课程文献中心 更多>>

关键词： 全面发育迟缓   智力障碍   分析遗传学病因  

摘要： 目的研究全面发育迟缓/智力障碍(global developmental delay/intellectual disability,GDD/ID)的分子遗传学病因特点,探讨基因检测在诊断GDD/ID患儿中的应用价值。方法收集2017年9月至2019年12月就诊于武汉儿童医院神经内科及康复医学科230例GDD/ID患儿临床资料,同时采集患儿及父母的外周血标本进行基因检测及致病性分析。结果在230例GDD/ID患儿中,全面发育迟缓(GDD)患者203例,智力障碍(ID)患者27例,男性患儿略多于女性(1.57:1)。在合并症方面,GDD/ID合并癫痫患儿114例,GDD/ID合并孤独症谱系障碍者6例,GDD/ID合并肌张力障碍者4例。在61例拷贝数变异(CNV)阳性患儿中,其中GDD患儿52例,检测出67例CNV变异,包括微缺失微重复综合征12例,非染色体微缺失微重复综合征4例,良性CNV改变4例,可能良性CNV改变1例,致病性CNV改变17例,临床意义未明9例,可能致病性改变20例;ID患儿9例,检测出11例CNVs变异,包括微缺失微重复综合征6例,非染色体微缺失微重复综合征1例,可能致病性改变1例,致病性CNV改变1例,临床意义未明1例,良性CNV改变1例。在169例基因突变阳性患儿中,GDD患儿151例,共检测出103个相关基因突变,其中SCN1A基因突变为GDD患儿最常见变异;ID患儿18例,共检测出21个相关基因突变,基因分布较分散。在所有基因突变阳性患儿中,共检测出115个智力障碍相关基因,其中癫痫性脑病相关基因38个,常染色体显性遗传智力障碍基因37个,常染色体隐性遗传智力障碍基因21个,X连锁智力障碍基因19个。在染色体微缺失微重复综合征患儿中,Angelman/Prader-Willi患儿最多;在癫痫性脑病患儿中,SCN1A新发突变患儿最多;在女性全面发育迟缓患儿中,MECP2基因突变患儿最多。结论GDD/ID病因复杂,遗传学因素占比较多,且患儿常共患癫痫、孤独症谱系障碍、注意缺陷多动障碍等疾病,临床上要注意对这类患儿及时诊断及鉴别诊断。完善分子遗传学相关检查,能够明确部分GDD/ID患儿的病因,有助于对此类患儿进行早期识别、综合治疗及预后评估。

关键词： 斑尾刺虾虎鱼   黄鳍刺虾虎鱼   形态学   耳石傅立叶分析   遗传学  

摘要： 利用传统形态学、耳石形态学和线粒体DNA(mtDNA)部分片段作为标记方法,研究了斑尾刺虾虎鱼和黄鳍刺虾虎鱼的种间差异。结果显示,两种间的第二背鳍鳍棘数、第二背鳍鳍条数、臀鳍鳍棘数、臀鳍鳍条数和脊椎骨数无交叠现象;量度特征的主成分分析的结果显示,第一主成分的贡献率达到52.101%,主要反映了鱼体体型的比例,其中与躯干后部特征的相关性最高;依据判别函数的综合判别准确率为100%;单因素方差分析显示两种虾虎鱼除吻长、上颌长等头前部指标及与尾部长度相关指标之间的差异不显著外,其余各指标均存在显著性差异。耳石傅立叶分析的结果与量度特征分析的结果类似,主成分分析的结果显示,第一主成分贡献率为12.181%,主要反映了耳石背侧和前后缘的形状特征;依据判别函数的群体综合判别准确率为100%。对两种虾虎鱼线粒体DNA的D-loop、COⅠ、16S rRNA和12S rRNA片段序列进行比较分析,基于K-2P模型计算得到两种虾虎鱼种间遗传距离均显著大于种内遗传距离;以六丝钝尾虾虎鱼作为外群,结合GenBank上下载的刺虾虎鱼属其他种类的同源序列构建的系统树均显示两种虾虎鱼分别聚类,遗传差异显著。

