课程文献中心 更多>>

关键词： 2,4-二氯苯酚   蚯蚓   动力学   固定化   生物技术  

摘要： 以典型氯酚类化合物2,4-二氯苯酚(2,4-DCP)为目标污染物,牛骨炭作为载体负载HD菌株制备固体工程菌剂,对污染土壤中的2,4-DCP进行降解实验,利用高通量测序揭示2,4-DCP胁迫下的土壤与蚯蚓肠道微生物群落演替、变化。结果表明:牛骨炭粒径160~250μm、热解4h时,牛骨炭负载的活菌数最多,达2.42×10^(9)cfu/g;当土壤中2,4-DCP浓度为15mg/kg时,协同修复组效果显著高于空白对照组和蚯蚓修复组;扫描电镜图表明,HD菌株可稳定负载于牛骨炭的表面空隙中,且固体工程菌剂表面呈多孔蜂窝状结构;微生物测序结果表明蚯蚓、固体工程菌剂的投入均可增加土壤微生物总数和多样性。本研究旨在为有机污染土壤生物修复技术发展提供理论与应用参考。

关键词： 臭氧   非洲猪瘟病毒   臭氧-氧化剂联用   KMnO_(4)   K_(2)FeO_(4)  

摘要： 目的研究臭氧及其氧化剂联用对非洲猪瘟病毒(ASFV)的灭活效果,为畜牧业ASFV控制策略提供技术支持。方法分别观察20 mg/L臭氧与不同浓度的高锰酸钾(KMn_(O4))和高铁酸钾(K_(2)FeO_(4))联用对1×10^(7)HAD_(50)/m L ASFV的灭活效果,并与单独使用臭氧或氧化剂的灭活效果进行比较。采用荧光显微镜和ImageJ软件定量分析病毒灭活率。结果单独使用20 mg/L臭氧对高浓度ASFV的灭活效果有限,作用30 min灭活率仅为27.0%;臭氧与5 mg/L KMnO_(4)联用,作用10 min灭活率达到86.8%;臭氧与K_(2)FeO_(4)联用的灭活率低于K_(2)FeO_(4)单独使用。结论臭氧与KMnO4联用具有协同作用,显著提升了对ASFV的灭活效率,而臭氧与碱性氧化剂K_(2)FeO_(4)联用未出现协同作用,提示选择臭氧联用氧化剂时须慎重考虑其酸碱性。

关键词： 柯萨奇病毒A组6型   芯片式数字PCR   绝对定量检测方法  

摘要： 目的建立芯片式数字PCR(chip-based digital PCR,cdPCR)方法检测柯萨奇病毒A组6型(coxsackievirus A6,CVA6)病毒载量。方法通过优化反应条件确定cdPCR的最佳探针浓度和退火温度,利用CVA6病毒VP1基因的RNA标准品确立cdPCR的线性范围和检出限。随后对cdPCR测定CVA6病毒载量进行方法学验证。利用cdPCR和qPCR方法检测小鼠组织中CVA6病毒载量,对检测结果进行一致性分析。结果确立了探针的最佳浓度为0.125μmol/L,最佳退火温度为53℃;检测范围为3.05~6726拷贝/μl,检出限为1.59拷贝/μl。验证结果提示cdPCR方法的精密度、准确度和特异性均良好。一致性分析结果显示2种方法的一致性良好(r=0.93,P<0.001)。结论基于cdPCR的定量方法能准确反映RNA中CVA6病毒的载量,可应用于疫苗的保护效果评价。

关键词： 结直肠癌   细胞凋亡   SIRT1   野生型p53   突变型p53  

摘要： 目的探究沉默信息调节因子1(silencing information regulator 1,SIRT1)对携带野生型和R273H突变型TP53基因的结直肠癌细胞凋亡的影响及其相关分子机制。方法TUNEL染色和Western blot法分别比较SIRT1过表达(LV-SIRT1)和SIRT1敲低(sh-SIRT1)的结直肠癌HCT116细胞(携带野生型TP53基因)、SW620和SW480细胞(携带R273H突变型TP53基因)在细胞凋亡以及凋亡蛋白(Bcl-2、Bax和p53)以及K382位点乙酰化的p53蛋白(Ac-p53)水平的差异;利用SIRT1特异性激动剂SRT1720和抑制剂EX527分别处理亲本细胞,比较SIRT1去乙酰化酶活性改变对凋亡蛋白和Ac-p53表达水平的影响;采用环己酰亚胺处理SRT1720或EX527预处理的结直肠癌亲本细胞,比较各组细胞在Ac-p53蛋白稳定性上的差异。结果SIRT1对野生型p53蛋白和R273H突变型p53蛋白均具有去乙酰化作用,乙酰化修饰能够增强野生型p53蛋白的稳定性,但降低R273H突变型p53蛋白的稳定性,上调SIRT1表达抑制结直肠癌细胞的凋亡,而敲减SIRT1促进细胞凋亡。结论SIRT1通过去乙酰化野生型和R273H突变型p53蛋白影响其稳定性,参与对结直肠癌细胞的凋亡调控。

