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关键词： 溺死   死后浸没时间   随机森林   微生物组学   死亡时间推断  

摘要： 目的:研究海水中溺死大鼠和CO_(2)窒息死后入水大鼠盲肠微生物的演替规律,并结合随机森林(random forest,RF)机器学习算法进行死后淹没时间(postmortem submersion interval,PMSI)的推断。方法:本研究将70只健康成年SD大鼠随机分为海水溺死组(seawater drowning group,D组)和死后入水组(postmortem submersion group,PS组)。建立动物模型后置于25℃恒温气候箱,按照死后经历时间(0、12、24、36、48、72、96 h)对盲肠内容物进行取材,经十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrimethylammonium bromide,CTAB)法提取DNA,细菌16S rDNA V3-V4区特异性扩增,高通量测序等得到测序数据,对盲肠微生物群落特征进行多样性分析;结合微生物组测序结果和RF机器学习算法,筛选生物标志物,建立海水溺死和死后入水组大鼠尸体的PMSI预测模型。结果:海水溺死组和死后入水组的盲肠微生物群落特征存在差异。结合RF机器学习算法筛选出16种推断PMSI的潜在生物标志物,并分别建立了海水溺死组(D组)和死后入水组(PS组)的PMSI推断模型。海水溺死组预测模型结果:平均绝对误差(mean absolute error,MAE)=13.272 h,R^(2)=0.798;死后入水组预测模型结果:MAE=9.956 h,R^(2)=0.793。结论:本研究表明,海水溺死和死后入水2种死因的盲肠微生物群落存在规律性差异,证明了结合RF机器学习算法的盲肠内容物微生物群落演替能够成为海水尸体PMSI推断的有效生物学指标。

关键词： 中等强度间歇有氧训练   衰老   miR-21-3p   细胞凋亡   学习记忆  

摘要： 目的:探讨中等强度间歇有氧训练对微RNA 21-3p(microRNA-21-3p,miR-21-3p)表达的影响,为运动干预改善大脑衰老导致学习和记忆功能下降的可能机制提供理论依据。方法:取3月龄SPF级雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠45只,经适应1周后,随机分为对照组(group control,C组)、衰老组(group aging,A组)、衰老运动组(group aging+exercise,AE组)。A组和AE组腹腔注射D-半乳糖(Dgal)6周,随后AE组进行8周中等强度间歇有氧训练。造模结束24 h后,对各组大鼠进行行为学检测;尼氏染色(Nissl’s staining)检测神经元分布;原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测海马细胞凋亡;small RNA检测miRNA表达;实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-21-3p相对含量;双荧光素酶报告基因(Luciferase)实验验证miR-21-3p与肿瘤蛋白p53(p53)的靶向关系;免疫蛋白印迹(Western Blotting)检测p53、B淋巴细胞瘤-2蛋白家族成员X(Bax)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达量。结果:①运动干预前后的Morris水迷宫定位航行实验结果显示,A和AE组大鼠总体游泳路程显著长于C组(P<0.05,P<0.01),AE组大鼠总体游泳路程显著短于A组(P<0.01,P<0.05)。②Nissl’s staining结果显示,与C组比较,A组海马神经元分布紊乱,层级少,细胞核与周围组织不易区分,尼氏小体少;AE组海马神经元分布稀疏,层级较少,数量也明显减少。与A组比较,AE组海马神经元排列较整齐,层级多,尼氏小体多。③TUNEL结果显示,A组和AE组大鼠海马细胞凋亡率显著高于C组(P<0.01,P<0.05),AE组大鼠海马细胞凋亡百分率显著低于A组(P<0.01)。④small RNA测序结果显示,A组和AE组血浆外泌体miR-21-3p表达显著高于C组(P<0.01,P<0.05),AE组血浆外泌体miR-21-3p表达显著低于A组(P<0.01)。⑤qRT-PCR结果显示,海马组织qRT-PCR结果显示,A组和AE组miR-21-3p表达显著高于C组(P<0.01),AE组miR-21-3p表达显著低于A组(P<0.05)。⑥Luciferase实验结果显示,miR-21-3p和p53存在靶向关系,与Vector mimics+pcDNA3.1-p53比较,miR-21-3p mimics和pcDNA3.1-p53共转染HEK293T细胞后,可显著提高p53荧光素酶活性。⑦Western Blotting结果显示,A组和AE组的p53和Bax蛋白表达以及Bax/Bcl-2比值显著高于C组(P<0.01,P<0.05),Bcl-2蛋白表达显著低于C组(P<0.01);AE组p53和Bax蛋白表达以及Bax/Bcl-2比值显著低于A组(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著高于A组(P<0.01)。结论:8周中等强度间歇有氧训练可能下调外周血外泌体介导的miR-21-3p,减少脑组织内miR-21-3p表达,降低其靶向结合p53介导调控细胞凋亡的发生,从而改善大鼠空间学习记忆能力。

