关键词:
开放式阵列微流控
表面张力
浓度梯度阵列
药物筛选
材料合成
摘要:
在过去的30年中,具有微型化的设计的微流控技术已在生物学和化学合成分析领域得到普遍的发展和应用,得益于微加工技术的进步,微流控技术的发展日新月异。微流控技术是一种在微升到皮升范围内操纵流体的技术,通常采用微流控芯片,被称为“芯片上的实验室”,因为它能够涵盖生物和化学实验室的最基本的功能。由于液滴适用于分割和隔离反应物,并具有类似于宏观反应器的各种条件的模拟能力,能够使化学和生物分析达到常规实验室工作流程无法实现的规模和速率,因此将微液滴应用于微生物/化学实验对于研究人员来说具有极为开阔的研究前景。然而,由于传统的液滴微流控技术需要使用复杂的外部设备,且在液滴的稳定形成、保存及可跟踪分析方面存在诸多问题和挑战,众多研究人员开始采用基于表面张力的开放式微阵列技术,以应对在实际应用中的各种需求。与传统液滴微流控技术中的生成液滴的周围油相或孔板中的物理壁表面不同,化学图案化区域表现出疏液边界的特性,可防止液体在表面的移动和合并。因此,在不需要表面活性剂的情况下,在平坦的表面上也可以产生具有复杂的几何形状、尺寸可达几微米甚至纳米的液滴。开放式阵列微流控技术由于其具有平台易于制造、高密度的阵列排布以及开放的特点,使其在开发下一代高通量应用的微型化平台方面具有巨大的潜力,比如高通量筛选活细胞和在表面液滴阵列中的化学合成反应。在本论文中,我们着眼于开放式阵列微流控技术,试图解决该技术在实际应用中出现的一些问题,基于表面的亲疏水修饰技术,搭建了不同的开放式微阵列平台,并将它们应用于生物分析和化学合成。首先,本文提出了一种基于开放式阵列微流控技术的浓度梯度阵列的形成方法。与传统液滴微流控芯片相比,不需要复杂的外部设备和装置,仅仅需要一台涂布仪和自制的三明治结构刷头,即可通过涂布法在微孔板芯片上形成浓度梯度的阵列。通过在涂布过程中控制环境的湿度,可以抑制微孔内溶液的蒸发。该平台可用于肺癌细胞的培养,通过自制的容器可以在细胞的培养过程中减少细胞培养液的损失。通过在细胞阵列上涂布形成药物的浓度梯度,能够研究药物浓度梯度作用下细胞的生存凋亡情况。本平台的开放特征为实验过程中多步操作提供了机会,并且在一定程度上为该平台在生物分析方面的应用提供了更多可拓展的空间。其次,本文建立了一个多层可对准的开放式阵列微流控平台,用于材料的合成与原位表征。针对普鲁士蓝类化合物的化学合成过程,对于多种反应物参与共沉淀反应的特点,设计了一个定位底座,用于多种反应物溶液微阵列之间的对准和反应,并且在底部放置表面亲水图案化的硅片,用于承接沉淀的样品,方便后续对样品进行原位的后处理和表征。通过对不同环境条件下以及不同反应物浓度下得到的样品进行原位的扫描电镜和X射线衍射的表征,可以研究得到不同的反应条件对于普鲁士蓝类化合物的形貌、尺寸分布以及晶相的影响,对于材料的合成条件的高通量筛选具有一定的参考价值和借鉴意义。最后,本文开发了一种在开放式阵列微流控平台上高通量制备形貌和尺寸分布可控的全无机钙钛矿纳米棒单晶阵列的方法,并将其应用于全光子式密码原语的形成和加密通信。采取了一种溶剂气氛辅助的重结晶方法,通过控制前驱物溶液液滴的蒸发环境条件,使晶体的形核和生长过程缓慢进行,从而优化了单晶形貌。这对于全无机钙钛矿在表面的微液滴合成具有重要的研究意义。借助于单晶阵列具有的尺寸分散特征,结合钙钛矿单晶的尺寸依赖性激光发射行为,可将这样的单晶阵列作为一个天然的物理不可复制函数。在制定相应的编码规则的前提下,通过激光扫描收集单晶阵列的激光发射信息,可将单晶阵列转化编码为密码原语,用于加密通信。综上所述,本论文针对开放式阵列微流控技术在实际应用中遇到的一些问题和需求,搭建了三种不同的开放式微阵列平台,实现了开放式浓度梯度阵列的高通量制备,并将其应用于癌细胞的高通量药物筛选以及普鲁士蓝类化合物的高通量合成和原位表征,还制备了全无机钙钛矿纳米棒单晶阵列,并将其应用于全光子式密码原语的形成。