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关键词： 主要恶性肿瘤   儿童癌症   神经母细胞瘤   尤文肉瘤   实体瘤   结构变异   骨肉瘤   基因组不稳定性  

摘要： 颅外实体瘤(包括神经母细胞瘤、尤文肉瘤和骨肉瘤)是导致儿童发病和死亡的主要恶性肿瘤类型。相比于成人癌症主要由外源性诱变剂或随年龄增长积累的DNA损伤驱动,儿童癌症的发生缺乏长期的突变积累过程。因此,内源性诱变过程可能是诱发儿童致癌突变的主要原因。然而,目前这些肿瘤的发生机制仍不清楚。

关键词： 脑出血   信号转导和转录激活因子3   Shh信号途径   神经损伤   细胞凋亡  

摘要： 目的探究信号转导和转录激活因子3(STAT3)调控音猬因子(Shh)信号途径对脑出血(ICH)引起神经细胞损伤的影响。方法将大鼠神经元PC12细胞分为对照组和ICH模型组,通过qRT-PCR和蛋白质印迹检测两组细胞中STAT3和Shh的mRNA和蛋白质表达水平,MTT分析两组细胞的增殖曲线,流式细胞术检测细胞的凋亡率。将BALB/c小鼠随机分为假手术组、ICH模型组、ICH+PBS组与ICH+Stattic组,通过HE染色评估各组小鼠脑损伤情况。使用干扰RNA技术敲降ICH模型组PC12细胞,分组为对照组、ICH模型组、ICH+shRNA阴性对照组、ICH+sh-STAT3组,并为证实STAT3对Shh的调控作用,同时敲降STAT3和Shh,设置ICH+sh-STAT3+sh-Shh组。此外,通过转染过表达载体增加ICH模型组PC12细胞中Shh的表达,分组为对照组、ICH模型组、ICH+空白载体对照组、ICH+Shh过表达组。采用MTT和流式细胞术检测以上各组增殖曲线和凋亡变化。结果在ICH模型组PC12细胞和ICH模型组小鼠脑组织中STAT3 mRNA和蛋白质表达水平增加(P<0.05),而Shh表达减少(P<0.05)。敲降STAT3减轻了ICH小鼠的脑损伤。敲降STAT3后,ICH模型中Shh信号相关蛋白(Shh,SMO和Gli-1)表达增加(P<0.05),ICH模型组PC12细胞的增殖增加(P<0.05),细胞凋亡率减少(P<0.05)。过表达Shh后促进ICH模型中PC12细胞的增殖(P<0.05),并且减少了细胞凋亡(P<0.05)。结论STAT3调控Shh信号途径影响ICH细胞模型中PC12细胞的增殖和凋亡水平。

关键词： 数字经济   数字创业生态系统   竞合机制   资源编排理论   案例研究  

摘要： 数字经济时代,随着新技术的不断迭代,新产业、新业态和新模式大量涌现,数字创业生态系统应运而生。研究表明,态势均衡的竞合机制对数字创业生态系统的平稳运行与持续演进至关重要,然而,尚未有学者深入探究该机制的形成演化过程。由此,基于资源编排理论,以浪潮科创中心为研究样本展开探索性单案例研究。研究发现:(1)数字创业生态系统竞合过程经历涌现、规范与更新三个阶段,通过资源数字化建构、捆绑与利用,推动在孵企业从资源数字结构化到能力化再到杠杆化发展;(2)在不同资源编排方式下,在孵企业的数字化创业过程支撑其竞合机制从依附式竞合到联盟式竞合演化,最终实现共生式竞合,产生成本效应、规模效应与创新效应。通过剖析数字创业生态系统孵化数字创业企业的跃升演进规律,揭示其中竞合机制的动态演化过程和内在机理,拓展资源编排理论的研究情境与理论内涵,为数字创业生态系统的建构提供理论指导与实践参考。