关键词： 胃腺癌   管状腺癌   早诊早治   甲胎蛋白   南京大学医学院   母细胞   遗传学特征   移码突变  

摘要： 目的探讨早期伴肠母细胞分化胃腺癌(gastric adenocarcinoma with enteroblastic differentiation,GAED)的临床病理、免疫表型和分子遗传学特征。方法收集南京大学医学院附属鼓楼医院2017—2023年经内镜黏膜下剥离术切除确诊的2例早期GAED,采用免疫组织化学、二代测序并结合文献探讨其临床病理和分子学特征。结果2例患者均为男性,年龄分别58和72岁,均发生于胃窦部,且均混合管状腺癌。例1 GAED位于黏膜固有层,例2 GAED侵达黏膜下层,2例均出现典型胞质丰富透亮肿瘤细胞,呈管状、乳头状和巢状排列,免疫组织化学均不同程度表达SALL4、Glypican-3和甲胎蛋白。二代测序例1显示RANBP2、FLT4、CARD11和NOTCH1基因错义突变,ZRSR2移码突变;例2显示SPTA1、FGFR1无义突变,CASP8、TP63、TET2、FBXW7、PIK3C2G、SOX9、SETBP1、BCR错义突变,ANKRD26、TP53剪切突变。结论GAED具有较高侵袭性,深入认识其早期临床病理及分子遗传学特征有助于早诊早治,并为进一步机制研究和靶向治疗提供参考。