关键词： 速课   精准医疗思维   医学遗传学  

摘要： 医学遗传学作为一门基础性学科,在医学人才培养中具有重要位置。但是基于该课程较抽象的特点,以及传统教学方式无法实现理论联系临床实践的问题,学生对于该门课程的重视程度和学习效果不佳。在人类基因组计划和高通量测序等重要技术的推动下,遗传学获得了迅猛的发展,精准医疗已经成为该学科的发展趋势,将该思维渗透到医学遗传学的教学过程中,期望推动教学效果的持续提升。本文介绍基于速课的精准医疗思维在医学遗传学教学中的设计,希望对医学教育提供帮助。

关键词： ASD   CMA   WES   SH2B1基因   海马脑区   流体智力  

摘要： 目的:本研究旨在利用染色体微阵列(Chromosomal Microarray Analysis,CMA)技术及核心家系(父母+先证者)全外显子组测序(Trio-based whole exome sequencing,Trio-WES)技术,对孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder,ASD)人群进行分子遗传学病因诊断,以明确两种检测技术在不同ASD疾病亚组中的诊疗价值;进一步针对ASD风险基因SH2B1进行认知行为相关神经生物学机制探究。方法:纳入2014-2017年诊断为ASD的汉族患儿414例,利用CMA检测进行分子病因学诊断。进一步经过严格质控,纳入已进行CMA检测的401例ASD的汉族儿童及197例遗传背景一致的正常对照进行拷贝数变异(copy number variants,CNVs)负荷分析,比较两组间罕见CNVs差异;同时根据CARS量表得分将ASD患儿分为不同疾病严重度亚组,比较轻-中度ASD组与重度ASD组间罕见CNVs差异。针对CNVs结果阴性的复杂ASD患儿进行Trio-WES检测进一步明确分子病因,评价两种高通量测序策略对临床诊疗的影响。基于UK Biobank大样本数据探索ASD风险基因SH2B1与认知功能的相关性及相关脑区。主要利用基线水平认知功能测试数据,包括流体智力(n=165460)、前瞻记忆(n=171549)、匹配测试(n=497882)和反应时间测试(n=496680)。其次纳入质控后的基因型数据(n=337199)、头颅MRI体素水平灰质体积数据(n=9888)、及MRI采集时流体智力测试得分数据(n=11176)。首先利用SH2B1基因与基线认知功能测试数据进行关联分析,筛选出与SH2B1相关的认知功能(流体智力)后,进一步进行SH2B1基因-海马灰质体积-流体智力的中介效应分析。为验证人群的发现,对SH2B1 flox+/+和SH2B1 flox-/-小鼠双侧海马CA1区注射AAV-hsyn-cre-EGFP进行SH2B1基因敲减,病毒注射4周后进行行为学实验(Y-迷宫和新异物体识别实验),观察其敲减对小鼠工作记忆等行为的影响。结果:CMA检测在ASD患儿中整体分子诊断率分别为7.2%;trio-WES检测在CNVs结果阴性的复杂型ASD患儿中整体分子诊断率为9.2%。在所有得到早期分子诊断的ASD患儿中,两种高通量测序影响近75%患儿临床诊疗策略。与正常人群相比,缺失型CNVs在ASD患儿中发生率更高(p=0.021),而重复型CNVs与ASD疾病的严重度相关(p=0.003)。基于CNVs分析发现的RIMS2有望成为ASD候选风险基因。利用WES检测发现的ASD风险基因均与低功能ASD相关,包括CHD8,AFF2,ADNP,POGZ,SHANK3和IL1RAPL1。利用UK Biobank大样本人群,发现ASD风险基因SH2B1上3个SNP位点(rs4788102,rs7359397和rs7498665)风险等位基因仅与人群流体智力得分相关(FDR p<5*10-8)。中介效应分析结果显示,校正测试年龄、性别、颅内体积和人群遗传结构前15个主成分因素后,双侧海马脑区显著中介3个SNP基因型与流体智力得分的关联性(p<0.005)。此外,经Alpha Sim校正(体素水平p<0.005,团块水平p<0.02)后,两侧海马团块仍可显著中介3个SNP位点与流体智力的相关性。且进一步校正BMI后,中介效应依然显著。在前期大样本人群研究发现的基础上进行SH2B1模式鼠研究显示,在Y迷宫实验中,与野生型小鼠相比,海马CA1脑区敲减SH2B1的小鼠表现为自发交替率显著下降(p<0.05)。在新异物体识别实验中,与对照组小鼠相比,海马CA1脑区敲减SH2B1的小鼠表现为对新物体的探索时间减少甚至对旧物体产生偏好(p<0.05)。结论:在汉族ASD患儿中,CMA检测作为一线分子诊断策略的基础上,针对CNVs结果阴性的复杂型ASD,可将家系WES作为补充检测手段,进一步提高复杂型ASD分子病因学检出率。缺失型CNVs对ASD分子病因贡献更大,而携带重复型CNVs会加重患儿ASD症状。ASD风险基因SH2B1与认知功能的相关性可能由海马脑区中介调控,但具体如何调控仍需进一步研究揭示。