关键词： 非洲猪瘟病毒   p22蛋白   单克隆抗体   抗原表位  

摘要： [目的]采用原核表达系统表达并获得非洲猪瘟病毒(ASFV)p22重组蛋白,并进一步制备、鉴定p22重组蛋白的单克隆抗体。[方法]采用PCR方法扩增ASFV p22蛋白编码基因,构建重组表达质粒pET-28a(+)-p22,并通过IPTG诱导表达p22蛋白。将纯化后重组蛋白免疫小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合制备单克隆抗体。通过Western blotting鉴定单克隆抗体特异性,通过ELISA方法测定腹水效价;利用在线软件预测p22蛋白抗原表位分布情况并合成重叠多肽,通过Dot blotting鉴定抗体识别的抗原表位。[结果]本研究成功构建了p22重组蛋白的原核表达质粒,获得原核系统表达的p22重组蛋白,分子质量约为22 ku。用纯化后p22蛋白作为免疫原免疫小鼠,成功筛选到4株阳性单克隆杂交瘤细胞株,分别为1G3D7G11、2G5H6H8、6D10G7D6和8F6F8B9,其腹水效价均达到1∶500 000。Western blotting结果显示,4株单克隆抗体均能与p22蛋白发生特异性反应。单克隆亚型鉴定结果显示,1G3D7G11、2G5H6H8和6D10G7D6株单克隆抗体的重链均为IgG1类,8F6F8B9株单克隆抗体的重链为IgG2a类,4株单克隆抗体轻链均为Kappa型。Dot blotting检测结果显示,1G3D7G11、2G5H6H8株单克隆抗体识别抗原表位位于第58—89位氨基酸处;8F6F8B9株单克隆抗体识别抗原表位位于第126—150位氨基酸处。[结论]本研究成功制备了4株ASFV p22蛋白的单克隆抗体,并初步鉴定了单克隆抗体所识别的B细胞表位区间。研究结果为p22蛋白的生物学功能研究和ASFV血清学检测提供了参考依据。

关键词： 年龄鉴定   甲壳动物   生长带   眼柄   胃磨  

摘要： 【背景】甲壳动物是渔业和水产养殖业中一类具有重要商业价值的生物资源。近些年来,由于某些传统渔业的衰退和人类对高蛋白食物需求的增长,甲壳动物如蟹、龙虾、虾、磷虾等资源被大量开发。因此,亟需发展甲壳动物的资源评估和管理工作,以维持其资源的可持续发展,但甲壳动物年龄鉴定的困难阻碍了这项工作的开展。目前,鉴定甲壳动物年龄的方法有许多种,主要包括饲养法、标记重捕法、体长频次法、脂褐素分析法、放射性同位素法以及硬组织生长带计数法等,其中硬组织生长带计数法被广泛应用,备受关注。【进展】基于以上背景,本文首先介绍了甲壳动物的生物学特性和硬组织结构,阐述利用硬组织生长带计数法鉴定水生甲壳动物年龄的主要实验过程,与以往水生甲壳动物年龄鉴定方法进行对比,分析该方法的优点和缺点,并对利用硬组织生长带分析水生甲壳动物年龄与生长的研究进展进行回顾,对该方法未来需要进一步解决的问题和发展方向作出展望。【展望】在未来水生甲壳动物年龄鉴定的工作中,需进一步了解生长带沉积机制,准确掌握硬组织生长带的计数,深入分析所获得的实验数据,并开展相关的验证实验等。【意义】本文可为水生甲壳动物的年龄鉴定工作提供一个系统的参考。

关键词： 玉米矮花叶病毒   反转录重组酶介导等温核酸扩增(RT-RAA)技术   CRISPR/Cas12a   侧向流动试纸条  

摘要： 玉米矮花叶病毒(Maize dwarf mosaic virus,MDMV)是一种重要的检疫性病毒,严重影响玉米的生产。为了有效防治玉米矮花叶病,本研究基于反转录重组酶介导等温核酸扩增(RT-RAA)技术和CRISPR/Cas12a系统构建了一种MDMV快速检测方法,将所有试剂集中在一个试管中进行反应,并通过侧向流动试纸条(LFD)检测反应结果。本研究筛选得到的最佳反应条件为,引物添加量2.8μL、FB报告分子浓度100 nmol/L、RT-RAA系统反应时间20 min、CRISPR/Cas12a系统反应时间20 min。本研究构建的基于RT-RAA和CRISPR/Cas12a的一管式玉米矮花叶病毒快速检测方法特异性强、灵敏度高,且所用试验材料方便携带和运输,适用于现场检测。

