关键词:
BCAT1
肾小管上皮细胞
P53
细胞凋亡
摘要:
目的 探讨支链氨基酸氨基转移酶1(branched chain amino acid aminotransferase-1,BCAT1)调控肾小管上皮细胞(tubular epithelial cell,TEC)损伤的作用和机制。方法 从C57BL/6J小鼠肾组织中分离并培养TEC。通过腺病毒转染TEC分别实现BCAT1过表达和敲低;通过过氧化氢(hydrogen dioxide,H2O2)处理诱导TEC凋亡;通过CCK-8评估TEC细胞活力;通过检测Cleaved-caspase3表达水平和原位末端转移酶标记(TdT-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL)染色评估TEC凋亡;使用P53抑制剂PFT-1α阻断P53信号评估其在BCAT1调节TEC损伤中的作用。结果 在H2O2处理的TEC中,BCAT1 mRNA和蛋白水平均显著降低(均P <0.01)。沉默BCAT1后,H2O2诱导的TEC凋亡显著加重(均P <0.01);而过表达BCAT1显著减轻了H2O2诱导的TEC凋亡(均P <0.01)。沉默BCAT1导致H2O2处理的TEC中P53下游基因表达水平进一步升高,提示沉默BCAT1进一步激活了P53信号(均P <0.05)。P53抑制剂PFT-1α可以明显消除由沉默BCAT1导致的P53信号活化和TEC凋亡(均P <0.01)。结论 BCAT1通过P53信号调控H2O2诱导的TEC损伤,可能是一个防治慢性肾脏病有潜力的治疗靶点。