关键词： 肝移植   他克莫司   血药浓度   基因多态性   表观遗传调控  

摘要： 研究目的肝移植手术是目前临床上治疗各种终末期肝病的最有效手段。排斥反应是移植术后常见的并发症,也是影响移植器官存活的重要因素。因此,器官移植成功的关键就是抑制受体的免疫系统从而预防排斥反应的发生,最有效的手段就是合理的选择和使用免疫抑制剂。目前临床上常用的免疫抑制三联方案为:他克莫司联合吗替麦考酚酸酯与糖皮质激素。其中,他克莫司因其有效治疗浓度范围窄,个体差异大,不良反应严重等药动学和药效学特征而需要通过血药浓度监测来调整其给药剂量。然而,由于血药浓度监测存在明显的滞后性,只能从一定程度上降低移植术后急性排斥反应和药物毒副作用的发生率。因此,找到影响他克莫司体内代谢过程的关键因素并确定其为生物标记物,在给药前即根据患者个体差异来确定个体化给药剂量,对于移植术后他克莫司应用的有效性和安全性有着更加重要的指导意义。目前关于他克莫司血药浓度个体差异原因的研究,主要集中在遗传药理学方面,且大多结论不尽一致。这提示他克莫司在人体肝脏的代谢过程,可能也受表观遗传学因素的影响,有待系统深入研究。同时,由于肝脏是药物代谢最重要的器官,在肝移植中,现有研究已提示供体肝脏在术后药物代谢研究中占据着更重要的地位。因此,肝移植术后他克莫司初始血药浓度监测结果更能反映出供体肝脏的个体差异。本研究拟以肝移植患者术后初始血药浓度为依据,观察供体肝脏遗传学和表观遗传学因素对肝移植患者术后他克莫司血药浓度的影响,力求明确、完善他克莫司在人体内的代谢途径以及影响其代谢过程的调控因素,以确定对临床制定他克莫司个体化给药方案具有指导意义的生物标记物。一、供体肝脏遗传学因素对他克莫司血药浓度的影响方法1.研究对象筛选及肝移植供体肝脏组织标本的收集本研究通过对郑州大学第一附属医院肝移植中心2016年6月至2018年6月的肝移植患者临床资料、术后免疫抑制剂给药方案及他克莫司初始血药浓度检测结果等进行分析,筛选出初始血药浓度差异较大(高浓度组>10μg/L,低浓度组<5μg/L)的两组共计78例患者,从河南省消化器官移植重点实验室生物样本库中获取此78例患者的供体肝脏标本(伦理号2019-KY-019)。2.78例供体肝脏组织DNA的提取及基因多态性的检测提取供肝组织DNA,PCR扩增目的DNA片段,参考现有文献,检测CYP3A5、CYP3A4、CYP3A7、UGT1A4、UGT2B7及ABCB1在亚洲人群中的常见单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点并和他克莫司初始血药浓度/剂量(concentration/dose,C/D)值进行对比分析,明确可能参与他克莫司代谢途径的药物代谢酶或转运体以及影响肝移植术后他克莫司初始血药浓度的SNP位点。