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摘要： 大家好，我是流感君。冬春季节可是我传播的高发季。既然已经被你们抓住了，那我就好好介绍一下自己。我属于正黏病毒科，是一种有包膜的病毒。根据内部的核蛋白和基质蛋白抗原性的不同，我能分为A、B、C、三型，也可以称为甲、乙、丙三型。A型流感病毒宿主范围广泛，能感染包括人及多种动物（如猪、马、狗、禽类和海豹等），并多次引起世界性的人流感大流行。

关键词： 自然杀伤细胞   细胞治疗   嵌合抗原受体NK细胞免疫疗法  

摘要： 自然杀伤细胞（NK细胞）是天然免疫系统的一部分，可以不受主要组织相容性复合体（MHC）限制识别并消除异常细胞，在机体抗肿瘤、抗病毒、免疫调节中发挥着重要作用，因此NK细胞治疗在免疫细胞治疗领域颇有前景。嵌合抗原受体NK细胞治疗（CAR-NK）增加了NK细胞的靶向性和功能活性，进一步提升了NK细胞杀伤潜力，是当前及未来NK细胞治疗领域的研究热点。现阶段NK细胞治疗已在抗肿瘤、抗病毒及自身免疫性疾病中开展诸多临床试验。本文总结了当前NK细胞治疗在临床应用的研究现况，表明了NK细胞治疗是一项极具潜力的免疫细胞疗法，尽管面临着细胞持久性和肿瘤微环境抑制等挑战，但这一领域的发展前景依然广阔。

关键词： 柯萨奇病毒A16型   Vero细胞   病毒培养   关键工艺参数   关键质量属性  

摘要： 目的 优化柯萨奇病毒A16型（Coxsackievirus A16,CV-A16）培养工艺，并比较CV-A16收获液不同质量属性，以期确定关键质量属性（critical quality attribute,CQA），为CV-A16疫苗的制备工艺和质量控制方法的研发奠定基础。方法 以Vero细胞为基质，病毒滴度和实壳病毒颗粒抗原含量（1H5抗原）为评价指标，优化CV-A16接种的细胞生长阶段（对数期中、对数期末、平台期）、MOI(0.01、0.001、0.000 1)、培养基类型（无血清M199、DMEM、50%M199+50%DMEM）、培养基血清浓度（无血清及含1%、2%新生牛血清）及培养温度（33、35和37℃），并进一步在T25细胞瓶和10层细胞工厂中验证优化工艺。分析病毒滴度、实壳病毒颗粒抗原含量（1H5、20E8抗原）及中和表位抗原含量（3H4抗原）与免疫原性的相关性，以确定CQA。结果 经单因素试验及扩大规模培养验证确定CV-A16最佳培养条件为：按MOI=0.001接种至对数期末的Vero细胞，采用无血清M199培养基于33℃培养。于4种培养条件（无血清DMEM培养基于33℃培养6 d、无血清M199培养基于33℃培养6 d、无血清DMEM培养基于37℃培养4 d、无血清M199培养基于37℃培养4 d）下获得CV-A16收获液的实壳病毒颗粒抗原含量（1H5和20E8抗原）差异较大，与病毒收获液的中和抗体滴度变化趋势不同；4种工艺条件下获得CV-A16收获液的病毒滴度及中和表位抗原含量（3H4抗原）变化较小，且与中和抗体滴度变化趋势相同。结论 以免疫原性质量属性（中和抗体滴度）作为筛选依据，病毒滴度和中和表位抗原含量（3H4抗原）可作为CV-A16病毒收获液的CQA，实壳病毒颗粒抗原含量（1H5和20E8抗原）可用于CV-A16生产质量控制过程中病毒颗粒的分析研究。

