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关键词： 癫痫发作动物模型   DREADDs   谷氨酸能神经元   GABA能神经元  

摘要： 背景癫痫是一种慢性脑部疾病,其发病机制尚不完全清。目前对癫痫发病机制的探讨多基于传统的癫痫动物模型,如匹鲁卡品、海仁酸或电刺激等,这种外源性的癫痫动物模型与人类的癫痫发作存在巨大的差异。癫痫发作与病因有关,而外源性动物模型所用的化学物质在人体内并不存在。因此,这种外源性癫痫模型尚不能完全模拟人类的癫痫发作。随着光遗传学和化学遗传学(DREADDs)方法学越来越多的应用于神经科学,人类有可能通过内源性调控的方法来构建新型的癫痫模型,使其更适合于癫痫发病机制的研究,或抗癫痫药物的筛选。目的利用化学遗传学方法,通过兴奋脑内不同核团的谷氨酸能神经元,或兴奋CA3谷氨酸能与GABA能神经元,建立不同类型的内源性癫痫发作模型。方法利用野生型C57 BL/6小鼠于海马区注射海仁酸,构建成海仁酸癫痫模型小鼠,在其癫痫自发性发作2小时后对脑组织进行c-Fos染色,确定参加活动的脑区或核团,通过对激活核团进行筛选后,定位注射rAAV病毒,利用CNO激活,分别兴奋谷氨酸能神经元或同时兴奋谷氨酸能神经元与GABA能神经元,通过行为学观察和在体场电位系统记录脑电,了解不同核团在癫痫发作中的作用,并利用这种作用建立稳定的内源性癫痫发作模型。结果1.通过构建海仁酸癫痫模型小鼠,监测癫痫自发性发作2小时后,进行脑组织c-Fos染色。发现海马(CA3区)、运动皮质(M1/M2)、杏仁核前皮质区(ACo)及内嗅皮层(EC)等部位被激活最为明显。将rAAV病毒(rAAV-CaMKIIa-hM3D(Gq)-mCherry-WPREs-pA)(缩写为:CaMKIIa-hM3D(Gq))注射到上述c-Fos阳性细胞核团内。病毒表达3周后,予以腹腔注射氯氮平-N-氧化物(clozapine-N-oxide,CNO(2mg/kg))进行点燃癫痫发作,发现CA3区点燃率为60%、ACo为56%、M1/M2为50%;EC区小鼠未点燃。在第7周发现点燃率下降,而到第10周时CA3组为30%,ACo组为22%,M1/M2组为13%。2.将rAAV-hSyn-EGFP-3XFlag-WPRE-hGH-pA(5.91E×12vg/mL,AAV2/R型)注射CA3、M1/M2及ACo核团中进行逆向示踪。发现CA3与DG联系最密切,双侧M1/M2区互为上下游,ACo与杏仁核外侧部(BLP)区域联系密切。将CaMKIIa-hM3D(Gq)病毒同时注入海马的DG、CA3区域,CNO点燃小鼠癫痫发作率为81%,第7周再点燃率为100%。第10周的再点燃率为92%。相关性分析方法发现DG和CA3的两对电极所记录的场电位存在高度相关性。***-VGAT1-hM3D(Gq)-mCherry-WPRE-pA(VGAT1-hM3D(Gq))与CaMKIIa-hM3D(Gq)病毒不同比例混合,感染海马CA3区。均可出现癫痫发作,并能在第7周再次点燃,在体场电位记录提示脑电放电形式多成连续性。4.两种模型脑内注射TTX,结果示两种模型的癫痫发作均能被阻断,提示这种内源性癫痫动物模型的发生可能与钠离子内流有关。通过对照病毒的注射,进一步验证了不同比例中谷氨酸能神经元与GABA能神经元存在同时感染。应用光遗传学验证,同时发现GABA能神经元具有延长癫痫发作持续时间的作用。结论我们的研究发现利用化学遗传学的方法可以建立稳定的内源性癫痫动物模型,这种模型明确了参与癫痫发作的神经核团、不同种类的神经元,因而比传统的外源性动物模型更能帮助人类了解癫痫的发生发展。同时这种模型能重复使用,可减少研究中所需实验动物数量,甚至缩短实验周期。由于这种模型可进行自身对照,且无外源性化学物质等损伤,因而实验结果更加可靠。更有利于癫痫机制的相关研究,如癫痫的网络及癫痫发作过程中神经递质演变的研究。