3.携带CYP3A5*3/*3供体肝脏组织RNA的提取及全转录组测序根据基因多态性的检测结果,在携带CYP3A5*3/*3基因型的供体肝组织(共计36例)中筛选出依然存在他克莫司初始血药浓度差异的23例样本。将其分成高、低血药浓度组(高浓度组>10μg/L,低浓度组<5μg/L),提取组织RNA,进行全转录组测序并对测序结果进行分析。结果1.肝移植供体基因多态性与受体术后他克莫司初始血药浓度之间的相关性(1)CYP3A酶基因多态性:①78例肝移植供体CYP3A5表达型(CYP3A5*1/*1,CYP3A5*1/*3)与 CYP3A5 不表达型(CYP3A5*3/*3)相比,受体术后他克莫司初始血药浓度C/D值之间具有显著性差异(P=0.0026)。但携带CYP3A5*3/*3供体的肝移植患者中,他克莫司初始血药浓度仍存在较大个体差异。②供体CYP3 A4*1/*1基因型和携带CYP3 A4*1G基因型(*1/*1G+*1G/*1G)的他克莫司初始C/D值之间存在显著性差异(P=0.003)。③供体CYP3A7 rs2257401位点的GG型与GC+CC型相比,受体术后他克莫司初始血药浓度C/D值之间具有显著性差异(P=0.0028);供体CYP3A7 rs10211位点的AA型与GG+GA型相比,受体术后他克莫司初始血药浓度C/D值之间也具有显著性差异(P=0.041)。(2)UGT酶基因多态性:①78例供体肝组织中,UGT1A4的5个SNP位点之间存在连锁不平衡效应,但各位点的不同基因型之间的受体术后他克莫司初始血药浓度C/D值均无显著性差异(P=0.66)。②UGT2B7的5个SNP位点之间存在连锁不平衡效应,但各位点不同基因型之间的受体术后他克莫司初始血药浓度C/D值并不存在显著性差异(P=0.77)。(3)ABCB1基因多态性:78例供体肝组织中,ABCB1基因3个SNP位点不同基因型之间的受体术后他克莫司初始血药浓度C/D值均不存在显著性差异(P=0.29、0.60、0.50

关键词： 镉毒性   表观遗传   DNA甲基化   微小RNA   长链非编码RNA  

摘要： 镉作为一种常见的环境重金属污染物,极易在体内蓄积并危害人体健康。近年来,研究者从DNA、RNA和蛋白质等多个层面对镉的毒性机制开展了研究,普遍认为镉具有表观遗传毒性,其中以DNA甲基化和非编码RNA的研究最多也较为清楚。本文基于镉毒性在表观遗传学方面的最新研究,对DNA甲基化和非编码RNA在镉毒性中的作用和机制进行综述,为镉所致疾病的预防和诊疗提供理论依据和研究线索。