关键词： 课后习题   价值观引导   小学语文教育   高效运用   人文主题   语文教学   教学模式   教学方法  

摘要： 当前,“双线组元”的教学模式已成为小学语文教育领域的研究焦点。这种教学模式强调语文要素与人文主题相结合,其中,语文要素不仅明确了学习的目标与途径,还涵盖了知识积累、技能培养、态度塑造及价值观引导等多个层面。在当前语文教学愈发重视语文要素的趋势下,如何高效运用这些要素来指导日常教学活动,成为教师亟待解决的关键议题。课后习题在促进学生语文学习中的独特价值与重要作用,本文基于课后习题的设计及其教学方法进行了研究,旨在通过优化课后习题教学,进一步提高语文教学的质量。

关键词： 类风湿关节炎   免疫复合物   骨转换标志物   骨质疏松症   骨免疫学  

摘要： 背景:类风湿关节炎患者骨质疏松症的发生率明显增高,患者血清中存在的大量免疫复合物是否促进了骨质疏松症的发生与发展仍不明确。目的:探讨类风湿关节炎患者血清总免疫复合物与骨质疏松症的关系。方法:(1)临床试验:选择50名健康体检者(健康对照组)与50例初治型类风湿关节炎患者(类风湿关节炎组),回顾性分析两组患者的临床资料与实验室检查,比较两组血清总免疫复合物水平。将类风湿关节炎患者血清总免疫复合物与骨密度、骨转换标志物及其他临床指标进行相关性分析。(2)细胞实验:分离培养健康志愿者外周血单核细胞,分4组处理:类风湿关节炎组加入类风湿关节炎患者血清总免疫复合物悬液,正常对照组加入健康体检者血清总免疫复合物悬液,阳性对照组加入含巨噬细胞集落刺激因子与核因子κB受体活化因子配体的α-MEM培养基,阴性对照组加入α-MEM培养基。处理7 d后进行抗酒石酸酸性磷酸酶染色,观察破骨细胞形成情况。结果与结论:(1)临床试验:类风湿关节炎组患者血清总免疫复合物、血清碱性磷酸酶水平均明显高于健康体检者(P<0.01,P<0.05);Pearson相关分析结果显示,类风湿关节炎患者血清总免疫复合物与血沉(r=0.330,P=0.019)、血清碱性磷酸酶(r=0.545,P=0.001)、抗环瓜氨酸肽抗体(r=0.377,P=0.007)和Ⅰ型胶原C端肽(r=0.738,P=0.001)呈正相关关系,与腰椎骨密度(r=-0.595,P=0.001)呈负相关关系;二元Logistic回归分析结果显示,年龄[OR=1.086,95%CI(1.022,1.154),P=0.008]、抗环瓜氨酸肽抗体[OR=1.002,95%CI(0.999,1.005),P=0.035]、Ⅰ型胶原C端肽[OR=0.141,95%CI(0.015,8.900),P=0.008]和血清总免疫复合物[OR=2.895,95%CI(1.228,6.827),P=0.001]是类风湿关节炎患者骨量异常(骨量减少或骨质疏松)的影响因素;(2)细胞实验:阳性对照组、正常对照组、类风湿关节炎组可见抗酒石酸酸性磷酸酶染色阳性的破骨细胞,并且与正常对照组相比,类风湿关节炎组破骨细胞形成更多(P<0.01);(3)结果表明,血清总免疫复合物可作为预测类风湿关节炎并发骨质疏松症的潜在血清学指标,清除血清中的免疫复合物或者干预免疫复合物与其受体的结合可能成为临床预防和治疗类风湿关节炎并发骨质疏松症的有效手段。

关键词： 生态系统服务价值   驱动力分析   退耕还林   地理探测器   黄土高原  

摘要： “退耕还林还草”工程使黄土高原土地利用和生态环境发生了显著变化。基于2000年、2010年、2020年土地利用数据、植被因子、社会经济数据等,对改进的生态系统服务价值当量因子表进行修正,采用空间自相关分析和地理探测器等方法,核算了各网格单元生态系统服务价值,探讨了生态系统服务价值时空变化特征及空间分异性驱动机制。结果表明:与2000年相比,2020年林地和建设用地面积增加,草地面积略有减少,耕地面积显著减少;2000年、2010年和2020年生态系统服务价值分别为7565.54亿、11473.26亿、14335.51亿元,草地和林地的生态系统服务价值占比较大;在生态系统服务功能中,调节服务价值最大,其次为支持服务;生态系统服务价值空间集聚特征以高高集聚和低低集聚为主;归一化植被指数(NDVI)、降水量、净初级生产力(NPP)、生态用地面积占比和土地利用程度对生态系统服务价值空间分异性影响显著。

