课程文献中心 更多>>

关键词： 聚丙烯微塑料   镉   土壤性质   微生物群落   复合污染  

摘要： 随着全球塑料使用量的增加，土壤微塑料(MPs)污染问题日益严重。重金属镉(Cd)是土壤中普遍存在的污染物之一。MPs和Cd在土壤中共存时相互作用，对土壤生态系统的影响可能不同于其单一污染。因此，探究MPs和Cd复合污染对作物根际土壤性质及微生物群落的影响研究值得关注。选用原始和老化60 d的聚丙烯微塑料(PP)以及Cd作为污染物，通过盆栽培育实验，比较研究了PP单一、Cd单一和PP-Cd复合污染条件下(共10个处理组)玉米幼苗根际土壤的理化性质、酶活性及微生物群落多样性，分析了不同处理组之间的显著性差异及相关性，进而探究了PP和Cd复合污染对土壤理化性质和微生物群落的影响机制。结果表明：①PP单一、Cd单一及PP-Cd复合污染显著提高了土壤的pH、电导率(EC)，降低了阳离子交换容量(CEC)和土壤有机质(SOM)含量；老化PP处理组的EC、CEC和SOM均高于未老化PP组。②PP和Cd对过氧化氢酶(S-CAT)、蔗糖酶(S-SC)和脲酶(S-UE)活性的影响呈协同抑制作用。③PP-Cd的复合污染显著降低了土壤微生物群落的相对丰度和多样性。放线菌门的相对丰度与S-CAT活性呈显著正相关；Shannon-Wiener指数和Simpson指数均与土壤EC呈显著正相关；Chao1指数和ACE指数均与SOM呈显著正相关，与S-UE活性呈显著负相关。研究显示，PP和Cd复合污染对土壤理化性质和微生物群落的影响与其单一污染的影响显著不同。研究结果可为微塑料和重金属复合污染土壤治理提供理论参考依据。

关键词： 生态系统服务付费   生态保护补偿   运行机制   生态产品   哥斯达黎加  

摘要： 生态系统服务付费在国际上是促进生态保护与经济社会协同发展的重要手段，与我国的生态产品价值实现在实践模式与路径上具有高度相似性。生态保护补偿是我国生态产品价值实现的主要路径之一，目前主要依靠政府“输血式”补贴，存在资金来源单一、市场主体活力不足等问题。哥斯达黎加森林生态系统服务付费制度是发展中国家实施市场化生态保护补偿的著名案例，通过强制性收费、受益者付费、国际义务支持、信贷基金收益4类融资渠道实现了森林生态保护补偿的市场化运行，对我国生态产品价值实现具有重要借鉴价值。文中在分析哥斯达黎加森林生态系统服务付费制度运行机制的基础上，总结了相关经验做法对我国实现市场化生态保护补偿的启示。

关键词： 内源性绵羊肺腺瘤病毒   长末端重复序列   双荧光素酶报告基因系统   SOX17  

摘要： 为了筛选内源性绵羊肺腺瘤病毒（enJSRV）长末端重复序列（LTR）转录调控的元件，本研究利用同源重组技术以本实验室保存的pGL4.10/enJSRVLTR为模板构建enJSRVLTR截短突变质粒，利用双荧光素酶报告基因系统筛选出enJSRVLTR启动子核心区域，通过生物信息学软件预测enJSRVLTR启动子核心区域潜在转录因子结合位点并构建其真核表达质粒，利用双荧光素酶报告基因系统分别检测其对enJSRVLTR启动子活性的影响。测序结果表明，pGL4.10/enJSRVLTR截短突变质粒构建成功；荧光素酶活性检测结果表明，pGL4.10/enJSRVLTR在-118bp～-43bp区域启动子活性显著下降（P<0.001）；提示该区域存在LTR启动子正调控元件；Flag/SOX17、Flag/EZH2、Flag/FOXM1、Flag/ZNF143真核表达质粒构建成功，其中，过表达SOX17可显著提高enJSRVLTR的启动子活性(P<0.001)。上述结果表明，本研究鉴定了enJSRVLTR核心启动子区域，并确定转录因子SOX17可直接促进enJSRVLTR转录。这些发现为enJSRV转录调控的分子机制研究提供了依据，并促进了JSRV研究领域的深入研究。

关键词： 手足口病   柯萨奇病毒A组6型   基因特征   重组  

摘要： 为了解南京市2018-2022年引起手足口病的重要病原体柯萨奇病毒A组6型（Coxsackievirus A6,CVA6）的基因特征及重组规律，为由CVA6引起的手足口病疫情防控提供一定的科学数据。收集2018-2022年南京市各区疾控中心上送的手足口病监测标本，用实时荧光定量PCR检测肠道病毒并分型，CVA6阳性标本通过一步法RTPCR对肠道病毒结构蛋白VP1区（915bp）和非结构蛋白3D区（812bp）进行扩增并测定序列，选取两个片段均测定成功的CVA6进行生物信息学分析。2018-2022年共收集疑似手足口标本2609份，肠道病毒阳性标本数1433份，阳性率54.93%(1433/2609)。肠道病毒阳性病例中，男女比例1.40:1,0～3岁为高发年龄段，占肠道病毒总阳性数的61.34%(879/1433)。受新冠疫情影响，手足口病肠道病毒阳性病例的季节性在各个年份有较大差异。121株南京CVA6 VP1区核苷酸相似性为89.5%～100.0%，氨基酸相似性为97.0%～100.0%。基于VP1区序列系统发育分析表明，2018-2022年南京CVA6株均属于D3亚基因型，120株属于D3a分支，2019年仅有一株属于D3b分支。非结构蛋白3D区序列的分子系统发育分析显示，2018-2022年南京CVA6株3D型别以重组形式（Recombinant form,RF）A为主，2022年出现了与本研究的其他南京株及常见的各谱系代表株遗传距离较远的新谱系。2018-2022年南京市引起手足口病的CVA6以D3a基因亚型为主，3D型别以RF-A为主，2022年可能出现了新的重组型别。

