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关键词： 补阳还五汤   缺血性脑卒中   羟基红花黄色素A   苦杏仁苷   OGD/R   细胞凋亡   细胞焦亡   神经元  

摘要： 补阳还五汤(BYHWD)作为中医药治疗缺血性脑卒中(CIS)的经典方剂之一,其疗效早已得到临床验证,但其物质基础及作用机制尚未系统阐明。该研究运用网络药理学和分子对接技术,分析BYHWD入血入脑有效成分在CIS的病理过程,针对细胞凋亡所涉及的潜在作用靶点及作用机制,并进行细胞实验验证,选取羟基红花黄色素A(HSYA)、川芎嗪(TMP)、黄芪甲苷(AS-Ⅳ)、苦杏仁苷(AMY)、芍药苷(PF)5种有效成分作为BYHWD药效的研究对象。以HT22细胞为实验对象,cell counting kit-8(CCK-8)法检测药物不良反应,构建糖氧剥夺/复糖复氧(OGD/R)细胞模型,以细胞凋亡与细胞焦亡作为主要筛选标准,检测乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽(GSH)水平评估细胞膜完整性,流式细胞术检测细胞凋亡,半胱天冬酶(caspase)-3与caspase-1酶活性检测细胞凋亡与细胞焦亡,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞焦亡因子[白细胞介素(IL)-1β、IL-18]水平,由此明确HSYA和AMY对细胞凋亡和细胞焦亡的显著调节作用。通过TUNEL法检测细胞凋亡率、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、caspase-3]表达水平,结果 HSYA联合AMY组抗凋亡效应优于单独用药组。分子对接结果显示,HSYA和AMY与基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)、CXC趋化因子受体4(CXCR4)蛋白靶点展现出显著结合力。引入CXCR4特异性抑制剂(AMD3100)进行干预,采用Western blot检测凋亡相关蛋白以及SDF-1α和CXCR4蛋白表达水平,证实这2种活性成分能够通过调控SDF-1α/CXCR4信号通路,影响细胞凋亡。

关键词： 处理后医院污水   诺如病毒   多样性分析   分子病原学   变异位点  

摘要： 目的 通过检测柳州市处理后医院污水中诺如病毒，了解当地诺如病毒的流行情况和分子病原学特征，为腹泻疫情防控提供科学依据。方法 采集2016—2022年柳州市处理后医院污水样本，经病毒富集后提取核酸并纯化，用实时荧光逆转录-聚合酶链式反应（real-time quantitative reverse transcription PCR, real-time RT-PCR）进行诺如病毒（Norovirus, NoV）核酸检测，阳性样本对主要结构蛋白VP1区基因序列进行高通量测序，使用NCBI等在线数据库进行比对分析，采用MEGA11.0构建进化树，DNAStar5.0对核苷酸序列同源性及氨基酸序列变异位点分析。结果 742份样本检出251份诺如病毒，检出率为33.83%，其中GⅠ为138份，检出率为18.60%，各年度检出率差异有统计学意义（χ2=41.403,P<0.05）,GⅡ为176份，检出率为23.72%，各年度检出率差异有统计学意义（χ2=34.524,P<0.05）。高通量测序结果显示，2016—2022年柳州市的诺如病毒基因型以GⅠ.4、GⅠ.5、GⅡ.2、GⅡ.3、GⅡ.4、GⅡ.12、GⅡ.17等7种亚型为主，其他亚型均为散发毒株。GⅠ同源性为71.8%～100.0%,GⅡ同源性为68.8%～100.0%。对诺如病毒VP1区的氨基酸序列变异分析，GⅡ.3亚型存在14个氨基酸变异位点，而GⅡ.4亚型非变异株存在8个氨基酸变异位点，其他亚型的VP1区氨基酸序列变异位点均在5个以内，GⅠ.4和GⅡ.17亚型的VP1区氨基酸序列未观察到变异。结论 柳州市诺如病毒的流行情况呈多样化发展，污水监测对于早期发现和预警传染病疫情具有重要的公共卫生意义。