关键词： 辣椒斑驳病毒   酵母体内重组   基因组   侵染性克隆   反向遗传学  

摘要： 辣椒斑驳病毒(Pepper mottle virus, PepMoV)是马铃薯Y病毒属(Potyvirus)的成员，能够侵染辣椒(Capsicum annuum)、番茄(Solanum lycopersicum)等重要茄科作物。本研究利用小RNA测序技术，在浙江省杭州市的辣椒样品中成功检测到PepMoV。通过RT-PCR技术扩增其基因组，获得长度为9 640个核苷酸的全长基因组序列。为了克服PepMoV侵染性克隆构建过程中面临的大片段拼接困难及基因组含有大肠杆菌(Escherichia coli)致死基因等问题，采用酵母(Saccharomyces cerevisiae)体内同源重组技术，将5个DNA片段在酵母中一步组装成PepMoV病毒的全长侵染性克隆。重要的是，酵母质粒可以直接转化入农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)并进行浸润接种，从而避免了大肠杆菌克隆步骤及其相关的毒性问题。结果表明，与传统的酶切连接方法相比，该构建策略将所需时间从数月缩短至仅1周，获得的PepMoVHZ病毒侵染性克隆能够有效感染本氏烟草(Nicotiana benthamiana)，并且发病症状明显。PepMoV病毒侵染性克隆的成功构建不仅为建立该病毒的快速检测方法提供了阳性样品对照，而且为深入研究该病毒的基因功能及其与寄主的相互作用机制提供了重要的实验材料和手段。

关键词： acclimation at 37 °C   characteristic of growth   SCC cell line   sensitivity   Siniperca chuatsi  

摘要： The SCC-37 cell line was established via acclimation, and the impact of this process on cell characteristics was analyzed. Additionally, the sensitivity of these cells to viruses was assessed, thereby reducing culture costs and laying the groundwork for large-scale vaccine production. In this study, a continuous cell line was derived from the spinal cord tissue of mandarin fish, Siniperca chuatsi, using a gradual acclimation process with a serum gradient. The origin of the cell line, mycoplasma contamination status, growth characteristics, and viability after cryopreservation were evaluated. Furthermore, the sensitivity to infectious spleen and kidney necrosis virus (ISKNV), S. chuatsi ranavirus (SCRaV), and S. chuatsi rhabdovirus (SCRV) was examined. The cell line, designated SCC-37, has been successfully cultured for up to 30 passages in complete medium (L-15+10%NBCS) at 37 °C. The S. chuatsi origin of SCC-37 was confirmed through the S. chuatsi 28S rRNA gene. Mycoplasma testing verified that SCC-37 is free of contamination. Sensitivity experiments demonstrated that ISKNV, SCRaV, and SCRV can proliferate and be passaged stably in SCC-37, with virus titers ranging from 10^3.4 to 10^9.6 TCID₅₀/mL. Electron microscopy revealed a high abundance of virus particles in SCC-37 cells. In summary, the newly acclimated SCC-37 cell line provided a crucial tool for virus isolation, identification, and amplification, as well as for vaccine preparation. Its diverse applications merited further investigation. © Editorial Office of Journal of Fisheries of China (CC BY-NC-ND 4.0)