关键词： 牛   表观遗传   ATAC-seq   RNA-seq  

摘要： 每个细胞的染色质DNA只有一部分表现出生物学活性,其染色质结构疏松,基因组DNA呈松散状态,该区域能够与转录元件结合,是染色质中基因表达活跃的部分,人们称之为染色质开放区域或者易接近染色质区域,剩下不活跃的部分则被紧密包装成高度凝聚的染色质而沉默下来。染色质的开放和关闭状态直接影响了包括基因表达、DNA复制和DNA修复在内的多种基本细胞过程。与此同时,染色质开放区域也是多种表观遗传修饰的共同结果,特别是与促进基因表达相关的表观遗传修饰的共同作用结果。克隆动物存活率低、发育异常,通常认为是表观修饰异常造成的。目前,克隆动物染色质开放区域差异性分析还没有任何相关研究,异常的表观修饰如何调控和影响克隆动物染色质状态也并不清楚。为了理解体细胞克隆牛染色质开放区域差异,我们选取外表健康存活的6头克隆牛耳组织样为研究对象,将其分成两组,其中3头（huiwa（HW）,xingwa（XW）,longwa（LW））克隆牛的供体核来源于胎儿成纤维细胞,另3头克隆牛（S1231,S1232,S1253）的供体核来源输卵管上皮细胞的体细胞,我们将这6种细胞的供体核进行ATAC-seq和RNA-seq分析。在ATAC-seq中,每头牛都获得19.5G clean bases以上的数据。进一步的数据分析发现40029条peaks的差异,其中18893条上调,21136条下调。根据这些数据进行peak注释,得到8653个基因中的3938个差异基因,将这些基因注释到染色体上,同时将基因进行通路分析,他们分布在317个通路上。在组蛋白甲基化过程中我们分析了KMT2、KMT5B、SUV39H1、SETDB、EZH和EED等相关基因的染色质开放情况。在DNA甲基化过程和去甲基化方面我们分析了APOBEC3Z1、TDE、SUMG1、DNMT1、DNMT3B和DNMT3A等基因的染色质开放情况。另外我们也分析了差异peak上存在的motif和差异motif。共预测到新的161个motif,并分析了这些motif在差异的19563个peak上的位置,其中有高表达的113个motif。在RNA-seq中,我们从基因和亚型两个方面统计基因表达水平的情况。我们发现1805个差异表达基因,而在不同基因亚型中存在7221个差异。我们在GO富集分析中发现差异基因在细胞进程、细胞、细胞部分和结合等过程中存在异常。我们着重分析了27个“生物学过程”、17个“细胞成分”和11个“分子功能”三个大类的差异聚类:在“细胞进程”通路中共有多达941个基因的差异;“细胞”通路和“细胞部分”通路中均有941个基因的差异;在“结合”通路中有784个基因差异。在亚型分析中,在“细胞进程”通路共有多达3804个基因的差异;“细胞”通路和“细胞部分”通路中均有3921个基因的差异;在“结合”通路中有3328个基因差异。此外我们挑选了富集最为显著的20条通路,绘制了差异表达基因KEGG富集散点。我们对KEGG富集的通路进行解析,统计差异表达基因,并将上调和下调基因注释到蛋白,在数据库中可以调取任意通路的差异基因,也可以直观的看到差异基因的变化。此外我们还分析并预测了可变剪切体、SNP/Indel和lnc RNA等。正常情况下,我们选取的同种克隆牛耳组织样品的ATAC和RNA虽有差别,但是不应该有明显的聚类倾向。我们分析却发现胎儿成纤维细胞和输卵管上皮细胞来源的耳组织有明显的聚类,而且ATAC-seq和RNA-seq分析结果较为一致,即3头胎儿成纤维细胞来源的耳组织样聚在一起,而另3头输卵管上皮细胞来源的耳组织样也聚在一起。这说明,虽然分析组织来源于相同部位的耳组织样,但是,由于它们的供体核细胞来源不同,而显出了染色质开放程度和基因表达差异。这一方面说明,不同来源的重编程体细胞的重编程表观修饰存在差异,即使是看似健康存活的克隆牛也不例外,更不用说克隆死亡和发育异常的克隆牛了。二阶聚类也说明,重编程的体细胞存在供体核细胞的影响记忆。