关键词： 浮溪村   药用植物   种类调查   资源分布  

摘要： 目的 摸清黄山区汤口镇浮溪村常见药用植物资源情况，旨在准确了解该地区药用植物的种类、类群组成及分布情况，为各高校实践教学、区域内药用植物资源保护及合理开发利用提供科学依据。方法根据第四次全国中药资源普查技术方案，以中药资源普查技术规范为指导，采用野外调查、标本采集和鉴定、拍摄图片及文献查阅和分析整理等方法对浮溪村常见药用植物的种类组成、生活型、药用部位、物种保护等多方面进行研究。结果 经鉴定和查证，本次调查共统计出该地区分布药用植物165科658属1 194种，其中蕨类植物70种分属24科，裸子植物13种分属6科，被子植物1 111种分属135科；以菊科、唇形科、豆科植物居多；生活型以草本居多，占比48.49%；药用部位以全草居多，占比35%；国家保护植物27种，占比2.26%。结论 本次调查探明了浮溪村常见药用植物资源的种类和分布情况，为该地区药用植物资源保护及开发利用策略的制定提供基础数据参考和科学依据。

关键词： PRRSV   PRRSV1   ORF5基因   全基因测序   遗传进化分析  

摘要： 为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒种1(porcine reproductive and respiratory syndrome virus 1,PRRSV1)在河南省的流行情况，本研究对河南省部分规模化猪场临床病料进行分子流行病学调查与病毒分离鉴定。利用PRRSV1 ORF5基因特异性引物进行RT-PCR检测与序列测定，结果共检测出PRRSV1阳性样品8份，获得ORF5基因序列6个，全基因序列1个。利用PAM细胞成功分离出1株PRRSV1,命名为HENZMD-10。对分离毒株基因遗传变异分析，获得的6个ORF5基因均为PRRSV1,分离毒株ORF5基因遗传变异较大，遗传进化树上分属于不同的分支。其中，HENJZ-11、HENJY-7、HENJY-8遗传进化距离较近，分属于同一分支。HENZMD-10分离株基因组全长为15 071 bp,核苷酸序列比对与LV毒株核苷酸相似性为89.1%;与PRRSV2 ATCC-VR2332毒株核苷酸相似性为62.1%;与美国NADC30毒株核苷酸相似性为61.5%;与国内JXA1毒株核苷酸相似性为61.6%。全基因组遗传进化分析显示，HENZMD-10与国内分离PRRSV1毒株NVDC-NM1-2011、LNEU12和FJEU13毒株的遗传距离较近。结果表明，本试验通过对河南省PRRSV1的分子流行病学调查以及病毒全基因遗传进化分析，成功分离1株PRRSV1,为PRRSV1在国内的流行动态及其防控提供一定的临床指导意义。

关键词： 溶致液晶   表面增强拉曼散射   拉曼光谱   新冠病毒刺突蛋白   高灵敏检测  

摘要： 基于溶致液晶制备银纳米花的表面增强拉曼光谱（Surface-Enhanced Raman Spectroscopy, SERS）基底，实现了对新冠病毒刺突蛋白（S蛋白）的定量检测。首先设计新冠病毒的拉曼光谱检测方案，并利用溶致液晶软模板和电化学沉积技术制备SERS基底。然后，研究了SERS基底的光谱一致性和不同基底的检测差异，为新冠病毒的定量检测提供技术保障。接着，分析了SERS基底对S蛋白的检测灵敏度，其检出限为2×10-6 mg/mL。最后，研究新冠病毒的定量检测方法，得到S蛋白浓度与表面增强拉曼光谱强度之间的定量关系，并得出检测模型的测量误差为4×10-7 mg/mL。本文基于溶致液晶制备SERS基底的技术为新冠病毒刺突蛋白高灵敏的定量测量提供了依据，也为其他蛋白的检测提供了可行的技术途径。

