关键词:
丹参药渣
猬木霉
漆酶
酶学特性
木质素降解
摘要:
【目的】筛选可降解丹参(Salvia miltiorrhiza)药渣木质素的菌株并探究其酶学特性,以筛得菌株降解丹参药渣木质素以提高纤维素的酶解效率。【方法】以丹参药渣表面自然生长的菌株为筛菌来源,通过碱性木素培养基和愈创木酚培养基进行初筛和复筛,利用添加丹参药渣的培养基验证产酶能力,优选产漆酶菌株。通过ITS序列分析对菌株进行鉴定。对分离菌株漆酶酶学特性进行研究。采用NREL法测定木质纤维素含量,利用商业纤维素酶探究酶解效果。【结果】筛选出一株产漆酶且耐受丹参药渣的真菌MY-5,经ITS序列鉴定为猬木霉(Trichoderma erinaceum)。对漆酶酶学性质进行考察,漆酶最适反应温度为50℃,60℃下保温24 h后酶活保持在85.3%,4℃低温贮藏25 d酶活保持在80.7%;最适pH为5,在pH 4-8时保温24 h活性保持在90%以上;添加Cu^(2+)、Mg^(2+)和香兰素提高了漆酶活性,其中5 mmol/L Cu^(2+)提高1.68倍;添加4%丹参药渣保温24 h后漆酶仍能保持90.6%的酶活。液态发酵20 d后丹参药渣木质素的降解率达到了36.3%,葡萄糖产量和最大产率分别提高了62.6%和81.0%。【结论】筛选得到一株产漆酶菌株猬木霉MY-5,其漆酶热稳定性、低温贮藏稳定性、pH稳定性及丹参药渣耐受性良好,可以有效降解丹参药渣木质素,提高纤维素的酶解效率。