关键词： HDAC6   HDAC11   小鼠卵母细胞   减数分裂   表观遗传修饰  

摘要： 导致不孕不育、自然流产和出生缺陷的一个重要因素是女性卵母细胞成熟发育异常。寻找和探究调节卵母细胞成熟的关键因子和相关通路对人类辅助生殖和胚胎发育意义重大。HDACs家族中多个成员可通过调节组蛋白修饰参与卵母细胞的成熟过程。其中,HDAC6是参与卵母细胞成熟的关键因子之一。然而,其调节卵母细胞成熟的机制尚未完全阐明。HDAC11是调节哺乳动物细胞有丝分裂进程的重要分子,但关于其是否在减数分裂中发挥作用及相关机制仍然知之甚少。本研究通过添加HDAC6和HDAC11的特异性抑制剂,分析其对卵母细胞成熟、减数分裂元件组装、mRNA表达以及组蛋白修饰的影响,为揭示HDAC6和HDAC11在卵母细胞成熟中的重要作用提供理论和实验依据。主要研究内容和结果如下:1.抑制HDAC6影响小鼠卵母细胞成熟以及mRNA的表达我们首先检测了HDAC6在卵母细胞中的表达及其启动子DNA甲基化情况,分析了其表达模式。接下来添加HDAC6的抑制剂TubA处理卵母细胞,研究抑制HDAC6对卵母细胞成熟和mRNA表达的影响。结果发现:1)HDAC6在GV和MII期卵母细胞中呈现相似的高表达,对应其启动子DNA的低甲基化;2)与对照组(71.7±1.3%)相比,0.1μg/mL和10μg/mL TubA处理组卵母细胞的成熟率(47.3±0.8%;3.17±2.0%)显著降低。同时,TubA处理导致纺锤体/染色体排列和K-MT结合异常比例显著升高。不仅如此,TubA处理还在激活了SAC的表达;3)单细胞转录组测序结果显示:TubA处理导致卵母细胞中121个基因表达下调,212个基因表达上调。其中与细胞周期相关基因CCNB1、CDK2、SMAD3、YWHAZ以及DNA甲基化相关基因DNMT1和DNMT3B在TubA处理后均显著下降。上述结果表明,HDAC6在卵母细胞中的表达受其启动子甲基化水平调控,抑制HDAC6可以破坏卵母细胞减数分裂元件的组装并对mRNA的表达产生影响。2.抑制HDAC6影响小鼠卵母细胞成熟过程中的组蛋白表观遗传学修饰为进一步分析HDAC6影响卵母细胞成熟的机制,我们检测了HDAC6抑制剂TubA和Tubacin对α-tubulin乙酰化和组蛋白修饰(乙酰化、磷酸化和甲基化)的影响,同时分析了组蛋白乙酰化和磷酸化间的相互作用。研究结果显示:1)与对照组相比,TubA和Tubacin处理均可导致卵母细胞的α-tubulin和H4K16乙酰化水平显著升高;2)TubA处理在升高H4K16乙酰化水平的同时也导致H3磷酸化水平降低。反之,采用H3T3磷酸化激酶的抑制剂5-ITu在降低H3T3磷酸化水平的同时,也导致H4K16乙酰化水平显著升高。3)抑制HDAC6导致H4K5,H4K12和H3K4乙酰化水平以及H3K9me3水平显著升高,而对H3K4me3的水平未见显著影响。总之,抑制HDAC6影响了α-tubulin乙酰化水平以及组蛋白乙酰化、磷酸化和甲基化修饰,这些表观遗传学变化可能是HDAC6调节卵母细胞减数分裂元件组装以及mRNA表达的潜在分子机制;在卵母细胞中H4K16乙酰化和H3磷酸化之间存在互斥作用。***11通过降低H4K16及α-tubulin乙酰化水平促进小鼠卵母细胞减数分裂元件组装我们首先检测了HDAC11在卵母细胞中的表达情况。同时通过添加HDAC11特异性抑制剂JB3-22处理卵母细胞,研究HDAC11被抑制后对卵母细胞成熟和组蛋白修饰的影响。结果发现:1)在卵母细胞可以检测到HDAC11的表达,HDAC11在GVBD期的卵母细胞中表达与GV期相似,而在MI和MII期卵母细胞中的表达则显著低于GV期卵母细胞(P<0.01);2)抑制HDAC11显著影响卵母细胞的GVBD和成熟率。JB3-22处理组卵母细胞中纺锤体排列/染色体组装,K-MT结合异常比例显著升高。同时,JB3-22处理还影响了卵母细胞SAC的激活及其功能;3)进一步通过免疫荧光染色和WB检测发现抑制HDAC11显著升高了α-tubulin和H4K16的乙酰化水平。综上,HDAC11是参与调节卵母细胞成熟的重要因子。其对准确的染色体/纺锤体排列,K-MT结合以及SAC的功能发挥重要作用。这一作用可能是通过去乙酰化α-tubulin和H4K16实现的。