关键词： 长寿   心血管健康   脂代谢   mRNA-seq   DNA甲基化  

摘要： 背景:全球老龄化已引起社会各界的高度关注。老龄化的核心问题是衰老退行性变所导致的健康问题。实现健康老龄化对老年群体的健康维护意义重大。长寿人群健康状态良好,具有延后甚至规避慢性疾病发病的特征,是研究健康老龄化的最佳模型。长寿是多环境因素共同影响的复杂生命过程。在基因组、转录组、表观遗传组、代谢组水平开展长寿内外影响因素的系统研究,对于挖掘长寿相关生物标记、探索长寿机制具有重要帮助。对于如何预防衰老性疾病,实现健康老龄化也具有指导意义。目的:1.在中国长寿人群中识别长寿-心血管健康关联变异(longevity-cardiovascular health associated variant,longCav)。2.分析中国长寿人群转录组水平表达谱,并比较有长寿史人群与无长寿史人群表达谱水平差异,筛选长寿人群的生物标记物(Biomarkers)。3.应用DNA甲基化生物钟构建中国长寿人群的真实生物学年龄的评估模型。方法:1.联合应用全外显子组测序(Whole-exome sequencing,WES)和全基因组关联研究(Genome-Wide Association Studies,GWAS)方法,在5107名健康长寿个体和8469名年龄匹配健康对照组个体共计13576例样本中,筛选长寿-心血管健康关联变异(longCav)。2.应用mRNA-seq测序技术检测12例健康长寿有长寿史者、76例健康长寿无长寿史者和50例当地健康对照且无长寿史者共计138例样本的转录组表达谱水平。比较有长寿史人群与无长寿史人群表达谱、生物学过程、KEGG通路和疾病富集的差异。分析两组人群差异基因的共表达情况和蛋白质相互作用关系。采用支持向量机(Support Vector Machine,SVM)分类算法,筛选得到长寿人群Biomarker。3.使用重亚硫酸氢盐测序(Bisulfite Sequence PCR,BSP)技术检测261例样本P2RX6、EDARADD、IPO8、NHLRC1和SCGN基因目的区域甲基化水平。将样本在20-110岁范围内分为9组,每组间隔10岁,检测各基因目的区域在各年龄组间的基因甲基化水平差异,建立基于甲基化水平校准时序年龄的、反应“真实”生理年龄的评估模型。通过交叉验证方式判定年龄评估模型结果与实际年龄符合率。结果:1.识别2个与长寿-心血管健康关联的变异(TFPI rs7586970 T,p=0.013,OR=1.100和ADAMTS7 rs3825807 A,p=0.017,OR=1.198)。两遗传变异与APOEε3交互作用维持脂代谢平衡。两个变异通过维持脂代谢平衡,促进长寿。2.健康长寿组与当地健康对照组基因表达谱比较分析,共得到581个差异表达基因,其中92个基因上调,489个基因下调。表达水平出现显著差异(| log2FC |>2)的基因共31个。有长寿史组与无长寿史组的基因表达谱不同。有长寿史组与无长寿史组差异表达基因参与的生物学过程、KEGG通路和疾病富集不同。两组差异基因的共表达模式和蛋白质互作方式不同。筛选的长寿人群Biomarker经ROC曲线判定,AUC>0.99。3.各组EDARADD基因、NHLRC1基因、SCGN 基因、P2RX6基因和IPO8基因目的区域CpG甲基化水平与年龄相关。NHLRC1基因目的区域甲基化状态随年龄增长由杂合甲基化转换为纯合甲基化。年龄(y)推断模型:y=3.1 98-0.870*P2RX6-5.966*EDARADD-0.201*IPO8-0.582*NHLRC1-1.622*SCGN+52.417*地区。该年龄模型能解释本实验人群94.4%的年龄变化。结论:1.在长寿人群中识别2个长寿-心血管健康关联变异,变异通过与APOE ε3交互作用维持脂代谢平衡,促进长寿。***-seq结果显示有长寿史组与无长寿史组基因表达谱不同,揭示有长寿史人群与无长寿史人群达到长寿目标的信号通路、作用机制存在差异。***基因、NHLRC1基因、SCGN基因、P2RX6基因和IPO8基因目的区域甲基化水平可共同构建有效的中国长寿人群年龄推断模型。长寿机制复杂,本研究结果有助于进一步开展长寿机制研究,为潜在的临床实际应用的实现提供可靠的研究依据。