关键词： 新对叶百部碱   胰腺癌   凋亡   增殖   迁移  

摘要： 目的 探究新对叶百部碱（NTS）对人胰腺癌细胞MiaPaCa-2和PANC-1凋亡的影响及作用机制。方法 以0（对照组）、20、40、60、80、100μg·mL-1的NTS分别处理MiaPaCa-2、PANC-1细胞24、48、72 h后，采用MTT法检测细胞存活率；分别设置对照组(0μg·mL-1)和NTS低、中、高质量浓度(20、40、60μg·mL-1)组，采用平板克隆法检测NTS对MiaPaCa-2、PANC-1细胞的增殖能力的影响；采用划痕愈合实验检测细胞迁移能力；采用Hoechst 33258染色法观察细胞的凋亡；采用流式细胞术检测细胞的凋亡率、线粒体膜电位；采用Western blotting法检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、活化半胱氨酸蛋白酶-3（cleaved-Caspase-3）、半胱天冬酶-9（Caspase-9）相关蛋白表达水平。结果 与对照组比较，不同质量浓度NTS可显著降低MiaPaCa-2、PANC-1细胞存活率（P<0.01）、克隆形成率（P<0.05、0.01）、划痕愈合率（P<0.05、0.01）、线体膜电位（P<0.01）；显著增加MiaPaCa-2和PANC-1细胞凋亡水平（P<0.01）；在蛋白水平上，NTS显著上调促凋亡相关因子cleaved-Caspase-3、Bax、Caspase-9蛋白的表达水平，下调抑制凋亡因子Bcl-2蛋白表达水平（P<0.05、0.01）。结论 NTS可有效抑制人胰腺癌MiaPaCa-2、PANC-1细胞增殖和迁移能力，并促进其凋亡，其机制可能与下调抑制凋亡蛋白Bcl-2并上调促凋亡蛋白Bax、cleaved-Caspase-3、Caspase-9表达有关。

关键词： 人工湿地   水产养殖   尾水,富营养化   生态系统  

摘要： 生态文明制度体系不断完善，对水资源、水环境、水生态的约束管控越来越严。为加快促进水产养殖业的绿色转型和可持续发展，本文通过分析水产养殖尾水的污染特征和人工湿地生态系统作用机理，探讨将湿地生态系统治理理念用于水产养殖尾水处理，综合发挥人工湿地生态功能和治理效能，优化水产养殖与农业农村资源的合理配置利用，通过物种间的合理搭配，实现养殖尾水处理和生态农业有机结合，达到养殖尾水安全回用或高效利用的目的。

摘要： 据中国疾病预防控制中心网站2025年1月9日消息，近日，我国发现一起猴痘病毒Ib亚分支聚集性疫情，传染源为1位外籍人员，有刚果（金）旅居史。发现疫情后，国家及浙江、广东、北京、天津等省（市）迅速启动联防联控机制，开展流调溯源、风险排查、病例诊治等工作，在密切接触者中陆续发现4例关联病例，均为亲密接触后感染。相关病例以皮疹、疱疹等症状为主，症状较轻。目前在一般接触人员中未发现感染者，相关感染者和风险人员正在接受医学治疗和健康观察，疫情已得到有效处置。

关键词： 森林多种经营模式   土壤养分   动态变化   生态系统   林场  

摘要： 森林多种经营模式在推动生态系统可持续发展中发挥着重要作用，其对土壤养分的动态影响备受关注。本文基于森林多种经营模式的多样性，分析其对土壤有机质、主要养分（氮、磷、钾）以及微生物活性的影响机制。结合某林场的实践案例，探讨不同经营模式在调节土壤养分循环、提升土壤肥力方面的表现。研究发现，科学的多种经营模式可显著优化土壤养分动态变化，提高土壤质量与生态系统稳定性。本文旨在为多种经营模式的优化及其生态效益提升提供理论参考和实践指导。

关键词： 月季育种   品种多样性   园林设计   生态系统   景观规划  

摘要： 本研究聚焦于月季品种多样性在园林设计中的实际应用，旨在通过科学的品种选择与合理的布局优化，提升园林景观的美学价值与生态效益。研究详细分析了月季品种的分类及其遗传多样性，重点探讨了不同品种在形态、花期及色彩上的独特特性。研究还提出了月季品种在不同景观功能区中的应用策略，包括品种选择、景观布局及季节性配置等方面。通过对英国阿尔布莱顿的大卫·奥斯汀月季园和上海辰山植物园月季园的案例研究，展示了科学的品种选择与布局优化如何丰富园林的视觉效果。这些实践还表明，合理的月季配置能够改善土壤结构、调节微气候、促进生物多样性，并提供多种生态系统服务。本研究进一步提出了月季育种与园林设计协同发展的未来方向，强调跨学科合作与创新设计在提升园林景观质量及生态效益中的重要作用。