关键词： 星康吉鳗   种群结构   形态学   遗传学   肌间骨   线粒体DNA  

摘要： 结合形态学、遗传学的方法,分别对青岛近海(黄海)、舟山近海(东海)的星康吉鳗群体做了相关系统的研究。通过单因素方差分析、判别分析、主成分分析方法对两个星康吉鳗地理群体的9个可量性状进行形态学比较研究;基于线粒体DNA (mtDNA)序列进行遗传学分析研究。形态学研究结果显示,舟山海域的星康吉鳗肌肉中含有"I"形硬肌间骨,青岛海域星康吉鳗的肌肉中无硬肌间骨;单因素方差分析结果显示,两个群体的7个可量指标:肛长、头宽、吻长、口裂长、眼径长、背鳍前长和胸鳍长存在显著差异;在主成分分析中,基于前两个主成分绘制的散点图基本能够将两个星康吉鳗群体区分开来;判别分析结果显示,青岛、舟山两群体的判别准确率分别为100%和94.7%。3种多元统计分析结果均表明青岛、舟山两个星康吉鳗群体在外部形态上存在一定程度差异,但根据75%识别与划分规则,认为两组群体的形态学差异尚未达到亚种水平。遗传学研究表明,在所检测的mtDNA水平上两个星康吉鳗群体遗传多样性无明显差异,邻接系统发育树未呈现明显的谱系关系,遗传分化指数FST也显示两群体遗传差异小,遗传分化不显著,属同一种群。

关键词： 医学遗传学  

ISBN: (纸本)9787030663610

摘要： 本书共17章, 分别介绍了医学遗传学的发展简史、主要分支、常用分析方法和学习与研究的常用网络资源。对医学遗传学专业基础知识, 从人类基因组、染色体和基因, 到线粒体遗传、表观遗传、群体遗传、肿瘤遗传、免疫遗传、遗传咨询和遗传筛查、基因编辑技术分别作了介绍, 新增了遗传筛查、医学遗传学研究及高通量基因测序分析常用运算方法等临床和科研常用技能的介绍。