关键词： ANCA相关血管炎   预后分析   复发   大动脉炎   全外显子测序   全基因组关联分析   Burden分析  

摘要： 第一部分ANCA相关血管炎临床与预后分析目的:对北京协和医院住院ANCA相关血管炎患者进行临床与预后分析,包括长期生存、中间结局预后及影响因素相关研究。建立北京协和医院单中心ANCA相关血管炎预后研究队列,为ANCA相关血管炎多中心、前瞻性队列建立及长期预后研究提供框架及基础,并指导后续治疗及预后相关研究。方法:回顾性纳入自1999年至2019年间北京协和医院住院的ANCA相关血管炎(AAV)患者的基线资料,以临床确诊AAV时间为研究起始时间点,收集人口学、临床特征、免疫学指标等基线资料并进行随访,以死亡、复发、出现终末期肾脏病、重症肺部感染及心血管事件作为研究终点。采用寿命表法及Kaplan-Meier曲线描述及分析,分层Kaplan-Meier曲线应用Log-Rank法检验,对其中具有统计学意义的指标、Cox单因素回归分析及临床可能具有统计学意义的指标进行进一步的Cox多因素回归分析。结果:944例AAV患者,其中MPA 480例,GPA 318例,EGPA 146例,男:女分别为 0.97:1,1.18:1,1.75:1;发病年龄分别为 63(55,71)岁,45(27,56)岁,43(27,59)岁;发病到确诊的时间分别为3(2,11)个月,5(2,15)个月,18(6,60)个月。脏器受累中,MPA患者肺间质病变和肾脏受累较多见;GPA患者肺结节或空洞、ENT受累、肾脏及眼部受累较多见;EGPA患者以肺浸润、鼻与鼻窦较多见。MPA 和 EGPA 以 p-ANCA/MPO-ANCA 为主,GPA 以 c-ANCA/PR3-ANCA 为主。MPA、GPA、EGPA 患者 BVAS 评分分别为 20(17,25),22(18,28),19(14,26);VDI 评分分别为3(2,4),4(2,5),4(3,6)。治疗以糖皮质激素及环磷酰胺为主。并发症以肺部感染最多见。944例AAV患者共随访728例(355例MPA,263例GPA,110例EGPA),三种AAV患者中位随访时长分别为29、43、34个月。(1).随访期间有107例(30.1%)MPA、39 例(14.8%)GPA、10 例(9.1%)EGPA 死亡,MPA、GPA 和 EGPA 患者主要死于肺部感染或原发病活动。AAV患者整体1年累积生存率为89.3%,其中MPA患者3个月、6个月、1年累积死亡率分别为10.6%、13.6%、16.4%。MPA死亡的独立危险因素包括发病年龄晚(HR=1.037,P<0.001),肺部受累(HR=4.530,P=0.001),肾功能不全(HR=1.715,P=0.018),肺部感染(HR=2.804,P<0.001)。GPA 死亡的独立危险因素包括肾脏受累(HR=4.231,P=0.02),肺部感染(HR=2.607,P=0.004)。EGPA死亡危险因素还包括 BVAS ≥ 30(χ2=6.537,P=0.011),VDI ≥ 5(χ2=11.115,P=0.001)及合并恶性肿瘤(χ2=8.995,P=0.003)、重症感染(χ2=25.337,P<0.001)。(2).随访期间有 138 例(45.8%)MPA、183 例(74.4%)GPA、67 例(63.8%)EGPA 患者出现复发,AAV患者整体1年的无复发生存率为70.6%,其中GPA患者6个月、1年的累积复发率分别为20.5%、36%,EGPA患者6个月、1年的累积复发率分别为23.8%、41.8%。MPA复发的独立危险因素包括男性(HR=1.565,P=0.015)、肺浸润(HR=1.49,P=0.032)、肌酐 250-499 μ mol/l(HR=1.979,P=0.001)。GPA 复发的独立危险因素包括咯血(HR=1.531,P=0.012)。EGPA复发独立危险因素包括胸腔积液(HR=2.598,P=0.005),肺部感染(HR=2.468,P=0.001),而独立保护因素为下肢深静脉血栓(HR=0.254,P=0.006)。(3).随访期间有 68 例 MPA、21 例 GPA、1 例 EGPA 患者出现ESRD。AAV患者整体1年肾脏存活率为90.1%,其中MPA患者3个月、6个月、1年的终末期肾脏病发生率分别为12%、12.6%、14.4%。AAV患者出现ESRD的独立危险因素包括肺泡出血(HR=2.368,P<0.001),基线肌酐水平(HR=1.003,P<0.001),VDI评分高(HR=1.218,P=0.002);独立保护因素包括 ENT 受累(HR=0.4,P=0.013)。(4).随访期间有 113 例(31.8%)MPA、29 例(10.9%)GPA、3 例(2.7%)EGPA 患者继发重症肺部感染。AAV患者整体1年无重症