关键词： 血清蛋白   血小板参数   奥密克戎变异株   轻型   核酸转阴时间  

摘要： 目的分析新型冠状病毒(SARS-CoV-2)奥密克戎变异株感染轻型患者核酸转阴时间影响因素,并研究其在恢复期的动态水平变化。方法选择2022年12月至2023年2月在复旦大学附属中山医院确诊并完成病毒基因组测序的95例新冠病毒感染(COVID-19)轻型患者作为研究对象。分析核酸转阴时间与变异株分型、年龄,以及确诊感染当天、确诊后1周、2周、1个月和2个月共5个时间点(T0~T4)的血清蛋白(ALB)水平、SARS-CoV-2中和抗体(NAb)水平、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板体积分布宽度(PDW)及大血小板比例(P-LCR)的相关性以及恢复期相关联指标的动态变化。结果SARS-CoV-2基因组测序结果显示,61例为奥密克戎变异株BA.5.2,34例为奥密克戎变异株BF.7。感染变异株BA.5.2患者的平均核酸转阴时间为(9.5±4.2)d,感染变异株BF.7患者的平均核酸转阴时间为(8.9±2.6)d,且感染不同类型奥密克戎变异株的平均核酸转阴时间比较,差异无统计学意义(P=0.432)。确诊感染时,患者的平均血清ALB为(48.8±2.4)g/L,平均NAb为[0.23(0.09,0.39)]μg/mL,平均NLR为[4.0(2.3,6.8)],平均PLT为(233.6±59.2)×10^(9)/L,平均MPV为(9.9±0.9)fL,平均PDW为(10.9±2.2)%,平均P-LCR为(24.1±7.8)%。相关性分析结果显示,患者核酸转阴时间与年龄、确诊感染时NAb、PLT水平和NLR无明显相关性(P>0.05),而与ALB、MPV、PDW和P-LCR水平呈显著负相关(r=—0.247、—0.286、—0.249、—0.276,P<0.05)。ALB≤48 g/L患者的平均核酸转阴时间明显高于ALB>48 g/L患者[(10.2±3.4)d vs.(8.3±3.4)d],MPV≤9.5 fL患者的平均核酸转阴时间明显高于MPV>9.5 fL患者[(10.3±4.2)d vs.(8.5±2.8)d],PDW≤11.7%患者的平均核酸转阴时间明显高于PDW>11.7%患者[(9.7±3.8)d vs.(7.9±2.4)d],P-LCR≤21.8%患者的平均核酸转阴时间明显高于P-LCR>21.8%患者[(10.1±3.9)d vs.(8.4±2.8)d],差异均有统计学意义(P<0.05)。血清ALB、PLT、MPV、PDW和P-LCR水平在T0~T45个不同采样时间点的水平比较,差异均有统计学意义(F=17.65、33.05、3.36、2.75、3.42,P<0.05),且T2点的ALB、PLT水平明显低于其他时间点,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论奥密克戎变异株感染轻型患者确诊感染时ALB、MPV、PDW和P-LCR水平可能是影响SARS-CoV-2核酸转阴时间的潜在因素,且上述4项指标在患者恢复期存在一定的变化特征。

关键词： 地奥司明   氧糖剥夺/复氧模型   神经保护   线粒体   细胞凋亡  

摘要： 目的探讨地奥司明(DSM)通过线粒体途径对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)处理的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的保护效果。方法体外培养SH-SY5Y细胞,建立OGD/R模型,通过CCK-8细胞活性检测,确定DSM最佳作用浓度并进行后续实验。将细胞分为空白对照组(Control组)、OGD/R组和DSM组(DSM浓度分别为0.01、0.02、0.04 g/L)。CCK-8法检测细胞存活率,使用相差显微镜来观察细胞的形态,并通过分光光度测量法来测定细胞内的ATP水平和线粒体复合体Ⅱ活性,JC-1法检测线粒体膜电位,TUNEL法检测细胞凋亡状况。结果浓度为0.01、0.02、0.04 g/L的DSM均能促进OGD/R损伤的细胞存活,且药物浓度为0.02 g/L时SH-SY5Y细胞的存活率最高。与Control组相比,OGD/R组细胞形态皱缩,细胞ATP含量和线粒体复合体Ⅱ活性显著下降,线粒体膜电位降低,细胞凋亡率升高;而0.02 g/L DSM预先孵育3 h,再进行OGD/R损伤的细胞存活率增高,细胞形态基本正常,ATP含量和线粒体复合体Ⅱ活性显著提升,且线粒体膜电位水平显著提高,凋亡细胞减少。结论DSM对OGD/R的细胞具有显著保护作用,且在0.02 g/L时发挥最佳保护作用,其作用机制与维持线粒体正常功能和减少细胞凋亡状态密切相关。

关键词： 新医科教育   病原生物与免疫学   思想政治教育   课程融入  

摘要： 该研究重点探讨新医科教育下病原生物及免疫学课程中融入思想政治教育策略,目的在于促进医学生专业素养及思想政治素养的提高。通过现状分析、问题识别、创新性解决办法的提出以及实证分析,本研究认为课程思政内容深度挖掘、教学方法创新运用以及教师队伍建设强化是增强课程思政成效的关键所在。实证结果表明,融入思想政治教育元素后学生知识掌握度、社会责任感和价值观正确性都得到了明显提高。研究对于新医科教育环境下在病原生物及免疫学课程中融入思想政治教育提供实践指导及理论支持,对于培养有社会责任感的医学人才有一定学术价值及实践意义。