关键词： 胰腺癌   长链非编码RNA   Lnc-EPIC1   YAP1   细胞生长   细胞凋亡  

摘要： 背景胰腺癌（pancreatic cancer,PC）是一种恶性程度极高的疾病,其分子机制尚不明确。已有多项研究探讨了表观遗传学诱导的长链非编码RNA1（lnc-EPIC1）在肿瘤中的作用,但尚未有研究证明lnc-EPIC1水平与胰腺癌的关系,阐明lnc-EPIC1潜在分子机制可能有助于胰腺癌的诊断和治疗。目的探讨lnc-EPIC1在胰腺癌细胞系和胰腺癌组织的表达量,lnc-EPIC1与临床样本中胰腺癌肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移的相关性,lnc-EPIC1对胰腺癌细胞系增殖、克隆、凋亡的作用以及lnc-EPIC1在胰腺癌中的分子机制。方法通过实时荧光定量PCR技术（qRT-PCR）检测30例胰腺癌患者组织及人胰腺癌细胞系（SW1990、HPAFⅡ）中的lnc-EPIC1的表达水平,分析lnc-EPIC1与肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移的相关性。通过蛋白质印迹法检测30例胰腺癌组织及人胰腺癌细胞系中的YAP1的表达水平,并通过TCGA数据库分析YAP1对胰腺癌肿瘤分期、预后的影响。siRNA转染到胰腺癌细胞系后,qRT-PCR技术检测转染效率并使用荧光显微镜拍照。使用CCK-8方法检测胰腺癌细胞系增殖能力;平板克隆实验检测胰腺癌细胞系克隆能力;流式细胞仪检测胰腺癌细胞系凋亡率和细胞周期分布。使用catRAPID graphic软件分析UKB数据库数据,预测lnc-EPIC1与YAP1的相互作用倾向及结合位点。最后,通过RNA结合蛋白免疫沉淀技术（RNA Immunoprecipitation,RIP）验证 lnc-EPIC1 与 YAP1的结合。结果qRT-PCR实验检测结果显示,与正常胰腺细胞系（HPDE细胞系）相比,Lnc-EPIC1在胰腺癌细胞系（SW1990细胞系、HPAFⅡ细胞系）中的表达显著增高（P＜0.001）。临床病理资料分析结果显示,lnc-EPIC1的表达水平在胰腺癌组织中上调,并与肿瘤组织大小、TNM分期和淋巴结转移呈正相关（P＜0.01、P＜0.01、P＜0.01）。蛋白印迹结果表明,和正常胰腺细胞系（HPDE细胞系）相比,YAP1表达量在胰腺癌细胞系（SW1990细胞系、HPAFⅡ细胞系）中显著增高。同时,YAP1在胰腺癌组织中表达量也显著高于胰腺癌旁组织。GEPIA的TCGA-PAAD数据分析显示,较正常胰腺组织相比,胰腺癌组织中YAP1表达更高（P＜0.05）,高表达YAP1的胰腺癌患者总体存活率较差（P＜0.01）,肿瘤分期较高（P＜0.001）。Lnc-EPIC1和YAP1在胰腺癌细胞和组织中表达增高,可能与胰腺癌进展相关。通过靶向siRNA（EPIC1 siRNA1、EPIC1 siRNA2）可以显著抑制lnc-EPIC1表达量（p＜0.001、p＜0.001）。低表达lnc-EPIC1后,胰腺癌细胞系（SW1990细胞系、HPAFⅡ细胞系）细胞增殖能力显著降低（p＜0.001、p＜0.001）,细胞克隆功能显著降低（p＜0.001、p＜0.001）,细胞凋亡率显著增高（p＜0.001、p＜0.001）。在SW1990细胞系中,qRT-PCR结果显示低表达Lnc-EPIC1后,G0/1细胞的百分比显著增加（p＜0.001）,G1/S细胞周期停滞,细胞周期蛋白Cyclin A1,CDC20和CDK4mRNA的表达量显著降低（P＜0.001、P＜0.001、P＜0.001）。生物信息学方法分析YAP1和lnc-EPIC1的相关性,cat RAPID软件能够以较高的置信度来识别YAP1和lnc-EPIC1的交互区域（交互得分=135,判别力=100%）,同时YAP1和lnc-EPIC1的可能结合位点位于600BP和1300BP处。RIP结果显示lnc-EPIC1和YAP1之间存在直接相互作用（p＜0.01）。结论1、Lnc-EPIC1在胰腺癌细胞和胰腺癌组织中高表达;2、Lnc-EPIC1的表达量与胰腺癌肿瘤大小,TNM分期和淋巴结转移正相关;3、下调lnc-EPIC1表达水平,胰腺癌细胞生长、增殖功能降低,凋亡率增高;4、Lnc-EPIC1通过靶向结合YAP1,调节细胞周期蛋白Cyclin A1,CDC20,CDK4,促进胰腺癌的进展。

摘要： 单靠非洲稀少的化石记录,无法揭示人类进化史。当地质年代学家赖纳·格林(Rainer Grün)从欧洲或亚洲远足考察归来回到澳洲家中时,随身携带人类骨骸并不是罕见的事。印度尼西亚的已灭绝古人类的颚骨、来自以色列的尼安德特人牙齿、在沙特阿拉伯出土的古人类手指骨,这些骨骸都一度在他位于澳洲国立大学的实验室待过一段时间,再回到各自的故乡。