关键词： 核心素养   高中生物学   单元教学设计   遗传学板块  

摘要： 自中国共产党第十八次全国代表大会将“立德树人”确立为中国社会主义教育的根本任务,发展学生的核心素养已成为新课程体系建设的重点。教育部于2018年颁布的《普通高中生物学课程标准（2017年版）》将培养全体学生的生物学学科核心素养作为生物学的课程目标,生物学学科核心素养是在核心概念的构建过程中逐步形成的,为实现在教学过程中帮助学生有效理解抽象的核心概念及构建完整的知识体系,有研究指出应以知识单元作为课程教学设计的基本单位,注重知识概念间的关联,进行基于单元教学设计的教学实践活动。在理论研究方面,本研究结合教学设计的基本原理,对单元教学设计的概念和原则进行界定、选择系统化的单元教学设计表征模型、并对具体实施方法进行分析和讨论。在实践过程中,本研究选择生命科学领域发展速度最快、涉及范围最广、知识内容最繁杂、也是学生理解最为困难的遗传学板块知识为单元教学设计内容,依据上述方法与原则构建单元教学设计案例,首先从单元教学内容分析、学习者与学习环境分析、单元教学目标体系构建三个方面进行单元整体教学设计;然后在具体的课时教学目标要求下搭配课时类型,选择教学组织策略与方法,设计课堂教学情境与活动,完成课时具体教学设计。按照上述单元教学设计方案在贵州省铜仁市某普通高中二年级的两个理科班进行为期一个月的课堂教学实践活动,并通过多层次的教学评价对基于核心素养的高中生物学单元教学案例结果进行分析,得出研究结论。本文呈现了以“可遗传变异”单元为基本单位的单元教学设计案例,并进行了课堂观察记录、教师访谈结果、单元学业水平测试成绩分析等多种形式的教学评价。反馈结果显示经过三课时基于核心素养的单元教学实践活动,两个班级均有超过80%的学生构建了基因突变、基因重组等次位概念,并能利用这些概念分析和解释一定的生物学情境中的生命现象、解决实际问题,说明经过单元教学活动,学生初步构建了本单元的核心概念体系,生物学学科核心素养水平也得到了切实发展。此结果证明了单元教学设计对课时整体规划的优势,说明以此为指导的教学实践,在核心概念构建过程中发展学生生物学学科核心素养具有较高的可行性。但单元检测结果同时也反映出了学生对跨单元知识综合运用能力仍存在一定的不足、核心素养发展水平仍需进一步提高等具体问题,说明了以往的教学方式导致了学生科学思维素养的发展欠缺,难以主动建立跨单元概念间的联系。因此,在未来的单元教学设计过程中,教师需要高度重视关注学生科学思维能力的培养,帮助学生全面发展生物学学科核心素养。