关键词： 园林植物   食叶类害虫   害虫调查   综合防治  

摘要： 采用详细调查法和定点调查法相结合的方法,调查了上海崇明区园林植物食叶类害虫种类、寄主植物、为害部位及为害程度及害虫群落构成。结果表明,该地区园林植物食叶类害虫种类主要有24科122种,其中鳞翅目21科、118种,优势种4种;膜翅目3科、4种,优势种2种。为害程度方面,轻微(+)79种,占比64.75%;为害程度中度(++)37种,占比30.33%;为害程度严重(+++)6种,占比4.92%。研究区园林植物食叶性害虫种类多,但其组成结构较简单,能够造成严重为害的种类主要集中在少数科内。针对该地区园林植物食叶类害虫为害特点,提出园林植物食叶类害虫综合防治策略,园林植物食叶类害虫防治坚持“预防为主、综合防治”原则,以抗性树种的营林措施为基础,提高园林植物的抗虫能力,同时掌握害虫发生规律,及时采取适宜的综合防治措施,以缩小害虫发生范围,降低其为害程度。本研究为该地区及生态相似区域的园林植物食叶类害虫防治提供参考。

关键词： “习课堂”教学模式   初中数学   习题设计  

摘要： 随着新课程改革的不断深入,传统的教学模式已不能很好地适应当前初中数学教学需求.基于此,笔者针对“习课堂”教学模式下初中数学复习课的习题设计进行研究.首先介绍“习课堂”教学模式的必要性,阐述其在数学教学中的应用价值,接着从设置梯度型、类比型、关联型、多解型习题四个方面出发,探讨初中数学复习课中习题的设计策略,并给出相关的实例分析.

关键词： 病毒性肺炎   血必净注射液   中西医结合   Meta分析   临床证据  

摘要： [目的]系统评价血必净注射液治疗病毒性肺炎的临床证据。[方法]计算机检索中英文数据库,搜集血必净注射液治疗病毒性肺炎的临床研究,检索时限为建库至2024年7月。质量评价根据纳入研究的设计类型选择相应质量评价工具。采用R软件进行Meta分析。[结果]共纳入10篇文献,研究质量整体不高。Meta分析结果显示,血必净注射液组在症状改善率(发热、乏力、气短)、理化指标(白细胞计数、淋巴细胞计数、C反应蛋白、白介素-6、肿瘤坏死因子)、疾病转归[重症加强护理病房(ICU)住院时间、机械通气使用率、无创机械通气使用率、14 d转重率、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)发生率、脓毒性休克发生率]等有效性指标方面具有优势,组间差异有统计学意义(P<0.05)。在安全性指标方面两组差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]血必净注射液在病毒性肺炎的治疗中安全有效,但研究质量较低,影响了结果的可信度。

关键词： 牛病毒性腹泻病毒   分离鉴定   E2基因   序列分析  

摘要： 为分析陕西省牛病毒性腹泻病毒(BVDV)分子变异情况,采集陕西省某牛场腹泻患牛粪便样品,经处理后接种至MDBK细胞后,进行病毒分离鉴定并对分离的BVDV进行E2基因的克隆和遗传进化分析。结果显示,样品经过RT-PCR鉴定后接毒,第4天出现明显的细胞病变(CPE),通过设计特异性引物对收获的病毒成功扩增出BVDV E2基因,证明分离的病毒为BVDV。对该病毒的E2基因进行序列分析,所得序列与GenBank上已发表的BVDV毒株的核苷酸序列同源性为84.5%~100%,氨基酸序列同源性为82.1%~100%。结果表明,成功分离到牛病毒性腹泻病毒并进行了E2基因的克隆与序列分析,研究结果可为陕西地区BVDV的流行病学、致病性及生物学特性研究提供依据,为BVDV的区域流行及有效防控提供参考,为新疫苗的研发提供地方种毒。