关键词： 美登木素   人甲状腺癌细胞   细胞凋亡   自噬  

摘要： 目的探究美登木素对人甲状腺癌细胞C643增殖、侵袭、迁移、凋亡和自噬的影响。方法采用不同浓度(0.049、0.195、0.781、3.125、12.5、50、200μmol/L)的美登木素溶液处理C643细胞,磺酰罗丹明B(sulforhodamine B,SRB)法检测美登木素对C643细胞增殖的影响,并确定后续实验加药浓度。取对数生长期的C643细胞,分为对照组、美登木素低剂量组、中剂量组及高剂量组,通过细胞划痕实验和Transwell小室实验检测美登木素对C643细胞侵袭和迁移能力的影响;2′,7′-二氢二氯荧光素二乙酸酯(2,7-dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)荧光探针实验检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测细胞中凋亡及自噬相关蛋白的表达水平。结果SRB法检测结果显示,浓度为0.049、0.195、0.781、3.125、12.5、50、200μmol/L的美登木素溶液均能抑制C643细胞增殖(P<0.05),且呈明显的浓度-时间依赖性,24、48和72 h的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC 50)分别为54.255、5.193和0.647μmol/L;细胞划痕实验和Transwell小室实验结果显示,浓度为0.1、1、10μmol/L的美登木素溶液能浓度依赖性地降低C643细胞的迁移(P<0.05)和侵袭能力(P<0.01);荧光探针实验结果显示,浓度为0.1、1、10μmol/L的美登木素溶液能浓度依赖性地升高C643细胞内ROS水平(P<0.01);流式细胞术结果显示,浓度为0.1、1、10μmol/L的美登木素溶液能浓度依赖性地升高C643细胞凋亡率(P<0.01);Western blot实验结果显示随着美登木素浓度的增加,C643细胞内凋亡相关蛋白Bax表达水平升高(P<0.05),Bcl-2表达水平降低(P<0.05),同时自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ(P<0.05)和Beclin-1(P<0.01)的表达水平升高,p62表达水平降低(P<0.001)。结论美登木素可以抑制人甲状腺癌C643细胞增殖、侵袭和迁移,并可通过升高细胞内ROS水平诱导细胞凋亡和自噬协同作用。

关键词： 活性污泥法   煤化工污水   微生物群落   结构   功能优化策略  

摘要： 随着煤化工行业的快速发展,其生产过程中产生的污水对环境造成了严重的威胁。煤化工污水通常含有高浓度的有机物、酚类化合物以及重金属等复杂污染物,传统的物理化学处理方法难以高效去除这些污染物。因此,基于微生物降解的活性污泥法被广泛应用于煤化工污水的处理中。活性污泥法利用微生物的代谢活动,通过吸附、降解和转化等过程,能够有效去除污水中的有机物和重金属等污染物,具有处理效率高、成本低和可资源化利用等优点。然而,煤化工污水的复杂性和毒性给活性污泥系统的稳定运行带来了巨大挑战。微生物群落结构作为活性污泥系统的核心组成部分,其多样性和功能性直接影响系统的处理效能。因此,研究活性污泥法处理煤化工污水的微生物群落结构,并对其功能进行优化,成为提高系统处理效能的关键。

关键词： 老年   呼吸系统疾病   乳酸化修饰   细胞代谢   表观遗传学   治疗   进展  

摘要： 呼吸系统疾病已成为老年群体中主要的健康挑战之一。糖酵解在厌氧和有氧条件下均可产生乳酸,主要为L-乳酸, D-乳酸源自饮食[1]。乳酸在能量代谢中扮演着重要角色,还通过蛋白质翻译后修饰参与细胞代谢调控及生物学效应[2]。乳酸化修饰通过与组蛋白赖氨酸残基的共价结合调控基因转录及表观遗传,影响细胞代谢和功能,并在生理、病理状态下参与细胞发育和决策。