关键词： 神经纤维瘤病-1型   NF1基因   基因突变   胫骨假关节   X-连锁低磷性佝偻病   PHEX基因  

摘要： 第一部分神经纤维瘤病-1型的临床诊断以及分子遗传学研究目的:神经纤维瘤病-1型(Neurofibromatosis type 1,NF1)是临床上最常见的以神经系统病变为主的常染色体显性单基因遗传病之一,据国内外文献报道,其发病率约为1/3000。神经纤维瘤病-1型临床上主要表现为神经纤维瘤、牛奶咖啡斑、面部胸背部及褶皱处皮肤广泛存在的雀斑、Lisch结节、视神经胶质瘤以及骨骼损害等。四肢骨骼损害中尤为常见的是胫骨弯曲,甚至形成胫骨假关节,从而严重影响患者的行走功能、生活质量。当前的研究显示,位于染色体17q11.2上的抑癌基因NF1基因的失活突变是该病发生的最主要的原因。即使NF1有较高的发病率,目前尚未发现相关热点突变。因此,针对神经纤维瘤病-1型患者进行NF1基因的突变检测,对于辅助诊断以及为治疗提供循证依据都有重要意义。本研究对临床确诊为NF1的患者及其一级亲属进行NF1基因的Sanger测序,根据检测结果对NF1发病的分子遗传学机制进行分析及探讨。方法:研究对象为来自10个不同中国家系中的10个临床表现典型的确诊先证者及其家属,并招募200名健康志愿者。我们收集患者家族史、疾病发展史、体格检查资料、实验室及影像学检查结果作为基础资料。在签署知情同意书后,采集所有先证者及其家属的外周血DNA,针对NF1基因经聚合酶链式反应(PCR)后直接基因测序。对于基因突变位点的保守性使用UniProt作为参考,对于确诊的NF1患者的基因检测结果采用Mutation Taster和PolyPhen-2进行致病性预测,对基因型与表现型关系进行分析。结果:我们在10个家系中均检测到NF1基因,其中包括5个新发突变:18号外显子上的错义突变c.2125T>C从而导致***709Arg;34号外显子上的移码突变c.4436dupT从而导致***1459Profs*2;4号外显子上的移码突变c.4436dupT从而导致***99Argfs*4;19号外显子上的移码突变c.2283delA从而导致***762Cysfs*2;34号外显子上的移码突变c.4562563dupAT从而导致***1522Ilefs*53。在患者的健康家属及200名健康志愿者中并未检测到NF1基因的突变。先证者的患病家属与先证者的检测结果都是一致的。结论:本研究中的先证者均检测到NF1基因的突变,佐证了NF1基因突变与这些患者的临床表现密切相关。检测到的5个新的突变位点也进一步拓展了NF1基因的基因突变谱,为进一步了解神经纤维瘤病-1型患者的病因提供了线索,也为该病的产前检查及遗传咨询提供了循证依据。第二部分 X-连锁低磷性佝偻病的临床诊断以及分子遗传学研究目的:X-连锁低磷性佝偻病(X-linked hypophosphatemia,XLH)是最常见的遗传性低磷性佝偻病,它最主要的特点是血清磷酸盐浓度的降低和维生素D活化的障碍致使骨矿化功能受损。XLH是一种X-连锁显性遗传的单基因遗传病,国内外文献报道的发病率约为1:20000。其临床表现多变,轻度可仅表现为实验室检查血液磷酸盐水平下降;重度可表现为身材矮小、骨骼畸形、骨及关节疼痛、病理性骨折、方颅或狭颅、鸡胸、肋骨串珠、肌腱以及韧带的矿化、牙齿病变、听力障碍、活动乏力等。目前,对于XLH的发病机制尚未完全明确,但大多数病例主要是与位于X染色体上Xp22.1的PHEX基因突变有关。本研究对临床确诊为XLH的患者及其一级亲属进行PHEX基因的Sanger测序,根据检测结果对XLH发病的分子遗传学机制进行分析及探讨,有利于该疾病的产前诊断以及为治疗提供循证学依据。方法:研究对象为来自6个不同中国家系中的6个临床表现典型的确诊先证者及其家属,并招募200名健康志愿者。我们收集患者家族史、疾病发展史、体格检查资料、实验室及影像学检查结果作为基础资料。在签署知情同意书后,采集所有先证者及其家属的外周血DNA,针对PHEX基因经聚合酶链式反应(PCR)后直接基因测序。对于基因突变位点的保守性使用UniProt作为参考,对于确诊的XLH患者的基因检测结果采用Mutation Taster和PolyPhen-2进行致病性预测,对基因型与表现型关系进行分析。结果:我们在6个家系中均检测到PHEX基因,其中包括4个新发突变:10号内含子上的剪切方式的改变(c.1174-3C>G)引起蛋白质氨基酸序列改变;20号外显子上的错义突变***671Thr(c.2011C>A);7号外显子上的错义突变***271Arg(c.812T>G);4号外显子上的缺失突变***135ProfsX9(c.402delA)。在患者的健康家属及200名健康志愿者中并未检测到PHEX基因的突变。先证者的患病家属与先证者的检测结果都是

