关键词:
吡唑类衍生物
头颈癌
细胞凋亡
活性氧
线粒体膜电位
摘要:
目的 探讨新型吡唑[1,5-a]嘧啶衍生物(BPPA)对人舌鳞状癌细胞Cal33的抗肿瘤活性及作用机制。方法 将Cal33细胞分为空白组(正常培养)、低、中、高剂量实验组(1、2.5、5μmol·L-1BPPA)及联合组[2.5μmol·L-1BPPA和5 mmol·L-1N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)]。用噻唑蓝法检测BPPA对肿瘤细胞的存活率;用流式细胞术检测细胞的凋亡情况;用蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白相对表达水平;用免疫荧光分析活性氧及线粒体膜电位的变化情况。结果 空白组、低、中、高剂量实验组及联合组的Cal33细胞存活率分别为(99.56±0.91)%、(58.31±2.31)%、(47.93±1.67)%、(29.35±4.11)%和(70.27±1.21)%,凋亡率分别为(8.07±1.01)%、(44.04±0.94)%、(49.85±1.75)%、(66.79±0.83)%和(24.33±1.04)%;活性氧检测的相对荧光强度分别为1.23±0.21、3.37±0.35、15.53±1.46、20.28±1.24和5.59±0.52,线粒体膜电位红色荧光/绿色荧光值分别为4.69±0.11、4.24±0.12、0.86±0.16、0.46±0.05和2.99±0.11。低、中、高剂量实验组上述指标与空白组比较,联合组上述指标与中剂量实验组比较,在统计学上差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.001)。空白组和低、中、高剂量实验组促凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2基因相关X蛋白(Bax)相对表达水平分别为1.00±0.02、1.94±0.03、3.73±0.06和4.64±0.08,同时抑制凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2基因蛋白(Bcl-2)的相对表达水平分别为1.00±0.02、0.75±0.04、0.62±0.02和0.46±0.03。低、中、高剂量实验组上述指标与空白组比较,在统计学上差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.001)。结论 化合物BPPA具有抗头颈癌活性,其机制是通过促进活性氧生成介导线粒体膜电位降低诱导细胞凋亡导致肿瘤死亡。