关键词： 非洲猪瘟病毒   p15蛋白   昆虫杆状病毒表达系统   免疫原性评价  

摘要： 本研究旨在利用昆虫杆状病毒表达系统制备非洲猪瘟病毒(ASFV) p15蛋白，并对其免疫原性进行评价，为非洲猪瘟亚单位疫苗研究提供试验基础。首先把编码p15蛋白的基因序列克隆至载体pFastBac1中，构建重组质粒pFastBac-p15，将该质粒与DH10Bac同源重组后转染昆虫细胞收获重组杆状病毒rBac-p15，将rBac-p15感染sf9细胞进行重组蛋白的表达；然后利用亲和层析纯化获得目的蛋白，并利用SDS-PAGE、Western-blot和IFA鉴定重组蛋白的表达及反应性；再将p15蛋白免疫小鼠，评估其体液和细胞免疫应答水平。结果表明，在感染重组杆状病毒rBac-p15的sf9细胞中，p15蛋白获得高效表达，并可被ASFV康复猪血清特异性识别。p15蛋白免疫小鼠诱导产生高水平的特异性抗体和细胞因子，有利于刺激脾脏CD4+、CD8+ T淋巴细胞的增殖。综上，本研究利用昆虫杆状病毒表达系统成功制备了p15蛋白，该蛋白能够同时诱导很好的体液和细胞免疫应答，有助于非洲猪瘟疫苗的进一步研究。

关键词： 细胞自噬   CV病毒   病毒感染  

摘要： 自噬是细胞的保守降解机制，通过自噬可实现受损细胞器、聚集蛋白质的降解，清除不利细胞质，获取机体运行能量，并维持稳态。自噬为细胞保护机制，对病原体产生抵御、免疫作用。但有研究认为肠道病毒可借助细胞自噬强化自我复制。柯萨奇病毒（Coxsackievirus,CV）归类于肠道病毒，可引起心肌炎手足口病（Hand foot and mouth disease,HFMD）及神经发育相关疾病。本文总结了近期对细胞自噬与CV病毒相互作用的研究，概述了不同类型的CV病毒与自噬的相互作用，有助于进一步探讨CV病毒引起疾病的治疗新思路。

关键词： 关中平原城市群   水资源系统   社会经济系统   生态系统   耦合协调度  

摘要： 关中平原城市群作为我国西北缺水地区最大的城市群，探讨水资源、社会经济、生态系统的协调关系对实现地区水治理和区域可持续发展意义重大。以关中平原城市群11个地级市为研究对象，通过建立水资源、社会经济、生态系统发展水平测度指标体系，计算2006—2020年三系统发展水平得分，利用耦合协调模型测算分析耦合协调性，并运用障碍度函数探测耦合协调度的主要制约因素。结果表明：（1）2006—2020年关中平原城市群各地级市水资源、社会经济、生态系统发展水平均呈递增趋势且表现出明显的空间分级。（2）城市群的耦合协调度由2006年的轻度失调状态提升至2020年的基本协调状态，在空间上耦合协调度表现为“核心城市＞周边城市＞外围城市”的发展格局。（3）关中平原城市群11个地级市耦合协调度的主要障碍因子表现出明显差异，根据障碍因子结果水资源-社会经济-生态系统协调发展模式可分为水源限制下的综合发展模式（核心城市）、生态环境落后模式（周边城市）和社会经济落后模式（外围城市）3种类型。

关键词： Muse细胞   间充质基质细胞   三维培养   髓核细胞   诱导分化  

摘要： 目的:探讨多系分化持续应激耐受(Muse)细胞的三维培养扩增方法及其向髓核细胞分化的潜力。方法:2023年10月至2024年5月，采用胰蛋白酶持续消化人脐带间充质基质细胞8 h的方法来获得Muse细胞，进而将其接种入甲基纤维素培养基中进行三维悬浮培养，观察Muse细胞增殖成球的情况，并将细胞球贴壁、增殖、再悬浮等操作进行扩增，对细胞进行SSEA3/CD105免疫荧光染色鉴定。进一步，将Muse细胞在髓核细胞诱导分化培养基中连续培养7、14 d，固定细胞后进行Collagen Ⅱ和Aggrecan免疫荧光染色。结果:胰酶长时间消化脐带间充质基质细胞后10%细胞仍能存活，其中一部分在甲基纤维素培养基中三维悬浮培养10～14 d时形成典型的细胞球，贴壁8 h后细胞固定染色显示细胞球SSEA3/CD105双阳性。细胞经过悬浮-贴壁-再悬浮培养的方案可以获得大量的Muse细胞。Muse细胞在髓核细胞诱导分化培养基中培养14 d后，细胞显著表达Collagen Ⅱ和Aggrecan。结论:三维悬浮培养是获得大量Muse细胞的一个较好的方案，Muse细胞可以被诱导分化为髓核细胞，为椎间盘退变修复提供参考。