关键词:
3-溴丙酮酸
索拉非尼
肝癌
细胞凋亡
Mcl-1
PARP
摘要:
目的:探讨3-溴丙酮酸(3-bromopyruvate,3-BrPA)增强索拉非尼(sorafenib,SOR)对人肝癌细胞SMMC7721、HepG2存活、增殖、凋亡的影响及其机制。方法:将实验分成对照组、3-BrPA组、SOR组、3-BrPA+SOR组,MTT法检测3-BrPA、SOR以及3-BrPA联合SOR对SMMC7721、HepG2细胞的增殖抑制作用,集落克隆实验检测SMMC7721、HepG2细胞集落形成,PI单染检测肝癌细胞凋亡;JC-1检测肝癌细胞线粒体膜电位;ATP检测试剂盒检测肝癌细胞胞内ATP水平;Western blot检测肝癌细胞Mcl-1、PARP蛋白表达。采用HepG2细胞建立裸鼠种植瘤模型,进一步验证联合后的体内抗肿瘤效果。结果:与SOR组相比,3-BrPA+SOR组SMMC7721、HepG2细胞存活率明显降低,凋亡率显著升高,线粒体膜电位降低,胞内ATP水平显著下降;Western blot结果显示,与对照组相比,3-BrPA、SOR明显下调SMMC7721、HepG2细胞Mcl-1表达,PARP蛋白剪切增加。与3-BrPA组、SOR组相比,3-BrPA+SOR组SMMC7721、HepG2细胞Mcl-1表达下调,PARP蛋白剪切增加。裸鼠种植瘤实验显示,与SOR组相比,3-BrPA+SOR组肿瘤明显变小,肝脏和肾脏组织结构正常,未发现明显肝肾损伤。结论:3-BrPA增强SOR对肝癌细胞的增殖抑制作用,增强SOR诱导SMMC7721、HepG2细胞凋亡,其机制可能与下调Mcl-1蛋白表达有关。