关键词:
激素性股骨头坏死
细胞凋亡
烟酸
成骨细胞
Wnt/β-catenin信号通路
摘要:
目的:成骨细胞凋亡是激素性股骨头坏死(Steroid Induced Avascular Necrosis of Femoral Head,SANFH)的关键机制。研究表明,烟酸具有抗凋亡和促进成骨的能力。本研究旨在探讨烟酸(Niacin,NA)对SANFH过程中成骨细胞凋亡的影响,以阐明NA治疗SANFH的具体机制。方法:在体外试验中,使用MC3T3-E1细胞和地塞米松(Dexamethasone,DEX)构建SANFH细胞模型。采用CCK-8实验筛选NA的最适浓度,并探究NA和DEX对成骨细胞活力的影响。通过Annexin V/PI双染流式细胞术测量各组细胞的凋亡率,采用RT-PCR和Western Blot实验检测各组细胞中Wnt/β-catenin信号通路基因以及凋亡基因BCL-2、Caspase3的表达水平。使用碱性磷酸酶染色实验探究各组细胞的成骨能力。在体内实验中,将30只SD大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只。模型组和治疗组使用糖皮质激素和内毒素进行模型诱导,模型组后续给予等量生理盐水灌胃,治疗组给予NA灌胃。4周后处死大鼠,取出股骨头,通过HE染色观察病理学变化,通过TUNEL染色观察骨组织凋亡情况。结果:体外试验表明,NA能够减轻DEX引起的成骨细胞增殖抑制及凋亡增加。当NA浓度小于200μmol/L时,可促进成骨细胞增殖,且在100μmol/L时促进作用最大。RT-PCR和Western Blot结果显示,与DEX组相比,NA能够增加Wnt1、β-catenin及抗凋亡基因BCL-2的表达,并降低促凋亡基因Caspase3的表达。碱性磷酸酶染色结果表明,NA能够明显减轻DEX引起的成骨能力降低。随着通路抑制剂的加入,NA的治疗作用效果减弱。体内实验结果显示,与对照组相比,模型组骨小梁明显稀疏变细,并有断裂现象,骨髓细胞数量明显减少,空骨陷窝率显著增加,且TUNEL染色阳性细胞率明显升高。治疗组的骨小梁形态结构虽较对照组稀疏,但与模型组相比更为紧密,且骨髓细胞数量有所恢复。此外,空骨陷窝率和TUNEL染色阳性细胞率也明显低于模型组。结论:NA能够通过激活Wnt/β-catenin信号通路,减少成骨细胞凋亡,从而治疗SANFH。