-299-3p质粒分别转染入AGS细胞;利用CCK-8法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期及活性氧水平变化情况;Transwell法检测细胞迁移和侵袭情况;Western blot检测相关蛋白表达量变化情况。结果CCK-8实验表明,miRNA-299-3p的高表达抑制AGS细胞增殖(P<0.05);流式细胞术及Western blot结果显示,miRNA-299-3p的高表达能够诱导AGS细胞凋亡,caspase-3和Bax表达量升高,Bcl-2蛋白表达量降低(P<0.05);同时,miRNA-299-3p过表达后,能够下调CDK1/2和Cyclin B1蛋白的表达量,将AGS细胞周期阻滞在G_(2)/M期;Transwell小室及Western blot实验结果表明,miRNA-299-3p过表达使N-cadherin蛋白表达量降低,E-cadherin蛋白表达量升高从而抑制AGS细胞迁移;另外,miRNA-299-3p过表达能够上调AGS细胞中活性氧水平。结论过表达miRNA-299-3能够通过上调细胞内活性氧水平,抑制AGS细胞的增殖、诱导AGS细胞发生凋亡、将细胞周期阻滞在G_(2)/M期、抑制迁移,为miRNA-299-3p在胃癌研究中提供一定的理论基础。

关键词： 秸秆还田   残留效应   秸秆降解   微生物群落   网络分析  

摘要： 探究长期秸秆还田土壤残留效应对秸秆降解及微生物群落的影响.以连续15 a秸秆还田土壤(SS)和秸秆未还田土壤(NS)为研究对象,通过模拟试验分析两种土壤同时秸秆还田后秸秆的降解情况和土壤微生物种群的变化.采用沙袋法测定秸秆降解率,稀释涂布平板法测定土壤可培养微生物数量,高通量测序技术分析土壤微生物群落多样性和结构.结果表明,与NS相比,SS显著增加15 d和30 d秸秆降解率,增幅为14.16%和26.57%;显著增加0~60 d内土壤可培养真菌的数量,增幅为43.10%~185.92%;显著增加0 d和42 d和56 d时纤维素降解菌数量,增幅为55.12%~92.04%.秸秆还田7 d时,SS中的细菌ACE指数、真菌ACE指数和Chao1指数低于NS,说明SS土壤中微生物群落丰富度显著降低.在门水平上,SS中酸杆菌门、浮霉菌门和己科河菌门等细菌门相对丰度显著增加,增幅为25.92%~45.17%;油壶菌门、捕虫霉亚门和球囊菌门等真菌门相对丰度显著增加,增幅为12.09%~176.00%.在属水平上,SS中Subgroup6纲未定属和罗库菌目未定属等细菌属相对丰度显著增加,增幅为28.91%~31.26%;拟青霉菌属、被孢霉菌属和青霉菌属等真菌属相对丰度显著增加,增幅为2.98%~8.79%.分子生态网络分析表明,SS细菌网络互作程度更高、网络连接更紧密,真菌网络则呈现更加复杂和稳定的结构.RDA结果显示,土壤微生物群落组成与秸秆降解率呈极显著相关.SS对下茬还田秸秆的降解、土壤可培养微生物数量和种群结构变化在一定时间内表现出明显的残留效应,其微生物菌群更利于下茬还田秸秆的降解.

关键词： 马蔺   脱落酸   盐胁迫   气孔特征   光合作用  

摘要： 【目的】研究叶面喷施ABA对高浓度NaCl胁迫下马蔺生长、叶片气孔特征和光合性能的影响,筛选重度盐胁迫下提高马蔺耐盐性的适宜ABA浓度,为马蔺在重度盐渍土上栽培提供依据。【方法】以马蔺‘ML04’和‘ML35’种质为试验材料,测定叶面喷施ABA后NaCl胁迫马蔺幼苗生物量及叶片气孔密度和净光合速率等指标。【结果】2份马蔺种质幼苗在NaCl胁迫下均表现出盐害症状,且‘ML35’重于‘ML04’。喷施ABA增强了2份种质材料的耐盐性,并对‘ML04’耐盐性的增强效果更好。喷施ABA可显著增加高盐胁迫下马蔺的株高和生物量,通过调整叶片气孔的形态及其空间分布格局以优化气体交换过程,减小叶绿素含量的降幅和增强其光合性能等提高马蔺幼苗的耐盐性。【结论】高盐胁迫下马蔺种质‘ML35’盐害反应比‘ML04’严重;叶面喷施适宜浓度ABA可有效缓解盐胁迫对马蔺幼苗生长的伤害,并以2.5μmol/LABA喷施效果最佳。