关键词： 外出务工   艾滋病病毒感染者   流出地抗病毒治疗   质性研究   扎根理论  

摘要： 目的 探索外出务工HIV感染者选择流出地cART的原因，为今后实施流出地cART模式提供依据。方法 2024年1月期间在昭通市龙泉社区卫生服务中心和昭通市第一人民医院选取治疗随访的外出务工HIV感染者进行半结构化访谈，使用R4.3.2对访谈资料进行词频分析，运用扎根理论进行开放式编码、主轴编码和选择性编码，提炼出选择流出地cART的原因，并构建理论模型。结果 共访谈了26名外出务工HIV感染者，面对面访谈23名，电话访谈3名。共提炼出3个核心范畴，分别是个体特征、社区支持、就医背景，其中个体特征是影响外出务工HIV感染者选择流出地cART的核心原因，社区支持是关键因素，就医背景是潜在原因。结论 外出务工HIV感染者选择流出地cART这个行为是由多种原因共同作用决定的，后续可以从原因出发，寻找关键节点，探索更适合的管理方式，提高治疗依从性和治疗有效率。

关键词： 硫氧还蛋白-1   镉暴露   腺相关病毒   肝损伤   铁死亡  

摘要： 目的 探讨腺相关病毒（adeno-associated virus, AAV）上调肝组织中硫氧还蛋白1（thioredoxin1, Trx1）表达对镉（Cadmium, Cd）暴露诱导的小鼠肝损伤与肝细胞铁死亡的影响。方法 24只雄性C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为对照组、Trx1组、Cd组和Trx1+Cd组，每组6只，通过尾静脉注射AAV建立Trx1过表达动物模型，给予腹腔注射2 mg/kg氯化镉（cadmium chloride, CdCl2）建立Cd暴露模型。在Cd暴露24 h后麻醉并处死小鼠，进行免疫荧光染色，采用免疫蛋白印迹法与实时荧光定量聚合酶链式反应（quantitative real-time polymerase chain reaction, qPCR）检测小鼠肝脏Trx1表达；检测血清中丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase, ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase, AST）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）和总胆红素（total bilirubin, TBIL）含量；检测肝组织中丙二醛（malondialdehyde, MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）、过氧化氢酶（catalase, CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase, GSH-Px）的含量；采用苏木精-伊红染色观察肝组织病理改变，透射电镜观察肝细胞线粒体形态变化；免疫蛋白印迹法检测小鼠肝组织中铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4 （glutathione peroxidase 4,GPX4）、核因子E2相关因子2 （nuclear factor erythroid-2-related factor 2, NRF2）、血红素加氧酶1 （heme oxygenase 1, HO-1）、溶质载体家族7成员11 （solute carrier family 7 member 11, SLC7A11）、前列腺素内氧化酶还原酶2 （prostaglandin endoperoxide synthase 2, PTGS2）蛋白表达。结果 与对照组比较，Trx1组小鼠肝组织中Trx1蛋白和mRNA表达水平显著升高（P<0.05）。与Cd组小鼠比较，Trx1+Cd组小鼠血清中ALT、AST和LDH水平下降，肝组织中MDA水平下降，SOD、CAT和GSH-Px含量升高（P均<0.05）;肝细胞坏死及炎性浸润程度降低；线粒体皱缩程度缓解，双层膜密度降低，线粒体基质肿胀减轻。与Cd组小鼠比较，Trx1+Cd组小鼠肝组织中GPX4、NRF2、HO-1和SLC7A11蛋白表达水平升高（P均<0.05）,PTGS2蛋白表达水平下降（P<0.01）。结论 AAV过表达Trx1可以改善Cd暴露引起的肝损伤和氧化应激，其机制可能与激活SLC7A11/GPX4信号通路、抑制肝细胞铁死亡有关。