关键词： 光唇鱼   cyt b基因   遗传多样性   遗传结构  

摘要： 为了解光唇鱼Acrossocheilus fasciatus自然分布的不同地理群体遗传多样性和遗传结构,基于cyt b基因序列,对浙江省的苕溪、金华江、曹娥江、椒江和安徽省的新安江、青弋江共6个水系的116尾光唇鱼进行分析。结果显示,116条cyt b基因序列定义了12个单倍型,光唇鱼6个群体的单倍型多样性为0~0.648,核苷酸多样性为0~0.004 35,除曹娥江群体呈现高单倍型多样性和低核苷酸多样性的特点外,其他群体均呈现出低单倍型多样性和低核苷酸多样性的特点。遗传分化指数分析显示,除苕溪与椒江群体间属中度遗传分化外,其余各群体间均属于极大的遗传分化(P<0.01)。基于单倍型序列构建的系统发育树显示,新安江、金华江、曹娥江、苕溪和椒江5个群体的单倍型混杂在一起聚为一支,青弋江群体不同单倍型聚为一支。遗传距离分析结果显示,青弋江群体与其他群体间的遗传距离均大于0.03。综合遗传距离、遗传分化指数和单倍型系统发育树结果,青弋江群体与其他群体间产生了明显的遗传分化。核苷酸错配分布和中性检验结果显示,光唇鱼近期并未经历种群扩张事件。本研究结果为光唇鱼种质资源保护与利用、增殖放流和良种选育等相关工作提供了理论依据。

关键词： 清化瘀热方   IL-33/ST2信号通路   糖尿病视网膜病变   炎症   细胞凋亡   动物实验,大鼠  

摘要： 目的探讨清化瘀热方(Qinghua Yure Fang,QHYRF)对糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)大鼠中视网膜细胞炎症、凋亡和氧化应激的影响及信号网络机制。方法通过链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)注射建立DR大鼠模型和人视网膜微血管内皮细胞(human retinal microvascular endothelial cells,hRMECs)高糖处理的细胞模型。使用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色和透射电镜观察视网膜组织。使用相应试剂盒、酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和蛋白质免疫印迹分别对hRMEC中氧化应激指标、促炎细胞因子和促凋亡蛋白的表达模式进行表征。蛋白质免疫印迹法分析白细胞介素33(interleukin-33,IL-33)/生长刺激表达基因2(suppression of tumorigenicity 2,ST2)信号通路相关蛋白的表达。结果HE染色结果显示,与假手术大鼠相比,STZ处理的大鼠表现出明显的水肿、毛细血管壁增厚、内皮细胞增生和纤维组织增生,并通过以剂量依赖的方式给予QHRYF治疗后得到部分缓解(P<0.05)。视网膜的超微结构观察结果显示,与假手术大鼠相比,STZ处理大鼠的毛细血管基底膜厚度(basement membrane thickness,BMT)增加,而QHRYF治疗以剂量依赖的方式降低了BMT值(P<0.05)。与假手术大鼠相比,STZ处理的大鼠IL-33和ST2的表达显著降低(P<0.05),QHRYF处理以剂量依赖的方式提高了IL-33和ST2的表达(P<0.05)。与假手术大鼠相比,STZ大鼠视网膜组织中的活性氧(reactive oxygen species,ROS)和3,4-亚甲二氧亚氨基苯丙胺(3,4-methylenedioxyamphetamine,MDA)水平显著升高、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平降低(P<0.05),而这些变化均通过QHRYF以剂量依赖的方式部分逆转(P<0.05)。与假手术大鼠相比,STZ处理的大鼠细胞上清液中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)和C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)的含量显著增加。与注射磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffered saline,PBS)的STZ处理大鼠相比,注射QHRYF的STZ治疗大鼠在细胞上清液中IL-6、TNF-α和CRP的表达量显著降低(P<0.05)。与假手术大鼠相比,STZ处理大鼠的视网膜组织中凋亡相关因子cleaved caspase-3蛋白表达更高,QHRYF处理可以以剂量依赖的方式降低该蛋白表达(P<0.05)。结论QHYRF通过激活IL-33/ST2信号通路减轻DR大鼠模型中的视网膜细胞炎症、凋亡和氧化应激。

关键词： 秦艽   微生物群落   酶活性   丰富度   多样性   种植年限  

摘要： 为了揭示秦艽不同种植年限对根际土壤微生物群落结构的影响,利用Biolog-ECO板的方法,开展了秦艽不同种植年限对根际土壤酶活性、土壤微生物群落平均颜色变化率(AWCD)、土壤微生物群落丰富度和土壤微生物群落多样性指数影响的研究。结果表明,0~20 cm土层,栽培秦艽3年的土壤脲酶活性和蔗糖酶活性最高,种植3、5、7年的土壤过氧化氢酶活性差异不显著;土壤微生物群落多样性(Shannon)指数随着种植年限的延长也呈现逐渐下降的趋势;土层AWCD随培养时间的延长呈现逐步增加的趋势。土壤微生物碳源整体利用能力大小顺序为:种植3年>种植1年>种植5年>种植7年>CK,且不同种植年限下0~20 cm土层土壤微生物群落的碳源利用能力均高于20~40 cm土层。秦艽作为以根茎入药的中药材,长期连作种植对土壤酶活性、微生物群落AWCD、微生物群落丰富度及微生物群落多样性有较大影响,因此,人工栽培秦艽应在充分满足其生态和环境生长要求的基础上,合理增加土壤微生物总量,可提高秦艽产量。