关键词： 骨髓增殖性肿瘤   临床特征   红细胞增多症   血小板增多症   骨髓纤维化   家族性   胚系易感性   全外显子组测序   遗传   先天性红细胞增多症   血红蛋白圣地亚哥   高氧亲和力血红蛋白变体  

摘要： 第一部分单中心Ph染色体阴性骨髓增殖性肿瘤患者临床特征分析[目的]自2008年世界卫生组织(World Health Organization,WHO)髓系肿瘤分类诊断标准制定以来,发现了大量与诊断、预后密切相关的细胞形态学、遗传学和分子生物学指标,有关诊断和预后的观点不断更新并最终影响到疾病治疗和管理。2016年,WHO针对包括骨髓增殖性肿瘤(myeloproliferative neoplasms,MPNs)在内的髓系肿瘤的诊断与分类标准进行了修订。本研究着眼于2016年WHO修订的最新分类标准对MPNs的更新要点,对本中心2009年～2017年诊断的2963例费城染色体阴性的经典型MPNs患者的初诊临床资料进行回顾性研究,分析新诊断标准应用下单中心MPNs疾病谱的变化和各亚型临床特征,以期早期正确分型、预后判断和治疗。[方法]收集本中心于2009年01月至2017年12月诊断的2963例MPNs患者诊断时的临床资料,采用最新的2016年WHO修订的分类标准对其进行重新分类,比较与2008年WHO标准分类结果的异同,分析根据新标准分类的不同亚型患者的初始临床特征。[结果](1)纳入2963例MPNs患者,应用2008年WHO诊断标准分类,诊断出 PV 604 例(占 20%),ET 2052 例(占 70%)和 PMF 212 例(占 7%),还有 95例(占3%)JAK2突变阳性并具有PV组织学特征而不满足2008年WHO关于PV血红蛋白标准的患者被暂归类为隐匿性PV(masked PV,mPV)。应用2016年WHO修订的诊断标准重新分类后,PV的诊断范围进一步扩大,95例mPV全部诊断为PV;ET构成比变化最大,一部分原来的ET患者发生分型改变,其中56例被诊断为PV(之前被“掩盖”),231例诊断为“纤维化前/早期”原发性骨髓纤维化(prePMF)。再分型后各亚型分布如下:ET患者1765例(占60%),PV患者755例(占25%),prePMF患者231例(占8%),“明显纤维化期”原发性骨髓纤维化(overt PMF)患者212例(占7%)。(2)与显性PV(overt PV)相比,mPV以男性多见,表现为更低的Hb水平和更高的血小板计数(P<0.001);与JAK2V617F阳性的ET相比,mPV仍以男性占优势,具有更高的Hb水平和白细胞计数以及更低的血小板计数,并且脾肿大的发生率和诊断时合并骨髓轻度纤维化(1级)的比例更高,以上均具有统计学意义(P<0.05);从JAK2V617F阳性的ET、mPV到overt PV,Hb水平依次递增,血小板计数依次递减,形成连续体。三组在既往血栓事件发生率方面没有明显差异(P>0.05)。(3)与2016年WHO标准诊断的ET(“真正的”ET)相比,从“旧的”ET中分离出的prePMF患者的血红蛋白水平、白细胞(WBC)计数和血小板(PLT)计数更高,有较高比例的患者出现WBC显著增高(WBC≥11 x109/L)和PLT极度增高(PLT≥1000x109/L);具有更高的脾肿大发生率,染色体核型异常的比例和初诊时合并骨髓轻度纤维化(1级)的比例也更高(以上P<0.001);两组在性别、年龄及驱动基因突变方面没有明显差异(P>0.05)。(4)与overt PMF相比,prePMF患者更年轻(中位年龄,57岁vs 61岁;P=0.024),年龄>65岁的患者比例较低,具有更高的Hb水平、白细胞计数和血小板计数,合并血细胞减少,脾肿大和具有体质性症状的患者比例以及染色体核型异常和具有复杂核型患者的比例明显为低(以上P<0.001);两组在性别和驱动基因突变谱方面没有明显差异(P>0.05);overt PMF组中高分子风险(high molecular risk,HMR)突变发生的频率高于prePMF组(P<0.05)。(5)我们在4例所谓“三阴性”的ET患者中检测到了两种不典型的JAK2基因错义突变,3例为JAK2 M601I突变,1例为JAK2 S602N突变,患者均表现为孤立的血小板增多症并缺乏其它克隆性标记。[结论](1)经2016年WHO分类标准再分型后,我中心MPNs的疾病谱发生了一定变化,对诊断和治疗模式可能产生重要影响。(2)Overt PV、mPV和JAK2V617F阳性的ET在临床特征上形成一个连续体,PV和JAK2V617F阳性的ET可能代表了JAK2突变的MPNs疾病谱的两个末端,而mPV则介于二者之间。(3)根据2016年WHO标准诊断的ET和prePMF具有不同的初始临床特征,是两个不同的疾病实体,区分二者具有重要的预后判断和治疗指导意义。(4)PrePMF和overt PMF在诊断时具有部分重叠的表型并具有连续性,二者在驱动基因分布方面没有明显