关键词： 艾滋病   抗病毒治疗   生存分析  

摘要： 目的 了解2005―2023年兰州市艾滋病（acquired immunodeficiency syndrome, AIDS）患者抗病毒治疗后的生存状况、治疗效果及影响因素。方法 采用回顾性队列研究方法，收集2005―2023年兰州市接受抗病毒治疗的2 766例患者信息，应用寿命表法计算研究对象的死亡概率、生存概率和累积生存率；利用Kaplan-Meier法计算研究对象截止观察终点的平均生存时间，并采用Log-rank法检验其差异有无统计学意义。采用Cox比例风险回归模型进行单因素与多因素分析。构建列线图模型，预测抗病毒治疗预后。结果 患者平均确诊年龄为（38.14±13.01）岁，中位随访时间为63（31, 93）月，第1、3、5、10年的累积生存率分别为98.46%、97.44%、96.99%、95.86%,总病死率为1.27/100人年，AIDS相关病死率为0.57/100人年，多因素Cox比例风险回归模型分析结果显示，基线CD4+T淋巴细胞（简称CD4）计数、最近病毒载量检测值、目前WHO临床分期是研究对象生存时间的影响因素（均P<0.05）,其中基线CD4计数≥400个/μL组（HR=0.443, 95%CI:0.291～0.673,P<0.001）死亡风险较低，最近病毒载量检测值≥1 000 copies/mL组（HR=12.725, 95%CI:6.548～24.729,P<0.001）、WHO临床分期Ⅳ期组（HR=3.517, 95%CI:1.785～6.932,P<0.001）死亡风险较高。纳入上述3个影响因素构建列线图模型，模型区分度C-index=0.892（95%CI:0.847～0.934）,表明模型有良好的预测能力。结论 2005―2023年兰州市AIDS患者抗病毒治疗效果较好，患者生存率和病毒学抑制率较高。疾病初期进行规范治疗是降低患者死亡风险、提高生存率的关键举措。

关键词： 牛传染性鼻气管炎病毒   荧光定量PCR   gB和gE基因   检测  

摘要： 为了检测牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）,根据IBRV gE和gB基因保守序列分别设计一对特异性引物，构建重组质粒作为标准品，经优化反应体系和反应条件建立了IBRV gE和gB基因的SYBR GreenⅡ荧光定量PCR检测方法。以建立的荧光定量PCR方法检测重组质粒标准品pUC57-gE、pUC57-gB,结果显示浓度在10～8～10～4拷贝/μL时与Ct值有良好的线性关系，线性相关系数R2分别为0.997、0.996;该方法对重组质粒标准品pUC57-gE、pUC57-gB的最低检测限分别为4.74×10～2拷贝/μL、2.60×10～2拷贝/μL,敏感性较高；利用该方法检测IBRV、牛病毒性腹泻病毒（BVDV）、伪狂犬病病毒（PRV）、牛冠状病毒（BCoV）、巴氏杆菌、大肠埃希氏菌，只有IBRV检测为阳性，说明该方法特异性强；重复性试验结果显示批内、批间变异系数均低于1.5%,稳定性高。利用该方法和荧光定量PCR试剂盒分别对58份牛鼻拭子样品进行检测，结果显示两种方法符合率达98.3%。该方法具有强稳定性和高敏感性的特点，能为IBRV的检测和鉴别IBRV野毒株与gE基因缺失苗株提供技术支撑。

关键词： 一站式服务门户   搜索引擎   推荐引擎   服务生态  

摘要： [目的/意义]构建图书馆一站式读者服务生态系统具有提升用户体验、增强用户粘性，充分发挥资源效益，提高资金效能，指导资源建设，提供决策依据等较为深远的意义。[方法/过程]采用文献综述和案例分析等方法，以技术革新和读者需求变化为出发点，分析现有服务的痛点，以北京大学图书馆为例探讨系统的构建，详细分析该平台的关键要素：一站式服务门户、整合资源的搜索引擎、智能的推荐引擎和读者参与的服务生态等基本点。同时，介绍系统的整体规划、设计理念、系统结构、实施技术路线和系统的应用成效。[结果/结论]北京大学图书馆通过构建一站式读者服务生态系统，运用新技术实现了高效能服务和创新性服务的建设，以期为其他图书馆提供参考借鉴。