关键词:
敌百虫
有机磷中毒
空间学习记忆
DNA甲基化
DNMT3A
细胞凋亡
摘要:
目的:探讨敌百虫暴露对大鼠空间学习记忆能力和神经元细胞的影响,为敌百虫神经毒性的机制研究提供参考。方法:基于前期研究,分别以PBS缓冲液或以10 mg/kg剂量敌百虫灌胃SD大鼠30 d,利用水迷宫实验评估大鼠学习记忆能力,H&E染色观察海马组织神经元形态,免疫组织化学染色检测5-甲基胞嘧啶(5-mc),TUNEL染色观察细胞凋亡,Western Blot检测DNMT3A及凋亡相关基因表达;以0 μmol/L、160 μmol/L、200 μmol/L及240 μmol/L浓度处理HT-22小鼠海马神经元细胞48 h,Western Blot检测DNMT3A及凋亡相关基因表达,流式细胞术检测细胞凋亡;HT-22细胞敲低DNMT3A后200 μmol/L敌百虫干预48 h,Western Blot检测DNMT3A及凋亡相关基因表达。结果:敌百虫干预后,水迷宫实验结果显示大鼠学习记忆能力降低(P<0.05),H&E染色结果显示海马组织形态学无明显变化,免疫组织化学染色显示海马组织5-mc水平增高(P<0.05);Western Blot结果显示,敌百虫处理后DNMT3A表达上升(P<0.05),凋亡相关基因表达改变(P<0.05),流式细胞术显示细胞凋亡率增加(P<0.05),但敲低DNMT3A可部分逆转敌百虫诱导的细胞凋亡(P<0.05)。结论:敌百虫持续暴露导致大鼠认知功能下降,可能与DNMT3A表达升高及DNA甲基化水平升高导致的细胞凋亡有关。