关键词： 高中生物学   遗传学知识   习题优化   实践应用  

摘要： 中学生物学的核心是遗传学知识。而习题是理解概念、巩固知识、掌握解题方法的最有效的教学手段之一,帮助学生在实践运用新知识的同时提高能力。现在的习题集种类繁多,如何选编高质有效并符合学生实际需求的习题已成为每位教师关注的问题,所以习题是当前的教育教学中需要重视的模块。本研究基于前人的研究基础,深入探讨高中生物学遗传学知识习题优化实践研究。首先对高中生物学遗传学知识习题进行分析,其次结合文献研究和问卷调查,总结出当前遗传学知识习题使用和遗传题解题中存在的问题。此外、根据习题资源中存在的习题内容重复、内容要求与《课标》不一致、缺乏针对性、涵盖的知识点不够全面等问题,从习题选择、习题归类、巩固知识、错因分析和纠正等几个方面提出习题优化的原则和策略,并进行习题优化生成遗传学习题册。最后,由遗传学专家和高级教师对习题册的质量进行测评后进行教学实践研究。在实习学校进行现有习题册的调查分析和优化习题册意见征集的基础上,本研究通过对中学生物遗传学知识内容设计了习题册,并对习题册进行质量测评,在高二年级两个理科班的教学实践中进行应用。得到以下结论:(1)优化习题册可以促进学生对遗传学知识掌握程度和能力提升。(2)优化习题册对学生成绩的提高有明显效果,两个班前后成绩都存在显著差异。5班和4班平均成绩分别增加了5.82和6.37分,增长率分别为8%和9%。(3)优化习题在促进学生学习主动性和激发学习兴趣上有明显效果。对遗传学知识的喜爱程度提高了10%。对遗传学知识的喜爱程度提高了10%。(4)有89.47%的学生对学习结果表示满意。减少的做题数量和提高的准确率,提高了教学效率,为习题质量提高提供了一定的参考。(5)优化习题增加习题的有效性,发挥了习题的最大功能。遗传学习题优化策略符合了国家课程改革理念。有助于增强学生学习积极性和提升学生的学习效果和科学素养、减轻学业负担,同时受到了学生们的欢迎和好评。本研究表明习题优化是可行性的,并旨在生物教学领域中为教师的习题优化提供一定的参考。