关键词:
六价铬
lncRNA TERC
KLHL20
EHBP1L1
摘要:
目的探究六价铬暴露对BEAS-2B细胞长链非编码RNA TERC及下游靶基因KLHL20和EHBP1L基因表达的影响,为六价铬致癌机制研究提供新思路。方法采用CCK8法检测不同浓度六价铬(K2Cr2O7)对BEAS-2B细胞活力的影响,选择不同浓度六价铬处理细胞24、48和72 h,或连续染毒7 d,采用实时荧光定量PCR法(RT-q PCR法)检测lncRNA TERC及其靶基因(KLHL20和EHBP1L1)表达水平变化。通过转染实验敲减或过表达BEAS-2B细胞lncRNA TERC后,选用1.00μmol/L六价铬染毒24 h,检测lncRNA TERC及其靶基因表达水平的变化。结果染毒24、48、72 h,六价铬处理组的细胞存活率随着染毒浓度的升高而逐渐降低(F=7.88、340.26、655.78,P<0.05)。不同浓度六价铬处理细胞24 h,lncRNA TERC与其靶基因KLHL20和EHBP1L1的表达水平随着六价铬浓度的升高而升高,呈现一定的浓度-效应关系(F=28.99、10.82、39.11,P<0.05)。0.50μmol/L六价铬处理BEAS-2B细胞1、3、5、7 d,lncRNA TERC的表达水平随着染毒时间的增加而升高(F=7.16,P<0.05),EHBP1L1的转录水平先升高后降低(F=37.34,P<0.05)。敲减lncRNA TERC后,KLHL20和EHBP1L1的表达水平为(0.90±0.01,0.83±0.01)低于对照组(1.00±0.04,1.00±0.05,F=176.40,74.40,P<0.05),而过表达lncRNA TERC后,KLHL20和EHBP1L1的表达水平为(1.20±0.06,1.67±0.15)均高于对照组(1.00±0.04,1.00±0.05,F=176.40、74.40,P<0.05)。结论六价铬可能通过lncRNA TERC调控BEAS-2B细胞下游靶基因KLHL20和EHBP1L1的表达。